光学显微镜的结构及其使用

时间:2024.4.5

第一章:细胞概述

重点解析:光学显微镜的结构及其使用

普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。
◆机械部分
(1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。
(2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。
(3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。
(4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
(5)物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。
(6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
(7)调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。
①粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。
②细调节器(细螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。
◆照明部分
装在镜台下方,包括反光镜,集光器。
(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。
(2)集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其作用是把光线集中到所要观察的标本上。
①聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱。
②光圈(虹彩光圈):在聚光镜下方,由十几张金属薄片组成,其外侧伸出一柄,推动它可调节其开孔的大小,以调节光量。
◆光学部分
(1)目镜:装在镜筒的上端,通常备有2-3个,上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数,一般装的是10×的目镜。
(2)物镜:装在镜筒下端的旋转器上,一般有3-4个物镜,其中最短的刻有“10×”符号的为低倍镜,较长的刻有“40×”符号的为高倍镜,最长的刻有“100×”符号的为油镜,此外,在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线,以示区别。
显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积,如物镜为10×,目镜为10×,其放大倍数就为10×10=100。

【成像特点】
观察到的是经两次放大后的倒立虚像

【使用方法】
■低倍镜的使用方法
(1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边1-2寸为宜,便于坐着操作。
(2)对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈,上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。
(3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位调到通光孔的正中。
(4)调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。
如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台。
■高倍镜的使用方法
(1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。
(2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。
(3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5-1圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)
如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。

典题精练

1.下列说法正确的是(    )
A、SARS病毒能够单独完成各种生命活动        B、细菌本身不能够单独完成各种生命活动    

C、多细胞生物中单个细胞能单独完成各种生命活动      D 、生命活动离不开细胞

2.没有成形细胞核的生物和没有细胞结构的生物分别是(     )
A.大肠杆菌与蓝藻        B.大肠杆菌与病毒       C.大肠杆菌与酵母菌       D.酵母菌与病毒

3.下列四组生物中,细胞结构最相似的是(     )
A、变形虫、水绵、香菇         B、烟草、草履虫、链霉菌(放线菌)    
C、小麦、番茄、大豆            D、酵母菌、灵芝、豌豆

4.在观察装片时,由低倍镜换成高倍镜,细胞大小、细胞数目、视野亮度的变化(    )
A.变大、变少、变暗          B.变大、变多、变亮        
C.变小、变多、变暗          D.变小、变多、变亮
5.在光照明亮的实验室里,在使用显微镜观察植物的表皮细胞时,视野应调暗些。选择下列哪一项能将视野调暗(      )
A、改用凹面反光镜、放大光圈       B、改用凹面反光镜、缩小光圈      
C、改用平面反光镜、缩小光圈       D、改用平面反光镜、放大光圈

6.某同学在显微镜下观察落花生子叶的切片,当转动细准焦螺旋时,有一部分细胞看得清楚,另一部分细胞较模糊,这是由于(      )
A、反光镜未调好   B、标本切得厚薄不均    C、细准焦螺旋未调好    D、显微镜物镜被破坏
7.关于细胞学说的叙述,不正确的是(       )
A、它揭示了动植物细胞的统一性和生物体结构的统一性  
B、建立者主要是施莱登和施旺  
C、它揭示了动植物细胞的统一性和多样性  
D、是多位科学家在探索中开拓、继承、修正和发展而建立的

8.小小的细胞奥秘多,前人探索付辛劳!下列关于细胞的说法,正确的是   (     )
A.细胞是所有生物体结构和功能的基本单位    B.细胞是地球上最基本的生命系统
C.同一生物体的细胞结构和功能都相同    D.单细胞生物都是原核生物

9.生物体结构和功能的基本单位是  (     )

A.个体          B.细胞         C.各种化合物         D.各种元素

10.在观察装片时,由低倍镜换成高倍镜,细胞大小、细胞数目、视野亮度的变化:

A.变大、变少、变暗 B.变大、变多、变亮  C.变小、变多、变暗 D.变小、变多、变亮

11.下列显微镜操作的方法中,正确的一组是   (     )

1.对光时,阳光照在反光镜上,视野越亮越好  2.在进行低倍物镜与高倍物镜的转换时,扳动物镜转动较省力   3.使用完毕之后,要拭去载物台上的水和赃物  4.装箱之前,应下降镜筒,使物镜插入通光孔中   5.取、放显微镜时,要左手托镜座、右手握镜臂,并且要轻拿轻放;     A、123        B、124       C、35        D、234

12.用光学显微镜观察标本时,标本被放大100倍是指放大标本的    (     )

A.长度或宽度         B.表面积          C.像的面积        D.体积

13.当显微镜的目镜为10ⅹ,物镜为10ⅹ时,视野范围内看到一行相连的8个细胞。若目镜不变,物镜换成40ⅹ时,则在视野中可看到这行细胞中的   (     )

 A、2个        B、4个       C、16个       D、32个

14.恩格斯曾经把“能量守恒和转化定律、细胞学说、进化论”并称为19世纪自然科学的三大发现。其中细胞学说创立的重要意义在于   (     )

1.将千变万化的生物界通过细胞结构统一起来  2.证明了生物之间存在着亲缘关系3.为达尔文的进化论奠定了唯物主义基础4.证明了生物界与非生物界之间存在着统一性和差异性

A、1234       B、123          C、12          D、34

15、细胞具有多样性,下面对细胞形态结构与功能的关系的理解有偏差的是   (    )

A、卵细胞富含营养、体积大与早期胚胎发育相适应B、镜子具有鞭毛与其运动功能相适应

C、神经元有长的突起与其传导功能相适应  D、红细胞无细胞核与其能再生的功能相适应

16、成年人大约有1014个细胞组成,这些细胞的共同点是     (     )

A、形态相似      B、大小相似        C、结构与功能相统一    D、功能相似

17、用显微镜观察人血涂片时,发现视野内有一清晰的淋巴细胞如图。为进一步放大该细胞,首先应将其移至视野正中央,则装片的移动方向应是    (     )

A.向右上方  B.向左上方

C.向右下方  D.向左下方

15.下图是光学显微镜的一组镜头,目镜标有5×和15×字样,物镜标有10×和40×字样。请看图回答:

(1)要仔细观察叶绿体的形态时,显微镜的目镜、物镜及其与盖玻片间距离的组合为_________(用标号作答)。此时放大的倍数为_________。

(2)在观察中,③与④的显微视野中比较明亮的是_________。

(3)若在低倍镜视野中发现有一异物,当移动装片时,异物不动,转换高倍镜后,异物仍可观察到,此异物可能存在于  (    )

A.物镜上       B.目镜上         C.装片上        D.反光镜上


第二篇:普通光学显微镜的结构及使用


普通光学显微镜的结构及使用方法

一、显微镜的构造

显微镜是一种复杂的光学仪器。它是医学实验常用工具之一,其作用是将观察的标本放大,以便观察和分析。

一般光学显微镜包括机械装置和光学系统两大部分,如图1-1所示。

(一)机械装置

1. 镜座:位于最底部的构造,为整个显微镜的基座,用以支持着整个镜体,起稳固作用。

2. 镜柱:为垂直于镜座上的短柱,用以支持镜臂。

3. 镜臂:为支持镜筒和镜台的呈弓形结构的部分,是取用显微镜时握拿的部分。镜筒直立式光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节,可使镜筒向后倾斜一定角度以方便观察,但使用时倾斜角度不应超过45°,否则显微镜由于重心偏移容易翻ss倒。

4. 调节器:也称调焦螺旋,为调节焦距的装置,位于镜臂的上端(镜筒直立式光镜)或下端(镜筒倾斜式光镜),分粗调节器 (粗准焦螺旋)和细调节器(细准焦螺旋)两种。粗准焦螺旋可使镜筒或镜台作较快或较大幅度的升降,能迅速调节好焦距,适于低倍镜观察时调焦。细准焦螺旋可使镜筒或镜台缓慢或较小幅度地升降,使用于在低倍镜下用粗准焦螺旋找到物体后,在高倍镜和油镜下进行焦距的精细调节,藉以对物体不同层次、深度的结构做细致地观察。

5. 镜筒:位于镜臂的前方,它是一个齿状脊板与调节器相接的圆筒状结构,上端装载目镜,下端连接物镜转换器。根据镜筒的数目,光镜可分为单筒式和双筒式。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种,镜筒直立式光镜的目镜与物镜的光轴在同一直线上,而镜筒倾斜式光镜的目镜与物镜的中心线互成45°角,在镜筒中装有使光线转折45°的棱镜;双筒式光镜的镜筒均为倾斜式的。

6.转换器:又称旋转盘,位于镜筒下端的一个可旋转的凹形圆盘上,一般装有2~4个放大倍数不同的物镜。旋转它就可以转换物镜。旋转盘边缘有一定卡,当旋至物镜和镜筒成直线时,就发出“咔”的响声,这时方可观察玻片标本。

7. 载物台:也称镜台,是位于镜臂下面的平台,用以承放玻片标本。载物台中央有一圆形的通光孔,光线可以通过它由下向上反射。

8.压片夹:两片装有弹簧的金属片,用于固定玻片标本。

(二)光学系统

A. 反光镜:是装在镜台下面、镜柱前方的一面可转动的圆镜,它有平凹两面。平面镜聚光力弱,适合光线较强时使用。凹面镜聚光力强,适于光线较弱时使用。转动反光镜,可将光源反射到聚光镜上,再经镜台中央圆孔照明标本。

B. 遮光器:是在聚光镜底部的一个圆环状结构。其上有许多大小不一的光圈。可以旋转以调节通光孔的进光量。

C. 目镜:装在镜筒上端,其上一般刻有放大倍数(如5×,10×)。目镜内常装有一指示针,用以指示要观察的某一部分 。

D. 物镜:装在物镜转换器上,一般分低倍镜、高倍镜和油镜三种。低倍镜镜体较短,放大倍数小;高倍镜镜体较长,放大倍数较大;油镜镜体最长,放大倍数最大(在镜体上刻有数字,低倍镜一般有4×、10×,高倍镜一般有40×、45×,油镜一般是90×、100×,×表示放大倍数)。

显微镜放大倍数的计算:目镜放大倍数×物镜放大倍数=显微镜对实物的放大倍数。

二、显微镜的使用方法

(一)低倍镜的使用

1. 把显微镜放在桌面的左侧,镜臂对向胸前,坐下进行操作。用手转动粗准焦螺旋,使镜筒上升,然后转动物镜转换器,使低倍镜(较短的物镜)对准镜台中央圆孔(当转动到听见“咔”声响,或同时亦感到有阻力时立即停止转动,说明物镜已与镜筒成一直线)。

2. 对光:旋转载物台下方的遮光器,调到最大光圈。用左眼(两个眼睛都要睁开)在目镜上观察,同时用手调整反光镜,对好光源。要求视野达到完全均匀明亮。

3. 放置玻片标本:取制作好的玻片标本放在镜台上,有盖玻片的一面朝上。玻片两端用压片夹夹住,然后移动玻片,使玻片上要观察的标本对准载物台中央圆孔(通光孔)。

4. 调节焦距(也称对焦):转动粗准焦螺旋,使低倍镜距玻片标本0.5mm左右。(注意:必须从显微镜侧面观察物镜与玻片的距离;观察的同时转动粗准焦螺旋,以防镜头碰撞玻片造成损坏。)用左眼从目镜上观察,用手慢慢转动粗调螺旋下降镜台,当视野中出现物像时,再调节细准焦螺旋,直至视野中出现清晰的物像为止。如果物像不在视野中央,可稍微移动玻片位置(注意:移动玻片的方向与观察物像移动的方向恰好是相反的)。

    反复练习上述各操作步骤,做到迅速熟练地找到标本,以及取光合适(即较熟练的应用反光镜、光栏和聚光镜)。

(二)高倍镜的使用

1. 一定要先在低倍镜下找到要观察的标本物像后,并把要放大的部分移至视野正中,同时调节到最清晰程度,才能进行高倍镜的观察。

2. 转动物镜转换器,使高倍镜 (较长的物镜) 转到镜台中央圆孔处。转换高倍镜时速度要慢,要细心,并从侧面进行观察(防止高倍镜碰撞玻片)。如果高倍镜碰到玻片,说明低倍镜的物距没有调节好,应重新转换到低倍镜下操作。

3. 调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察。这时物像往往不清楚、或者要观察的部分不在视野当中,可用细准焦螺旋慢慢向上或向下转动即能清楚看到物像(注意:此时物镜离玻片非常近,切勿使用粗准焦螺旋,以免物镜与玻片想撞受损)。一般只需转动半圈或一圈就能达到要求。在高倍镜下,视野相对较暗,可适当调节反光镜及遮光器,使通光量增加,提高视野亮度。

三、使用显微镜注意事项

1. 持镜时要一手紧握镜臂,一手托住镜座,绝不能一把提起显微镜便走,以防目镜从镜筒滑出或反光镜脱落。

2. 轻拿轻放,不要把显微镜放在实验台边缘,防止碰翻落地。

3. 显微镜光学系统部件要用清洁的擦镜纸轻轻揩擦,切勿口吹、手抹或用粗布揩擦。

4. 使用时先用低倍镜调整光线。观察活体标本或染色较浅的标本时,要适当关小光圈(遮光器)使视野变暗,方能看得清楚。

5. 放置玻片标本时要对准镜台孔正中央,并且盖玻片朝上,如标本玻片反放时高倍镜下看不到物像,并容易压坏玻片或物镜。

6. 观察时要双目睁开,切勿闭上一只眼睛。左眼观察视野,右眼用以绘图。低倍镜用粗准焦螺旋调节物距,高倍镜要用细准焦螺旋,粗、细准焦螺旋都不能单方向过度地旋转。过度调节粗准焦螺旋易压碎镜片和损坏物镜。

8. 使用完毕后,取下玻片,转动粗准焦螺旋使镜台下降,转动物镜转换器,使物镜离开聚光孔。然后以右手握镜臂,左手托镜座轻轻放人镜箱中。

9. 每次使用显微镜之前,先逐项检查显微镜各部分有无损坏。如发现损坏,应及时向教师报告。使用之后,认真检查显微镜各部分有无损坏并放回镜箱中。

显微镜的结构和使用同步练习

1.用来擦拭显微镜头污点的是                                  (    )

A.纸巾              B.布           C.棉花            D.擦镜纸

2.使用显微镜观察时,固定装片用到的结构是                     (    )

A.粗准焦螺旋    B.压片夹      C.反光镜      D.细准焦螺旋

3.在使用显微镜进行对光时,下述四个实验步骤,正确的顺序是  (    )

①转动遮光器,使较大的光圈对准通光孔  ②转动遮光器,使低倍物镜对准通光孔  ③左眼注视目镜,右眼睁开  ④转动反光镜调出一个白亮的视野

A.①③②④      B.②①③④      C.③④②①      D.③②④①

4.下列关于高倍镜使用的叙述中,正确的是(  )

A.因为蕨类的叶片较大,在高倍镜下容易找到,所以可直接使用高倍镜来进行观察

B.在低倍镜下找到叶片细胞,即可换用高倍镜进行观察

C.换用高倍物镜后,应保持粗准焦螺旋不动,再使用细准焦螺旋调至物像最清晰为止

D.为了使高倍镜下的视野亮一些,可使用最大的光圈或平面反光镜

5.一个细小物体若被显微镜放大50倍,这里“被放大50倍“是指该细小物体的(   )

A.体积        B.表面积        C.像的面积       D.像的长度或宽度

6.当显微镜的物镜为10X,把物镜换为40X时,则视野内的物像放大倍数为          

A.长度和宽度均放大4倍       B.面积放大了4倍

C.长度或宽度放大了4倍    D.标本体积放大了4倍

7.如果在目镜为5×、物镜为10×时, 显微镜视野里可观察到100个细胞。那么,在物镜放大倍数不变的情况下,把目镜改为15×,视野里可观察到的细胞数目是                 (    )

A .4个      B.5个      C.10个      D.20个

8.右图是光学显微镜的一组镜头,目镜标有5×字样和15×字样,物镜标有10×和40×字样。请根据图回答下面的问题。

(1)仔细观察叶绿体的形态时,显微镜的目镜、物镜及其与盖玻片间距离的组合为        (用标号作答)。此时放大的倍数为       

9.当低倍镜换为高倍镜后                                      (    )

A.细胞数量变多,视野变暗      B.细胞数量变多,视野变亮

C.细胞数量变少,视野变暗      D.细胞数量变少,视野变亮

10.某同学在观察洋葱表皮细胞实验中,分别采用了以下四种不同的目镜和物镜组合,则他在一个视野中可以观察到数目最多的是                           (    )

A.5×、10×      B.10×、40×      C.15×、10×      D.20×、40×

11.下表格中的数据表示ABCD四台显微镜的放大倍数,分析回答问题:

 目镜 物镜

A 10X 10X     B 5X 40X     C 16X 20X      D 16X 40X

[1]如果观察同一标本的同一区域,视野内细胞数目最少的是(  )

[2]如果观察同一标本的同一区域,视野最亮的是(  )

[3]物镜距离标本最近的是(   )

[4]物镜头最长的是(   )

12.①、②、③、④、⑤是使用操作显微镜的几个步骤。右图为显微镜观察中的两个视野,其中细胞甲为主要观察对象,由视野(1)到视野(2)时,操作过程的正确顺序是(  ) ①转动粗准焦螺旋  ②转动细准焦螺旋   ③调节光源  ④转动转换器   ⑤移动玻片

A.①→②→③→④     B.③→①→② 

C.⑤→④→③→②     D.④→⑤→①→②

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