环工综合实验
光学显微镜的使用
实验报告
环境科学与工程学院实验中心
第二篇：实验3普通显微镜使用方法
实验三 普通显微镜的构造与使用方法
一、实验目的和要求：
1. 熟悉两类显微镜的构造和原理
2. 正确掌握两类显微镜的使用方法
3. 牢记显微镜使用时的注意事项
二、显微镜的种类及原理
1.光学显微镜的类型
光学显微镜主要有以下几种类型：普通光学显微镜、体视显微镜、倒置显微镜、暗场显微镜、相衬显微镜、偏振光显微镜、微分干涉衬显微镜、荧光显微镜、万能衬显微镜、电视衬显微镜。其中普通光学显微镜、体视显微镜是海洋生物学实验经常使用的显微镜。
2.普通显微镜的构造和使用方法
普通显微镜的构造可分为光学系统和机械装置两部分（图1-1）：
1 ）光学系统
<1>．物镜：放大倍数越高越长。接近标本，因此也叫接物镜。物镜安装在镜筒的下端。它的作用是将标本作第一次放大，然后再由目镜将第一次放大的像作第二次放大。物镜是决定显微镜性能的最重要部件，即决定分辨力的高低，显微镜越好，分辨力越高。在使用高倍镜时，由于工作距离短，要特别注意不要使物镜直接碰到标本片，以免损坏镜头。
<2>．目镜：安装在镜筒上端，作用是把已经被物镜放大***的物象进一步放大。它相当于一个放大镜，并不增加显微镜的分辨力，一般常用的目镜放大倍数为4—20 倍。
<3>．聚光器：载物台中央，通光孔下方的聚光镜和可变光阑合称聚光器，聚光镜相当于一组凹透镜，可汇集来自内置光源的光（或反光镜反射的光）。可变光阑又叫光圈，位于聚光镜下方，由十几片金属薄片组成，中心部分形成圆孔，推动光圈的把手，可以随意调节园孔的大小，选择适当的光强度。
<4>．照明器：也称内置光源，通常采用高亮度、高效率的卤素灯和非球面聚光镜。
<5>．反光镜：没有照明器的显微镜都有反光镜，即安放在镜柱或镜座上的圆形平凹双面镜，可作各方向转动，对准光源（采自然光或灯光），把光线反射到聚光器。平面镜只具反光作用，凹面兼具反光和聚光作用，通常光线较弱时使用凹面镜，强光时用平面镜。
2 ）机械装置
<1>．镜座：显微镜最下方的底座，它支持显微镜的全部重量，并使显微镜能平稳放置桌面上。
<2>．镜臂：连接镜筒和载物台，并为移动显微镜时手执处。
<3>．镜筒：目镜下方的空园筒。
<4>．转换器：位于镜筒下方，可同时安放3—4 个不同倍率的接物镜，根据需要而转换使用。
<5>．载物台：连接于镜臂下端之方形或园形平台，用来放置玻片。中央有一通光孔，光线由此通过。载物台上有推进器，便于移动玻片进行观察。
<6>．调焦装置：镜臂上端有大小各一对螺旋，用来升降镜筒以调整焦距，大的为粗准焦螺旋，旋转一周可升或降镜筒10 毫米。小的是细准焦螺旋，旋转一周可使镜筒升或降0.1 毫米。另一类显微镜是通过升降载物台来调焦的，故调焦螺旋在镜臂下端。
三 显微镜的使用方法
从显微镜箱中取显微镜时，应以右手握住镜臂，左手托住镜座，置显微镜于桌上时，应小心轻放在相对座位稍偏左侧与桌沿有一定距离的桌面上，然后按以下步骤操作：
<1>.对光：旋粗准焦螺旋，使物镜的镜头离载物台2 厘米左右，移低倍镜至对准通光孔位置上，眼睛向目镜内观察，调节光源和光阑，至视野最明亮最均匀止。
<2>.放置玻片：将所备标本片放到载物台上，调节推进器使待观察材料对准通光孔中心。
<3>.调节和观察：转动粗准焦螺旋，使低倍物镜的镜头距玻片约1 厘米左右，然后眼睛再向目镜中观察，同时缓慢调粗准焦螺旋，稍微上下移动，到物象清晰为止。目镜中备有“指针”，可转动目镜，使指针指对所需观察的特定部位，以利再观察和绘图等。
<4>.需要进行高倍镜观察时，应先移动玻片，使待观察部位处于视野正中，然后转开低倍物镜，让高倍物镜对准通光孔，一边向目镜中观察，一边小心旋动细准焦螺旋，至看清物象止。
<5>.显微镜放大倍数计算：显微镜的放大倍数＝物镜放大倍数×目镜放大倍数，如目镜为10×，物镜为40×，则放大倍数为400×。
四 注意事项
<1>.取镜时，如发现显微镜损坏或没按规定放置时，报告老师，并填写实验室情况登记表。显微镜是较为贵重、精密的仪器，取、放时要小心，不得随意转动螺旋或拆装其他零部件。
<2>.擦拭时，镜头要用擦镜纸擦，动作要轻，然后用吸球吹数次。金属部分可用干净的绸布（或纱布）擦。
<3>.不可让水滴，特别是酸、碱或其它试剂、染色液等流到载物台上，更不要沾到镜头上。若出现上述情况，及时擦干。
<4>.使用物镜应先低倍后高倍，用高倍物镜观察时，如需更换玻片，应先升高镜筒(或下降载物台)，取下玻片，换上新片后，按从低倍到高倍的过程重新进行。使用细准焦螺旋时，一定要注意，不能一直朝一个方向旋动，否则会损坏显微镜。
<5>.观察完毕，有照明器（即内置光源）的显微镜，需切断电源，并认真填写显微镜使用卡（包含使用者姓名、专业、使用日期和显微镜正常与否等内容，若有故障，则要写明具体情况，并报告老师），然后转动粗准焦螺旋，下降载物台，使镜头离开玻片，取下玻片，用清洁纱布把机械部分擦干净，
用擦镜纸把光学部件擦干净，再把物镜转离通光口，上升载物台，使之贴近物镜，（没有照明器的显微镜还需将反光镜放垂直），然后放入镜箱。