实验一_显微镜的构造及使用方法

时间:2024.3.27

实验一  显微镜的构造及使用方法

一、目的要求

1.         了解显微镜的构造、性能及成像原理。

2.         掌握显微镜的正确适用及维护方法。

二、实验器材

1.         显微镜、纱布、绸布

2.         酵母菌示教标本

三、普通光学显微镜简介

微生物的最显著的特点就是个体微小,必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。

显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括:明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜,其它显微镜都是在此基础上发展而来的,基本结构相同,只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。

(一)显微镜的构造

普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。

图1-1 显微镜构造

1.目镜  2.镜筒  3.镜臂  4.标本片移动钮  6.粗细调焦钮  7.聚光镜调节钮

8.底座  9.反光镜  10.虹彩光圈  11.聚光器  12.载物台  13.物镜  14.转换器

1.         机械系统

(1)       镜座Base:在显微镜的底部,呈马蹄形、长方形、三角形等。

(2)       镜臂Arm:连接镜座和镜筒之间的部分,呈圆弧形,作为移动显微镜时的握持部分。

(3)       镜筒Tube:位于镜臂上端的空心圆筒,是光线的通道。镜筒的上端可插入接目镜,下面可与转换器相连接。镜筒的长度一般为160mm。显微镜分为直筒式和斜筒式;有单筒式的,也有双筒式的。

(4)       旋转器Nosepiece:位于镜筒下端,是一个可以旋转的圆盘。有3~4个孔,用于安装不同放大倍数的接物镜。

(5)       载物台Stage:是支持被检标本的平台,呈方形或圆形。中央有孔可透过光线,台上有用来固定标本的夹子和标本移动器。

(6)       调焦旋钮:包括粗调焦钮Coarse adjustment knob和细调焦钮Fine adjustment knob,是调节载物台或镜筒上下移动的装置。

2.    光学系统

(1)       接物镜Objective lens,常称为镜头,简称物镜,是显微镜中最重要的部分,由许多块透镜组成。其作用是将标本上的待检物进行放大,形成一个倒立的实像,一般显微镜有3~4和物镜,根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。干燥系物镜包括低倍物镜(4~10x)和高倍物镜(40~45x),使用时物镜与标本之间的介质是空气;油浸系物镜(90~100x)在使用时,物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质(香柏油)作为介质。

(2)       接目镜Eyepiece lens:通常称为目镜,一般由2~3块透镜组成。其作用将由物镜所形成的实像进一步放大,并形成虚像而印入眼帘。一般显微镜的标准目镜是10x。

(3)       聚光镜Condenser:位于载物台的下方,由两个或几个透镜组成,其作用是将由光源来的光线聚成一个锥形光拄。聚光镜可以通过位于载物台下方的聚光镜调节旋钮进行上下调节,以求得最适光度。聚光器还俯有虹彩光圈(Iris diaphragm),此调节锥形光拄的角度和大小,以控制进入物镜的光的量。

(4)       反光镜:反光镜是一个双面镜,一面是平面,另一面是凹面,起着把外来光线变成平行光线进入聚光镜的作用。使用内光源的显微镜就无需反光镜。

(5)       光源:日光和灯光均可,以日光较好,其光色和光强都比较容易控制,有的显微镜采用装在底座内的内光源。

(二)显微镜的成像原理

显微镜的放大作用是由物镜和目镜共同完成的。标本经物镜放大后,在目镜的焦平面上形成一个倒立的实像,再经目镜的进一步放大形成一个虚像,被人的眼睛所观察到。

图1-2 显微镜成像原理

(三)显微镜的性能

1. 分辨率和数值口径

衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率,显微镜的分辨率(Resolving power)是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力。它主要取决于物镜的分辨能力,物镜的分辨力是所用光的波长和物镜数值口径的函数。分辨力用镜头所能分辨出的两点间的最小距离表示,距离越小,分辨能力越好。可用公式表示:

物镜的数值口径(Numberical aperture),简写为(N.A):表示从聚光镜发出的锥形光柱照射在观察标本上,能被物镜所聚集的量。可用公式表示:

n——标本和物镜之间介质的折射率

θ——由光源投射到透镜上的光线和光轴之间的最大夹角

光线投射到物镜的角度越大,数值口径就越大。如果采用一些高折射率的物质作介质,如使用油镜时采用香柏油作介质,则数值口径增大,从而提高分辩能力。物镜镜筒上标有数值口径,低倍镜为0.25,高倍镜为0.65,油浸镜为1.25。这些数值是在其它条件都适宜的情况下的最高值,实际使用时,往往低于所标的值。

2. 放大倍数、焦距和工作距离

显微镜的放大倍数是武物镜和目镜放大倍数的乘积。放大倍数一样时,由于目镜和物镜搭配不同,其分辨率也不同。一般来说,增加放大倍数应该是尽量用放大倍数高的物镜。物镜的放大倍数越大,焦距越短,物镜和样品之间的距离(工作距离)便越短。

(四)显微镜的使用指南

1. 观察前的准备

显微镜的安置:取放显微镜时应一手握住镜臂、一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳。置显微镜于平整的实验台上,镜座距实验台边缘3~4cm。镜检时姿势要端正。

接通电源,根据所用物镜的放大倍数,调节光亮度调节钮、调节虹彩光圈的大小,使视野内的光线均匀、亮度适宜。

2. 显微观察:

(1)接通电源,采用白炽灯为光源时,应在聚光镜下加一蓝色的滤色片,除去黄光。一般情况下,对于初学者,进行显微观察时应遵从低倍镜到高倍镜再到油浸镜的观察程序,因为低倍镜视野较大,易发现目标及确定检查的位置。

(2)低倍镜观察,将做好的酵母标本片固定在载物台上,用标本夹夹住,移动推进器使观察对象处在物镜的正下放。旋转旋转器,将10x物镜调至光路中央。旋转粗调焦钮将载物台升起,从侧面注视小心调节物镜接近标本片,然后用目镜观察,慢慢降载物台,使标本在视野中初步聚焦,再使用细调节钮调节图像清晰。通过玻片夹推进器慢慢移动玻片,认真观察标本个部位,找到合适的目的物,仔细观察并记录所观察的结果。调焦时只应降载物台,以免一时的误操作而损坏镜头。注意无论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察,以减少眼睛的疲劳,也便于边观察边绘图记录。

(3)高倍镜观察,在低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心,轻轻转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置。对聚光镜光圈及视野亮度进行适当调节后微调细调节钮使物像清晰,仔细观察并记录。如果,高倍镜和低倍镜不同焦,则按照低倍镜的调焦方法从新调节焦距。

(4)油浸镜观察,在高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区域,用粗调焦钮先降载物台,然后将油镜转到工作位置。在待观察的样品区域加一滴香柏油,从侧面注视,用粗调节钮将载物台小心地上升,使油浸镜浸在香柏油并几乎与标本片相接。将聚光镜升至最高位置并开足光圈。慢慢地降载物台至视野中出现清晰图像为止,仔细观察并作记录。

3. 显微镜的维护:

(1) 观察结束后,先降载物台,取下载玻片。

(2) 用擦镜纸分别擦拭物镜和目镜。

(3) 用擦镜纸拭去镜头上的油,然后用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹,最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。

(4) 清洁显微镜的金属部件。

(5) 将各部分还原,将物镜转成“八”字形,同时把聚光镜将下,以免物镜和聚光镜发生碰撞危险。

(6) 把显微镜放回原处。

四、实验报告

1.             根据讲义报告,对照实物,熟悉显微镜的构造。

2.             按显微镜的使用方法,分别用低倍镜和高倍镜对酵母细胞示教标本进行观察。

3.             哪个物镜的工作距离最短?

4.             有哪些部件可以调节视野中光的强弱?

5.             有哪些方法可以提高显微镜的分辨率?

6.             为什么在用高倍镜和油镜观察标本之前要先用低倍镜进行观察。


第二篇:实验一生物显微镜的构造和使用方法


实验一 生物显微镜的构造和使用方法

一、目的要求

(一)熟悉生物显微镜的构造及其功用,正确掌握显微镜的使用方法并牢记使用时的注意事项。

(二)学习低、高倍镜的镜检技术。

二、实验内容

   (一)观察显微镜的各部分结构,理解其基本性能。

   (二)学习使用显微镜的方法。

   (三)初步认识几种类型的显微镜。

三、材料和用具

   电子生物显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、牙签、 洗耳球,甲基蓝染色液、滤纸。

四、操作与观察

(一)显微镜的基本结构:

    显微镜是实验室中最常用的仪器。我们要了解它的基本结构,并学会使用显微镜的方法。

显微镜的中部有一弯曲的柄,称镜臂;基部有一马蹄形部分,是镜座。自柜中取用时,用右手握紧镜臂,左手托住镜座,保持镜体直立,轻轻放置于桌上,观察各部构造。

镜座上的短柱叫镜柱。镜臂基部有一个方形或圆形的平台,是载物台(或称镜台)。台的中央有一圆孔,可通过光线。两侧有压片夹,用以固定玻片标本。现代的显微镜具镜台X-Y驱动器,用以固定和移动玻片标本。在圆孔的下面,有由一片或数片透镜所组成的聚光器,有集射光线于物体的作用。在聚光器下方有反光镜,可将光线反射至聚光器。此镜一面平,一面凹。凹面具有较强的反光性,多用于光线较暗的情况下;光线较强时用平面镜即可。电子显微镜的光源来源于内光源,位于镜座靠后方。镜座右侧臂有调节螺旋,可以前后调节改变光线的强弱。光线较强适于观察色深的物体;光线较弱适于观察透明(或无色)的物体。

在载物台的圆孔上方,有一附于镜柄上端的圆筒称为镜筒,其上下两端附有镜头。现代的显微镜一般有两个镜筒。两镜筒之间的距离,可按观察者双目的的距离调节。

镜筒上端为接目镜(或称目镜),可从镜筒内抽出。接目镜有低倍和高倍之分。

在镜筒下端有可放置的圆盘叫旋转器,下面附有2~4个接物镜(或称物镜)以螺旋旋入旋转器内。接物镜也有低倍和高倍之分。转动旋转器可换用接物镜。

在镜臂上有两组螺旋。大的叫粗调焦器,小的叫细调焦器。现代的显微镜粗、细调焦器常组合在一起,外周粗的螺旋为粗调焦器,小的叫细调焦器。用调焦器调焦点。粗调焦器升降镜筒较快,用于低倍镜调焦;细调焦器升降镜筒较慢,用于高倍镜调焦。

接物镜有低倍和高倍之分。较短的是低倍,一般放大10倍(10×);较长的是高倍,一般放大40倍(40×)、油物镜放大100倍(100×)。接目镜也有高低倍之分,较长的是低倍,一般放大5倍(5×)或6倍(6×),较短的是高倍,一般放大10倍(10×)、12倍(12×)或15倍(15×)。

显微镜的总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。例如,作用5×接目镜与10×接物镜,则总放大倍数是50倍。使用10×接目镜与40×接物镜,则总放大倍数是400倍。

(二)显微镜的使用方法

    1.光线的调节:使用显微镜时,应使镜臂向着自己(现代显微镜使镜臂反向对着自己),摆好显微镜,平放在实验台上。转动粗调焦器,把镜筒向上提起。转动旋转器,使低倍接物镜对准载物台的圆孔。二者相距约2cm左右,打开光源按钮,向前向后移动按钮,两眼对着双筒接目镜观察,调节光线的强弱至适宜强度。

2.低倍镜的使用:将需观察的标本装片放在载物台上,使标本正对中央圆孔。用玻片夹固定。俯首侧视接物镜,并顺时针方向旋动粗调焦螺旋,使载物台上升到装片与接物镜约0.5厘米处。危重双眼全睁自目镜观察,并向逆时针方向慢慢地转动粗调焦螺旋,使载物台下降至能见到物像为止。为使见到的物像更清晰,再来回转动细调焦螺旋。

3.高倍镜的使用:需用高倍镜时,一定是在上述低倍镜下能看清物像的前提下进行。首先将要详细看的部分移到视野正中央,转动转换器,换高倍物镜。转动细调焦器,上下调节,使物像达到最清晰为止。

电子显微镜

(三)镜检练习

    1、字母或汉字观察:取干净载玻片,在其正中用钢笔写上一个英文字母或汉字,字体越小越好,于低倍镜下观察,上下左右轻轻移动装片,观察物像与实际物像及物像移动方向如何?思考一下原因。

    2、人口腔粘膜上皮细胞的观察:取一干净的载玻片,放一滴清水,用消毒的牙签从口腔颊部轻轻地刮取一点粘膜物,置于载玻片的水中混匀,再将盖玻片一边与水外缘相接,然后将盖玻片以45°倾斜角匀速放下,制成涂片标本。依次进行低、高倍镜镜检。

(四)便用显微镜的注意事项

    1、加强责任心,养成爱护仪器的习惯,严格操作规程。

    2、取放显微镜时必须一手握镜臂,另—手托住镜座,禁止单手提着行走。

3、禁止拆散显微镜上任何部件。

    4、镜检时力求坐姿端正、自然、舒适,双目同时睁开观察,这样即利于绘图,又可减少

眼睛疲劳。

5、每次镜检,不论物体大小,其顺序必须是先低倍后高倍,最后用油浸镜。

    6、低倍镜检时必须一边俯侧观察载物台上升一边转动粗调螺旋,然后才能在目镜中观察降低载物台找物像。用高倍镜和油浸镜时,绝不能转动粗调螺旋。

7、观察带有水或其他药液的标本,一定要加上盖玻片,并用滤纸吸去盖玻片周围溢出的水或药液,以免接触腐蚀显微镜。

    8、显微镜各部分必须保持清洁。光学系统部分切勿用手、布、粗纸等擦拭,必须用擦镜纸轻轻揩擦,若镜头等光学部分积有灰尘时需先用洗耳球吸去灰尘后再擦拭,必要时可略蘸些二甲苯进行揩擦。金属等机械部分有灰尘时,可用纱布擦拭。

9、显微镜用毕后,必须把接物镜移开。使两个高、低倍接物镜以“八”字形朝前方,然后取出装片。拔掉电源,放回原位,罩好防护罩。最后要按仪器使用情况登记本如实填写该仪器使用情况。

五、作

1、绘制人口腔粘膜上皮细胞图。

2、使用显微镜应注意哪些事项?

3、由低倍镜转高倍镜应特别注意什么?

更多相关推荐:
显微镜的使用方法实验报告

显微镜的使用实验报告班级姓名小组其他成员实验地点实验时间年月日一实验名称显微镜的使用二实验目的练习使用显微镜三实验器材显微镜J2702装片或切片擦镜纸纱布四实验步骤1检查实验器材是否完备2取镜和安放取镜右手握住...

显微镜的使用实验报告

湘西州中学生分组实验报告学校名称湘西自治州第二民族中学

实验报告显微镜

系别___________班号____________姓名______________同组姓名__________实验日期_________________________教师评定______________实…

实验1 显微镜的使用实验报告

实验1显微镜的使用实验报告班级10生科二班星期三上午第二大节课第二小组姓名杨袁予童组员杨方朱树生实验时间2113年3月6日一实验名称显微镜的使用方法二实验目的1掌握显微镜的构造熟练使用显微镜进行试验观察2能够分...

练习使用显微镜实验报告单1

生物实验报告单年级班级姓名实验组别实验和作者指导老师实验日期年月日第节

金相显微镜的使用与金相样品的制备实验报告

金相显微摄像一实验目的一了解普通金相显微镜的构造与使用方法二了解金相试样的制备方法三学习使用金相显微镜观察金相组织二实验设备及材料实验设备金相显微镜砂轮机抛光机吹风机玻璃板培养皿镊子材料金相试样砂纸一套8001...

显微镜的使用 实验报告 Microsoft Word 文档

显微镜的使用实验报告组别班级姓名时间一实验名称显微镜的使用二实验目的练习使用显微镜三实验器材显微镜J2702装片或切片擦镜纸纱布四实验步骤1检查实验器材是否完备2取镜和安放取镜右手握住镜臂左手托住镜座安放把显微...

实验1 显微镜的使用和简单染色

实验一显微镜的使用和简单染色一实验目的1了解并掌握细菌简单染色的机理及技术2学会用油镜观察细菌细胞的形态二实验原理细菌小且透明当把细菌悬浮于水滴内由于菌体和背景没有显著的明暗差用光学显微镜难以看清它们的形态结构...

实验一 常见显微镜的使用、细胞形态结构观察及大小测定

实验一常见显微镜的使用细胞形态结构观察及大小测定实验报告一实验目的1掌握几种常见显微镜的使用方法2观察几种细胞的形态结构3掌握用测微尺测定细胞大小的原理和方法二实验原理1细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同...

练习使用显微镜的实验

第2章第一节探索生命的器具合肥工大子弟学校七上生物实验报告练习使用显微镜的实验班级小组姓名时间第2章第一节探索生命的器具合肥工大子弟学校七上生物实验报告请将显微镜各部分的结构名称填写在方框内班级小组姓名时间

实验一 显微镜的使用及动物基本组织的观察

实验一显微镜的使用及动物基本组织的观察一实验目的1了解一般光学显微镜的基本构造和工作原理2掌握光学显微镜的使用方法3生物量级及系统过程4细胞学术与动物基本组织二实验原理当选用的物镜数值孔径不够大即分辨率不够高时...

实验四、普通显微镜的使用及细菌的简单染色法

实验四普通显微镜的使用及细菌的简单染色法一实验目的1学习并掌握油镜的原理和实使用方法2复习普通台式显微镜的结构各部分的功能和使用方法二实验原理一普通显微镜普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像故又常...

显微镜的使用实验报告(48篇)