实验三 有机磷农药中毒及其解救
【实验目的】
1．学习家兔灌胃方法。
2．观察有机磷农药中毒症状及用阿托品和碘解磷定解救的效果。
3．学习难逆性抗胆碱酯酶药(有机磷酸酯类)及胆碱酯酶复活药(小讲课)。 【实验原理】
有机磷农药(有机磷酸酯类)为持久性抗胆碱酯酶药，主要用作农业杀虫剂和化学战争毒剂。进入体内后能抑制胆碱酯酶活性，造成Ach在体内大量堆积而产生一系列中毒症状(包括M样、N样及CNS症状)。阿托品为M受体阻断药，能迅速解除M样症状及部分中枢症状。碘解磷定为胆碱酯酶复活药，可恢复胆碱酯酶水解Ach的活性，并可直接与游离的有机磷农药结合成无毒的物质，从尿排出，从而解除有机磷酸酯类中毒症状。 【材料与方法】
一、实验对象：家兔，2.0－2.5kg，雌雄不拘。
二、器材药品：家兔开口器一个、胃管一个、1ml、5ml、30ml注射器各一支、5号针头3个、250ml烧杯1个、婴儿秤1台、瞳孔测量尺一把、滤纸、5％敌百虫、2.5％碘解磷定(PAM)、0.2％阿托品(Atropine)。 三、方法与步骤：
(一)动物准备：取家兔(禁食24小时)，称重。
(二)观察指标：呼吸 瞳孔 唾液 肌震颤 肌张力 大、小便。 1． 按上述观察指标，观察和记录家兔的正常活动情况； 2． 5％敌百虫500mg/kg给家兔灌胃；
3． 观察并记录上述指标的变化，及时发现中毒症状；
4． 待一系列症状出现后，特别是瞳孔明显缩小时，立即耳缘静脉注射0.2％Atropine
2mg/kg,观察中毒症状缓解情况，5min后再耳缘静脉注射2.5％PAM 50mg/kg,观察中毒症状消除情况。
正常 敌百虫 Atropine PAM
呼吸
瞳孔
唾液
肌震颤
肌张力
大小便
【注意事项】
1．敌百虫可以从皮肤吸收，手接触后应立即用自来水冲洗，且勿用肥皂，因其在碱性环境中可转变为毒性更大的敌敌畏。
2．灌胃时勿将胃管插入气管(若插在气管中，其外露部分置于水中有气泡，或动物有呛咳、紫绀)，应确证胃管在胃中时再给予敌百虫。
3．灌胃完毕后，应注入空气使导管内药物全部注入胃中，然后先抽出胃管，再取下开口器，以防家兔咬断胃管。
4．实验完毕时，再耳缘静脉注射一次PAM 2.5mg/kg。
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1．根据所学理论知识，分析实验中观察到有机磷中毒的症状。
2．阿托品和PAM为什么能解救有机磷农药中毒？
3．能否以血压的改变来判断中毒的程度?为什么？
【作业题】
1．有机磷中毒症状中哪些是M样症状?
2．有机磷中毒症状中哪些是N样症状?
3．阿托品能缓解什么症状?
4．解磷定能缓解什么症状?
观察，写出各药的鉴别报告。
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第二篇：有机磷中毒实验报告
有机磷酸脂类中毒及解救
一、实验目的
观察有机磷酸脂类农药美曲磷脂（敌百虫）中毒后出现的症状和体征；观察阿托品和碘解磷定对美曲磷脂中毒的解救效果，并比较两药解毒作用的特点和作用原理；学习血液中胆碱酯酶活性的检查方法。
二、实验原理
有机磷酸脂类农药进入机体后，与胆碱酯酶呈难逆性结合，一直胆碱酯酶活性，使其丧失水解乙酰胆碱的能力，造成乙酰胆碱在体内大量堆积，产生一系列急性中毒症状。 阿托品为选择性的M胆碱受体阻断剂，很大剂量时还可阻断N1受体，可与乙酰胆碱竞争占领M，N1受体，阻断乙酰胆碱对这些受体的激动作用，因而有效的解除有机磷酸脂类中毒的M样症状和N1样症状，是解救有机磷酸脂类中毒的对症治疗药物。
碘解磷定时有机磷酸脂类中毒的特效解救药，因其可使胆碱酯酶复活，回复胆碱酯酶水解乙酰胆碱的能力，因而能彻底解除有机磷酸脂类农药急性中毒的症状和体征，但其对循环和呼吸的解救作用起效较慢。是解救有机磷酸脂类中毒的对因治疗药物。
利用血液中胆碱酯酶能够分解乙酰胆碱，产生醋酸使PH改变的原理，以溴麝香草酚蓝作指示剂，可获得不同颜色，将此颜色与已知PH标准管相比，即可测知血样的PH大小。PH愈小，胆碱酯酶活性愈大。
三.实验对象
健康家兔，体重2-3kg左右，雌雄不拘。
四、实验药品和器材
5%敌百虫，0.1%硫酸阿托品，2.5%碘解磷定；注射器（1ml、2ml、5ml、20ml各一支），7号、6号针头，瞳孔测量尺，烧杯，滤纸，试管，移液枪，吸头，试管架，手术刀片，干棉球，婴儿磅秤，听诊器，秒表，血红蛋白吸管，兔固定盒，微机酸度计，恒温水浴箱。
五、实验方法与步骤
取家兔两只，称重，编号，观察和测量家兔的正常指标，呼吸、心率、大小便、唾液、瞳孔、肌肉紧张及有无肌震颤情况，并记录在表中。
六、实验项目：
(1) 从家兔耳缘静脉取血作正常胆碱酯酶活性检查。取血法：先轻弹兔耳缘静脉，使其充分扩张，用手术刀片割破约2mm伤口，让血液自流，以血红蛋白吸管取血至20cm（相当0.02ml血液），立即将此血移入事先准备好盛有0.04%溴麝香草酚兰1ml的试管中；共取血2次，合计血样0.04ml，充分振摇，混合均匀；再加1%乙酰胆碱0.5ml，摇匀后，置于37°水浴中保温45-60min，观察其颜色反应，用微机酸度计测定pH并记录数值。
(2) 甲兔从耳缘静脉注射5%敌百虫50mg/kg，每隔5min观察上述指标有何改变，待中毒症状明显时，记录作用时间，再按上法取血，测定胆碱酯酶活性，记录pH。同时从耳缘静脉注射0.1%阿托品1mg/kg,再每隔5min观察上述指标有何改变？当毒蕈碱样作用消失时（约10min），记录作用时间，再按上法取血，测定胆碱酯酶活性，记录pH（本兔实验完毕后，以PAM50mg/kg静脉注射，以防兔子死亡）。
（3）乙兔按甲兔同样方法产生敌百虫中毒后，以2.5%PAM50mg/kg,代替阿托品，每隔15Min注射一次，共三次，当PAM对敌百虫中毒的解散作用未发生前，即第三次注射PAM后，即刻和15min时分别按上法取血，测定胆碱酶活性，记录作用时间和PH
4从实验所得PH用下列公式计算药物对胆碱酯酶活力的估计影响
7.6-用药后的PH/7.6-用药前的PH=用药后胆碱酯酶活力
七、实验结果预测
兔号 药物和用量 瞳孔唾液分泌 大小 肌震呼吸 PH
大小(mm)
甲
用药前 5%敌百便 颤
8 — ++
— — — ++ ++ +
7.4 ++
虫 3.5 ml 0.1%阿托品 3.5 ml
乙
用药前 5%敌百虫 3.6 ml 2.5%碘解磷定 3.6 ml
5
8 — 8 — 5
++
6
+ — ++ — — ++ ++ + — — ++
— 7.4 +
++
— +