神经体液对动脉血压和呼吸运动的调节

[目的要求]

1．学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。

2．观察神经、体液因素对心血管活动的影响。

[基本原理]

在正常生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射既可使升高的血压下降，又可使降低的血压升高，故有血压缓冲反射之称谓。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支，易于分离与观察其作用。

本实验是应用液导系统直接测定动脉血压。即由动脉插管与压力传感器连通，其内充满抗凝液体，构成液导系统，将动脉插管插入动脉内，动脉内的压力及其变化，可通过封闭的液导系统传递到压力传感器，并由计算机采集系统记录下来。

[动物与器材]

家兔、兔手术台、常用手术器械、止血钳(4～6把)、眼科剪、支架、双凹夹、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、计算机采集系统、压力传感器、保护电极、照明灯、纱布、棉球、丝线、注射器 (1 ml、5 ml、20 m1)、生理盐水、4％柠檬酸钠、20％～25％氨基甲酸乙酯、肝素(200 U／ml)、肾上腺素(1：5 000)、乙酰胆碱(1：10 000)。

[方法与步骤]

1．实验仪器的准备

打开计算机采集系统，接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条，使显示器显示压力读数。

2．连通液导系统并制压

将压力传感器的下方支管，通过输液管连接三通管，再连接动脉插管。上侧管供制压时排除管内空气使用。先用装有20ml 4％柠檬酸钠的注射器，通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注，使之充满液体(不要使动脉插管高过压力传感器的上方支管)后，再用止血钳夹住动脉插管端的输液管。然后继续向三通管内推注，直至充满压力传感器的上方支管，并用塞子塞住(注意：液导系统内不可有气泡)。继续向三通管内推注，同时观察显示器上压力变化。当加压到120 mmHg时即可关闭三通管。观察压力是否发生变化，如果压力下降，则需要检查液导系统的漏液原因，并重新制压。调节血压显示器的灵敏度，使30～130 mmHg的变化都能在显示器上明显地反映出来。将动脉插管端的导管内充满肝素溶液。

3．动物的准备

1)麻醉动物

取家兔一只，称重并剪去耳缘静脉上的被毛。用20ml注射器由耳缘静脉缓慢推注20％(或25％)氨基甲酸乙酯(5ml／kg体重)进行麻醉。注射时注意：先从耳缘静脉尽可能远心端注射(第一次注射不成功时，可稍向近心一些注射)，注射时速度要慢，并随时观察动物情况。当动物四肢松软、呼吸变深变慢、角膜反射迟钝时，表明动物已被麻醉，即可停止注射。

2)固定与剪毛

将动物背位固定于手术台上，用剪毛剪将颈部手术野的被毛剪去，即可进行手术。

3)切开皮肤

术者一手的拇指和示指按住家兔颈部两侧，另一手持手术刀，在紧靠喉头下缘，沿颈部正中线作一长约5～7cm的皮肤切口。然后用止血钳或手术剪分离皮下结缔组织后，夹住少许皮肤并向两侧分开创口。

4)分层分离肌肉及气管插管

术者与助手分别持止血钳轻轻提起少许气管正上方的肌肉(距离要尽可能近)，然后用手术剪在两止血钳夹住的肌肉之间，纵向(沿肌肉纤维走向)将肌肉层剪开一个小口(亦可用止血钳创开口)。用剪刀或止血钳将创口纵向扩大，再用止血钳夹住少许肌肉，向两侧分开肌层。继续用两把止血钳夹住下层气管上方的少许肌肉，轻轻提起，同法剪开并扩大肌肉创口。如此层层分离肌肉，直至看见肌肉层下方的气管(如果创口不够大，亦可用两手示指深入创口后再向前后方撕裂肌膜，使创口扩大)。用止血钳向气管两侧拉开最后一层肌肉，暴露出气管，再进行气管插管：将气管与周围组织钝性分离，在气管上做一“⊥”形切口，插入“Ｙ”形气管套管，并用线将气管套管结扎固定。手术时，注意切口不可偏离气管上方，不可横向剪断肌肉，以免造成血管断裂而出血。切口也不要过于扩大，以免造成气胸。如果发现肌肉或血管有少量出血，可用浸过温热生理盐水的纱布(不可过湿)轻轻按压止血；如果出血不止，应立即用止血钳夹住出血部位，然后用棉线结扎止血。

5)分离主动脉神经

家兔颈部的神经、颈总动脉被结缔组织膜包在一起，形成血管神经束，位于气管两侧，其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。术者用拇指和示指轻轻捏住分离的肌肉和皮肤，使示指向上顶而拇指向外翻，即可将血管神经束翻于示指之上。用弯头玻璃分针轻轻划开局部结缔组织束膜，仔细辨认3种神经与颈总动脉(图4—19)：颈总动脉呈红色，有波动，壁有较强的弹性；迷走神经最粗，有较好的韧性，色洁白，一般位于外侧；交感神经较细，略呈灰色，一般位于内侧；主动脉神经最细，一般位于两神经之间。由于主动脉神经纤细，离开神经、动脉束的包膜后则难以分辨，所以应在原自然位置首先找到，并用玻璃分针沿纵向轻轻划动，分离出2 cm左右(此神经的韧性很差，易于拉断，分离时需十分小心)。用玻璃分针轻轻挑起分离后的神经，再用弯头眼科镊由神经下方穿过，将一浸过生理盐水的彩色丝线放于镊子内，轻轻收回夹住丝线的眼科镊，穿好线并打一活结备用。如果不能辨认出3条神经，则可先在颈总动脉下方穿过一条粗棉线(方法同上，但只分离很小一段动脉，需保留其前后的结缔组织束膜)。当轻轻提起动脉时即可看清3条神经，同法分离主动脉神经。分离主动脉神经、迷走神经并穿线备用。再将止血钳从颈总动脉下方穿过，轻轻张开止血钳，分离出2～3cm长的颈总动脉。分离出的颈总动脉外壁应该十分光洁，外面并无结缔组织及脂肪等物。在动脉上穿两条备用棉线，分别打上活结。将两线分别拉至分离出的动脉两端备用。同样方法分离另一侧血管与神经(一侧动脉用于插管测压，另侧动脉实验用)。由于家兔的品种不同，个体之间也有差异，常发现3条神经的解剖位置有些变异。主动脉神经的最后确认，需以对血压的影响为准。

4．动脉插管

首先用5m1注射器从耳缘静脉注入肝素(200 U／kg体重)以防凝血。然后在一侧动脉行动脉插管术以记录血压。其方法如下：

将动脉头端的备用线尽可能靠头端结扎(务必扎紧，以防渗血)，然后在另一备用线的向心侧 (尽可能近心端)，用动脉夹夹闭。轻轻提起动脉头端的结扎线，用锐利的眼科剪在靠近扎线的稍后方，沿向心方向斜向剪开动脉上壁(注意：不可只剪开血管外膜，也切勿剪断整个动脉，剪口大小约为管径的一半)。一手持弯头眼科镊，将其一个弯头从剪口处插进动脉少许，轻轻挑起剪开的动脉上壁，另一手将准备好的动脉插管由开口处插入动脉管内。如果插入较浅，可用一手轻轻捏住进入插管的动脉管壁，另一手拿住动脉插管，顺势轻轻推进至6—8mm左右(如果手感滞涩，说明插管并未进入动脉，必须退出插管，重新剪口再插)，用

备用线将动脉连同进入的插管扎紧(插管不可因扎线松动而滑出，亦不可漏液)，并将余线系在插管的固定侧支上，以免滑脱。注意：插管应与动脉血管的方向一致，以防插管尖端扎破动脉管壁。轻轻取下向心端动脉夹，可见动脉血与插管内液体混合。再取下通向压力传感器的止血钳，此时显示器上出现血压的波动曲线。

5．实验观察

(1)观察正常血压曲线 调节扫描速度与增益，可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化，心搏为一级波，呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢，观察正常血压曲线。

(2)刺激迷走神经 记录对照血压、呼吸描记曲线后，刺激迷走神经，观察血压、呼吸有何变化。

(3)刺激另一侧迷走神经 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，刺激另一侧迷走神经，观察血压、呼吸有何变化。

（4）刺激一侧交感神经 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，刺激一侧交感神经，观察血压、呼吸有何变化。

（5）注射肾上腺素 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，耳缘静脉注射0.2ml肾上腺素，观察血压、呼吸有何变化。

（6）夹闭颈动脉 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，用动脉夹夹闭未插管一侧颈动脉，观察血压、呼吸有何变化。

（7）剪断一侧主动脉神经 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，剪断未插管侧的主动脉神经，观察血压、呼吸有何变化。

（8）剪断一侧交感神经 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，剪断未插管侧的交感神经，观察血压、呼吸有何变化。

（9）剪断一侧迷走神经 待血压、呼吸渐渐趋于稳定后，剪断未插管侧的迷走神经，观察血压、呼吸有何变化。

第二篇：家兔动脉血压神经体液调节

家兔动脉血压神经体液调节

201 级生物科学二班 学号：

1.实验目的

1.1学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。

1.2 观察神经、体液因素对心血管活动的影响。

2.实验原理

在正常生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射既可使升高的血压下降，又可使降低的血压升高，故有血压缓冲反射之称。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支，易于分离与观察其作用。

本实验是应用液导系统直接测定动脉血压。即由动脉插管与压力传感器连通，其内充满抗凝液体，构成液导系统，将动脉插管插入动脉内，动脉内的压力及其变化，可通过封闭的液导系统传递到压力传感器，并由计算机采集系统记录下来。

3.实验动物和器材

家兔、兔手术台、常用手术器械、止血钳(4～6把)、眼科剪、支架、双凹夹、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、计算机采集系统、压力传感器、保护电极、照明灯、纱布、棉球、丝线、注射器(1 m1、5 ml、20m1)、生理盐水、4％柠檬酸钠、20％-25％氨基甲酸乙酯、肝素(200 U／m1)、肾上腺素(1：5 000)。

4.实验步骤

4.1 家兔麻醉固定：称重，耳缘静脉注射麻醉剂。待兔被麻醉后，将兔背位固定于手术台上，剪颈部皮毛。

4.2 气管插管：钝性分离颈部肌肉等组织，暴露气管，在气管背面穿线，再用手术刀手术剪在气管上方作T形切口；用制作好的棉签将气管中的血块弄出，沿向心方向插好气管插管并用线扎紧，防止松脱。

4.3分离右侧主动脉神经:用食指中指和拇指将右侧颈部肌肉等组织翻起，看到有弹性的颈总动脉，在其旁边可看到白色的粗的迷走神经，然后在旁边用后玻璃分针（完好无破损）找出最细的减压神经，穿2条线备用。

4.4 分离右侧迷走神经，穿2条线备用。

4.5 分离右侧的右颈总动脉，穿1条线备用。

4.6 分离左侧颈总动脉（3厘米长），穿2线备用，用于插管。

4.7 注射肝素（200U/kg体重）。

4.8 动脉插管法：

动脉夹夹住左侧颈总动脉靠心端

结扎左侧颈总动脉靠头端，检查分支

在结扎线下方2mm剪向心1/2切口

用眼科镊插进动脉切口，确定在动脉内，然后挑起动脉上壁，将动脉插管由眼 科镊下方开口处插入动脉内，用备用线扎死动脉和套管并挂住套管上，用另一动脉夹固定结扎部位。

4.9 实验仪器的准备

打开计算机采集系统，接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条，使显示器显示压力读数。

4.10 连通液导系统并制压

将压力传感器的下方支管，通过输液管连接三通管，再连接动脉插管。上侧管供制压时排除管内空气使用。先用装有20ml 4%柠檬酸钠的注射器，通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注，使之充满液体（不要使动脉插管高过压力传感器的上方支管）后，再用止血钳夹住动脉插管端的输液管。然后继续向三通管内推注，直至充满压力传感器的上方支管，并用塞子塞住（注意：液导系统内不可有气泡）。继续向三通管内推注，同时观察显示器上压力变化。当加压到120mmHg时既可关闭三通管。观察压力是否变化，如果压力下降，则需要检查液导系统的漏液原因，并重新制压。调节血压显示器的灵敏度，使30~130mmHg的变化都能在显示器上明显的反映出来。将动脉插管端的导管内充满肝素溶液。

4.11实验观察

(1)观察正常血压曲线 调节扫描速度与增益，可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化，心搏为一级波，呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢，观察正常血压曲线。

(2)轻轻提起对侧完好颈总动脉上的备用线，用动脉夹夹闭30s(于夹闭前记录动脉通畅时的血压曲线)，观察并记录血压变化。出现变化后即取下动脉夹，记录血压的恢复过程。

(3)记录对照血压曲线后，用手指按压颈动脉窦(下颌下方内侧)，观察并记录血压变化。当血压明显下降时，则停止按压，待血压恢复(如果血压反而升高，说明按压的是血管，需重新寻找按压位置)。

(4)刺激主动脉神经 使刺激输出端连接保护电极，轻轻提起主动脉神经上的备用线，小心地将神经置于保护电极之上。记录对照血压曲线后，再用中等强度的连续电脉冲信号，通过保护电极，刺激神经10-20s。血压出现明显下降后即可停止刺激，并待血压恢复。如果血压并不下降，可调整刺激强度或刺激频率再行刺激。任何刺激都无效时，则表示此神经并非主动脉神经。需要重新辨认神经后再行实验。

(5)分别刺激主动脉神经中枢端和外周端 双结扎主动脉神经后(务必扎紧)，从两扎线结之间剪断神经。记录对照血压后，同法分别刺激神经的中枢端和外周端，观察并记录血压变化。

(6)刺激迷走神经 记录对照血压后，用同样的方法刺激迷走神经，观察血压下降曲线与(4)有何不同(如果血压下降很快、很低，应立即停止刺激)。

(7)结扎并剪断迷走神经 同时结扎双侧迷走神经后剪断，观察血压有何变化。

(8)刺激迷走神经外周端 分别刺激两侧迷走神经外周端，观察并记录血压变化有何不同。

(9)肾上腺素对血压的影响 记录对照血压曲线后，用1 m1注射器，从耳缘静脉注入0．1～0．3 m1肾上腺素溶液，观察并记录血压变化及恢复曲线。

5.实验结果及分析

图1 正常血压曲线

图2 夹闭对侧颈总动脉

取下动脉夹

图3 按压颈动脉窦

图4 刺激主动脉神经

图5 刺激主动脉神经中枢端

图6 刺激主动脉神经外周端

图7 刺激迷走神经

图8 刺激迷走神经中枢端

图9 刺激迷走神经外周端

图10 肾上腺素对血压的影响

（注：因本组做实验时仪器无法输出刺激，故刺激迷走神经和主动脉神经的实验结果借鉴第三组的实验结果）

6.分析与讨论

6.1 夹闭颈总动脉使颈动脉窦血压下降，颈动脉窦压力感受器受到刺激减弱，导致血压升高，如图2所示。相反的，按压颈动脉窦使颈动脉窦压力感受器受到刺激增强，导致血压降低，如图3所示。

6.2 主动脉神经又称减压神经，兔减压神经是单纯的传入神经，其作用是将冲动传入延髓的心血管中枢，引起血压降低。因此，刺激完整的主动脉神经或其中枢端，导致血压下降，如图4、5所示。而刺激其外周端不会引起血压变化。如图6所示。

6.3 刺激迷走神经使其中的副交感神经纤维兴奋，产生负性变时、变力、变传导作用，出现心率减慢，心输出量下降，血压下降，如图7所示。而迷走神经与主动脉神经不同，并不是单纯的传入神经，因此刺激其中枢端和外周端都能引起血压降低，如图8、9所示。

6.4 肾上腺素能使心肌收缩力加强、兴奋性增高，传导加速，通过增加心输出量，

使血压升高，如图10所示。

7.参考文献

崔庚寅 解景田 主编。生理学实验释疑解难。第一版。北京：科学出版社，20xx年。