20xx微生物与寄生虫检验知识辅导:药敏试验报告中S、I、R含义

时间:2024.3.31

S(susceptible),是指细菌对抗菌药敏感,使用常规剂量时的平均血浓度超过MIC 5倍以上,用常规剂量通常有效;I(intermediate)是指细菌对抗菌药中度敏感,常规剂量时平均血浓度等于或略高于MIC,需用高剂量或对体内药物浓缩部位的感染可能有效;R(resistance)是指细菌对某种抗菌药耐药,药物对细菌的MIC 高于应用常规剂量时的血浓度,应用常规剂量治疗通常无效。


第二篇:微生物检验重点知识


微生物知识要点:

一、 葡萄球菌:

1 致病因素:血浆凝固酶;溶血素;杀白细胞素;肠毒素;表皮剥脱毒素;TSST-1;

耐热核酸酶; 葡激酶;透明质酸酶;脂酶。

2 临床意义:疖痈等;内脏感染肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎;

全身感染败血症、脓毒血症; (毒素相关)食物中毒;

烫伤样皮肤综合症;毒性休克综合症;假膜性肠炎。

3 鉴定: 细菌和菌落形态; 生化实验:触+微 阳性;链+肠 阴性

葡:杆菌肽R,呋喃唑酮S

金黄色葡萄球菌特征:普通平板-脂溶性黄色色素;血琼脂-β

溶血;

血浆凝固酶+ ; 耐热核酸酶+

甘露醇发酵+

2).如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。

答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。

二、 链球菌:

1致病因素:M蛋白;脂磷壁酸;透明质酸酶;链激酶;链道酶;链球菌溶

血素;致热外毒素。

2 临床意义:A群: 化脓性炎症;猩红热;风湿热;急性肾小球肾炎;II III 肺炎链球菌:大叶性肺炎;中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎、

心内膜炎。

3 鉴定:形态。。 培养+血清等,血琼脂-灰白色,半透明或不透明表面光滑

小菌落;肺炎链球菌48h呈脐窝状。

几中链球菌特征:

A群:血平板β溶血; 杆菌肽-敏感

B群:血平板β溶血; 杆菌肽-耐药;CAMP+;胆汗七叶苷(—);马尿酸水解

试验(+)

草绿色链球菌:血平板α溶血;optochin耐药;胆汗七叶苷(—);

肺炎链球菌:血平板α溶血;optochin敏感,菊糠分解(+),胆汗溶菌(+),

荚膜肿胀实验(+)

三、 大肠埃希菌

1 致病因素: 侵袭力(K抗原和菌毛);内毒素;肠毒素(LT,ST) 2 临床意义:肠道外感染(泌尿系统感染为主,腹膜炎,胆道感染,肺炎

等;

肠道感染:EHEC、ETEC、EPEC、EIEC、EaggEC

3 鉴定:普通平板(湿润、光滑、灰白中等大小菌落)有便毛,有动力,

葡萄糖发酵(+), 硝酸盐还原(+), 氧化酶(—),触酶(+)

中国兰平板(蓝色),伊红美蓝(紫黑色),麦康凯和SS(红色)

四、 志贺菌属

1 致病因素:侵袭力(菌毛);内毒素;外毒素(志贺毒素ST,也称Vero) 2 临床意义:1 )急性细菌性痢疾:腹痛腹泻 脓血粘液便,里急后重,发热,便中带血,粘液和WBC; 中毒性菌痢多见于小儿,2)慢性细菌性痢疾;3)携带者

3 鉴定:葡萄糖发酵(+), 硝酸盐还原(+), 氧化酶(—),触酶(--) 接种SS和麦康凯平板,分离出无色、透明的小菌落为可疑志贺菌。血清学鉴定。

5.简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及快速方法。

答:常规鉴定:①初步鉴定②最后鉴别③鉴别试验④血清学鉴定⑤非典型菌株

可用传代法及毒力试验进行鉴定。

快速诊断:①直接凝集②免疫荧光菌球法③协同凝集试验④乳胶凝集试验

⑤分子生物学方法

五、 沙门菌属

1 致病因素 侵袭力(Vi抗原),内毒素,肠毒素。

2 临床意义 胃肠炎(食物中毒);菌血症和败血症;肠热症(伤寒副伤寒) 3 鉴定:接种SS和麦康凯平板,分离出无色、透明的小菌落为可疑沙门氏菌,需进一步生化反应鉴定,

3).如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达试验的结果?

答:若O、H凝集效价均超过正常值,则肠热症的可能性大,若两者均低,肠热症的可能性小,若O不高H高,可能预防接种或非特异性回忆反应,若O高H不高,则可能感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。

4).对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么?

答:根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。肠热症第1、2周取外周血,第2、3周取粪便、尿液,全程可取骨髓分离培养细菌。

六、 铜绿假单胞菌

其生物学特性主要有4℃不生长,而42℃生长。在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落,在普通培养基上可产生多种色素。

鉴定:革兰阴性杆菌,葡萄糖氧化发酵(氧化型),动力阳性,氧化酶(+),

触酶(+),专性需氧,营养要求不高,麦康凯上生物良好,

初始分离培养基特征性菌落(扩展性,平坦,具有锯齿边缘,金属性光泽,产生蓝绿色色素,玉米面气味)42度长,4度不长。

七、 嗜血杆菌

简述流感嗜血杆菌的生物学特点.

答:革兰阴性短小球杆菌,无芽胞、无鞭毛、不能运动,多数菌有荚膜。需氧或兼性厌氧最适生长温度35℃,最佳培养基是巧克力琼脂。

临床意义:脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎,鼻窦炎,中耳炎

鉴定:培养特性,5-10% CO2 ,X因子,V因子;血琼脂:卫星现象;巧克力平板,露滴状菌落。

八 、 霍乱弧菌

霍乱患者为什么会出现剧烈腹泻及严重脱水的症状?

答:霍乱弧菌可产生致泻性极强的霍乱肠毒素,该毒素由1个A亚单位和5个相同的B亚单位组成,B亚单位使毒素分子与真核细胞上的受体结合,A亚单位具有酶活性功能。A亚单位进入细胞后,激活腺苷环化酶,令胞内cAMP水平增高,导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔,同时钠的吸收减少,导致严重的腹泻和呕吐

.

九 白喉棒状杆菌

简述白喉棒状杆菌的致病过程。

答:白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜,有时皮肤、结膜等部位也可见到。传染源为患者及带菌者,细菌多随飞沫或污染的物品传播,感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素,引起局部炎症和全身中毒症状。白喉杆菌在侵犯局部增殖,产生外毒素致病

2.简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。

答:①琼脂平板毒力试验。将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中,每只平皿10ml,50℃冷却,在凝固之前,将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内,制成平板(Elek平板)。在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种,划线宽度约6-7mm,两端与皿壁连接。同时,与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株,作为阳性对照。37℃培养24-48小时,若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线,并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合,则为产毒株。②SPA协同凝集试验:将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上,再加入待检菌培养物上清液。若有白喉外毒素,则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。③对流电泳:将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中,电泳30min后,若两孔之间出现白色沉淀线,表明待检菌为产毒株。

鉴定:革兰染色阳性,有明显的异染颗粒的杆菌,无荚膜,无鞭毛,菌体长短不一,直或微弯,一端或两端膨大,排列呈V,L等文字形,。亚碲酸钾血培养出黑色菌落,有或无狭窄B溶血,菌落灰白色,隆起,湿润。

九 结核杆菌

.致病机制:1 荚膜。2脂质:包括索状因子,磷脂,硫酸脑苷脂,蜡质D。3蛋白质 与蜡质D结合使机体产生超敏反应,引起组织坏死和全身中毒症状。

2. 结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高,这一特点有何意义?

答:结核分枝杆菌胞壁含脂质多,与其染色性、抵抗力、生长速度及致病性等特性有密切关系,脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性;细胞壁含大量脂质,可防止菌体内水分的丢失,故对干燥的抵抗力特别强;同时影响营养物质的吸收,故生长缓慢,且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。

3.简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。

答:1.显微镜检查 (1)直接涂片染色镜检:是一种临床常用的简易快速的检查方法。直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀(3000r/min,20min)的尿沉淀物2—3接种环涂片,涂片要厚。经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色,或作金胺“o”荧光染色。前法用油镜检查,后法用荧光显微镜高倍镜检查。镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少100个视野。结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色,其它细菌和细胞为蓝色。经荧光染色的结核分枝杆菌,在黑色背景中呈亮黄色。涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌’’或“未找到抗酸性杆菌”,而不能报告“找到结核分枝杆菌”。 (2)浓缩集菌涂片检查法:如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌,应采用浓缩集菌涂片检查法,以提高结核杆菌的检出率。所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心,取沉淀涂片,或是采用漂浮集菌法,集菌后标本经反复多次使涂层加厚,一般取3—4个接种环,涂抹面积大约直径在15mm即可,干燥固定后染色镜检。2.核酸检测 用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增,然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。PCR技术的特异性与敏感性均大于95%。3.抗PPDIgG的检测 用ELlSA法检测患者血清中抗PPDIgG,可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。肺结核病人的血清阳性率为80%—90%。

4.简述抗酸染色的步骤及结果,并举出两种抗酸菌。

答:①初染:石炭酸复红加温染5min②脱色:3%的盐酸酒精脱色1min③复染:美兰染1min结果:抗酸菌为红色,非抗酸菌为蓝色。结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌

5.一患者怀疑患有肺结核,如何进行微生物学检查?(包括标本采集至报告结果的全过程,检查方法应有传统方法和快速检查方法。)

答:1)标本采集:根据感染部位不同,采集不同的标本。 2)标本直接检查:①显微镜检查②核酸检测③抗PPDIgG的检测。 3)分离培养与鉴定 4)药物敏感性试验 5)免疫学诊断6)动物接种

梅毒螺旋体

获得性梅毒(TP):一期:硬下疳;二期:梅毒疹;三期皮肤黏膜溃疡,内脏器官肉芽肿。

标本直接检测

1、 暗视野显微镜检查2、免疫荧光染色3、镀银染色法4、核酸检测。 抗体检测

1、 性病研究实验室试验(VDRL)2、快速血浆反应素环状卡试验(RRR)3、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)

2、 荧光梅毒螺旋抗体吸收试验FTA-ABS; 荧光梅毒螺旋抗体双染色试验

FTA-ABS-DS ; 抗梅毒螺旋抗体的微量血凝检测 MHA-TP ; 抗梅毒螺旋抗体明姣颗粒凝集试验TPPA; ELISA

1.比较支原体与细菌L型的主要区别。(表格自制)

【生物学性状与致病性 --细菌L型 --支原体】--{培养特性--需要高渗---需要胆固醇} {菌落--油煎蛋状,0.5-1mm---油煎蛋状,0.1-0.3mm}{形态--高度多形态性--高度多形态性}{大小--大小为0.6-1.0?m--大小为0.2-0.3?m}{细胞膜--不含固 醇--含高浓度固醇}{细胞--缺乏或无--无}{细胞壁缺失的原因--青霉素、溶菌酶和胆汁等作用所致,去除条件可恢复--遗传}{通过滤器--能通过滤器--能通过滤器} {对青霉素的作用--抵抗--抵抗}{液体培养--有一定混浊度,可附壁---混浊度极低}{致病性--引起慢性感染,如骨髓炎、尿路感染和心内膜炎等--原发性非典型性肺炎,泌尿生殖道感染和条件致病}

1.简述衣原体独特的发育周期。

答:沙眼衣原体严格寄生在细胞内,有独特的发育周期,在其繁殖发育的周期内,可见两种形态,原体及始体。原体具有感染性,通过表面受体吸附于易感细胞并被细胞吞噬进体内。原体在吞噬体内体积增大进入增殖状态,形成始体。始体在吞噬体内以二分裂的形式进行分裂,繁殖出子代并成熟为原体,从易感细胞中释放出来,再感染新的易感细胞。

2.沙眼的病原体及其传播方式。

答:沙眼的病原体是沙眼衣原体,传播方式主要通过眼-眼或眼-手-眼传播

3.衣原体有哪些重要特点?

答:①形态多为球型,革兰染色阴性原体小,介于细菌和病毒之间,始体大,大小与细菌相似。②代谢,缺乏能量来源,故严格的细胞内寄生

③有独特的发育周期④有DNA和RNA两种核酸⑤由肽聚糖组成的细胞壁,对多种抗生素敏感。

4.衣原体引起哪些重要疾病?

答:能引起人类的沙眼、泌尿生殖道的感染和呼吸系统等疾病

2.简述白色念珠菌感染的微生物检查方法及结果分析。

答:①直接镜检可见革兰阳性、圆形或卵圆形芽生孢子及假菌丝②分离培养在沙氏培养基上形成乳白色或淡黄色类酵母菌落,镜检可见假菌丝及成群的卵圆形芽生孢子③血清学实验可检测多种假丝酵母菌的抗体,应用ELISA或胶乳凝集实验可检出白假丝酵母菌细胞壁甘露聚糖。④动物实验将白假丝酵母菌悬液1ml经尾静脉或腹腔注入小鼠或耳静脉注入兔体内,5-7天后动物死亡,解剖发现肾、肝等有脓肿。

白色念珠菌检验:

1 标本直接检查

直接显微镜检查;

G试验,也称螯试验,也测定1-3-B-D-葡聚糖;

抗原检测,ELISA 免疫印迹;

核酸检测;

2 培养鉴定

接种沙氏培养基,25或37度培养1-4天,可见奶油色类酵母样菌落,镜检可见假菌丝和芽生孢子。

鉴定试验:1 芽 管形成试验 2 厚膜孢子形成试验 3 糖同化或发酵试验。

白色念珠菌鉴定的依据有哪些

答:①直接镜检观察到圆形或卵圆形的芽生孢子、假菌丝,假菌丝中隔部伴有芽生孢子,顶端有厚壁的厚膜孢子,革兰染色阳性,着色不均匀。②玉米琼脂室温及35℃均生长并形成顶端厚膜孢子,42℃也能生长。③芽管形成试验阳性。④葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖发酵试验阳性,蔗糖、乳糖发酵试验阴性。⑤葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖同化试验阳性,乳糖同化试验阴性。⑥三氮唑氯试验,培养基不变色或淡红色。

桥。

新生隐球菌

主要侵犯部位为肺、脑、脑膜,也可侵犯皮肤,骨,关节

致病物质为荚膜;

标本直接检测:

1 显微镜检查 2 抗原检测 3 抗体检测 4 核酸检测

1.简述流行性感冒病毒的形态结构及其主要结构成分的功能。

流感病毒呈球形或丝状⑴流感病毒的内部结构 核衣壳:病毒分片段的RNA,结合有核蛋白NP以及与复制和转录有关的三种依赖RNA的RNA多聚酶蛋白。呈螺旋对称。基质蛋白(M蛋白):覆盖在核衣壳外面,M蛋白抗原性稳定,也具有型特异性。外膜:来自宿主细胞的脂质双层膜。 ⑵流感病毒的辅助结构 血凝素(HA):HA(病毒吸附))保护性抗原,血凝抑制抗体(保护性抗体)

神经氨酸酶(NA) (核衣壳释放)与病毒释放有关。

2.简述分离与鉴定流感病毒常用的实验室检验方法有哪些。

.主要包括病毒分离培养、血清学诊断和快速诊断方法

3.甲型流感病毒为何容易引起大流行?

流感病毒RNA分节段,甲型和乙型由8个节段,丙型由7个节段构成。甲型流感病毒根据其表面HA和NA抗原性的不同,可分为若干亚型。

4.简述流感病毒的抗原变异。

抗原漂移(antigenic drift)因HA或NA的点突变造成,变异幅度小,属量变,引起局部中、小型流行。抗原转换(antigenic shift)因HA或NA的大幅度变异造成,属质变,导致新亚型的出现,引起世界性的暴发流行。

轮状病毒

临床意义:4-24月婴幼儿呈急性胃肠炎感染,24-72小时潜伏,80%患儿先发热,呕吐和腹痛,随即频繁腹泻,第天10-20次,淡黄色水样便或蛋花汤样酸性便呀白色米汤样便,无粘液和脓血,恶臭。

简述轮状病毒的微生物检验方法

⑴标本采集与处理 ⑵标本直接检查 ①电镜和免疫电镜检查②抗原检测③病毒RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳分析④核酸检测⑶病毒分离培养

2.简述乙型肝炎病毒的形态结构。

球形,双层衣壳。外衣壳=包膜(脂质双层+蛋白质) HBsAg等 内衣壳: HBcAg、HBeAg 内部: DNA--- 环状双链、DNA多聚酶

3.简述乙型肝炎病毒的基因组及其功能。 不完全双链环状DNA,含4个ORF,编码7个蛋白S:HBsAg,Pre-s1,Pre-s2 C:HBcAg,HBeAg P:polymerase多聚酶X:HBxAg基因

4.简述乙型肝炎病毒的抗原组成及其意义。

HBV 抗原组成⑴、HBsAg表面抗原:是机体受HBV感染的主要标志之一。具有抗原性,能刺激机体产生保护性抗体,即抗HBs 。⑵、HBcAg核心抗原:HBcAg主要定位于感染细胞核内,不易从患者血清中检出。但HBcAg也可在肝细胞膜表面表达,宿主CTL作用的主要靶抗原。HBcAg抗原很强,能刺激机体产生抗HBc,但无中和作用。检出高效价抗HBc,特别是抗HBc IgM则表示HBV在肝内处于复制状态。⑶、HBeAg核心抗原:HBeAg可作为HBV复制及血清具有传染性的标志。急性乙型肝炎进入恢复期时HBeAg消失,抗HBe阳性;但抗Hbe亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。抗HBe说明病毒感染性较低(是预后良好的征象) 简述乙型肝炎病毒抗原抗体系统检测的用途

⑴乙型肝炎的诊断 ⑵判断传染型 ⑶判断预后 ⑷筛选献血员 ⑸检测乙肝疫苗接种效果 ⑹流行病学调查3.巨细胞病毒感染的病原学直接检查方法有哪些?

⑴检测病毒颗粒 ⑵ 检测病毒包涵体 ⑶ 检测病毒抗原 ⑷ 检测病毒核酸

4.疑似人巨细胞病毒先天性感染的诊断依据是什么?

在出生最初3周内从新生儿尿液、呼吸道分泌物或者其他体液分离出HCMV是先天性感染最敏感和特异的诊断依据。

HIV的形态结构

形态:球形病毒,80-120nm 结构1、核衣与核心——呈圆锥状、两条相同的正链RNA、有衣壳蛋白和核衣壳蛋白、有逆转录酶,蛋白酶和整合酶2、包膜 :1、脂质双层2、糖蛋白刺突(gP120 gP41)

2.简述HIV的复制过程。

⑴逆向转录为DNA,形成DNA复制中间体,⑵形成前病毒DNA ⑶转录为病毒RNA ⑷有的拼接成mRNA,有的形成RNA基因组,⑸组装,释放

3.简述AIDS的临床表现。

AIDS的临床表现分为四个时期:急性感染期、无症状感染期、艾滋病相关综合症、艾滋病

4.HIV感染的常用临床检测方法有哪些?

⑴ 标本直接检查 ①抗原检查 ②核酸检查 ⑵抗体检测 ①初筛试验 ②确证试验 ⑶ CD4T细胞计数

4.人乳头瘤病毒诊断方法有哪些?

⑴ 核酸分析 ⑵ 原位杂交 ⑶DNA印迹 ⑷聚合酶链式反应

内毒素和外毒素的特点有何不同?

答:区别要点 外毒素 内毒素

1.来源 革兰阳性菌和部分革兰阴性菌 革兰阴性菌

2存在部位 由细菌合成并分泌到菌体外,细胞壁成分,菌体裂解后释出少

数菌裂解后释出

3化学成分 蛋白质 脂多糖

4.稳定性 不稳定,不耐热 稳定,耐热

5.毒性作用 : 外毒素极强,对组织器官有选择性的毒害作用,引起特殊临床表现。 内毒素较弱,各菌的毒性作用大致相同。

6.抗原性: 外毒素强,刺激机体产生抗毒素,中和游离外毒素的毒性作用,0.4﹪甲醛处理,可脱毒成失去毒性而保持抗原性的类毒素。内毒素弱,刺激机体产生的抗菌抗体无明显中和作用,甲醛处理不形成类毒素

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