动物疫病预防控制中心20xx年度
工 作 总 结
20xx年，我们在上级业务部门和局党委的正确领导下，认真学习党的十七大精神，深入实践科学发展观，全面贯彻执行《动物防疫法》，围绕控制重大动物疫病，保障公共卫生安全两大目标，扎实有效地开展各项工作，确保了全年动物疫情形势保持稳定，现将一年来的工作总结如下：
一、学习方面
今年以来，我中心按照市委、局党委的安排部署，组织全体干部职工认真学习党的十七大精神，以科学发展观统览工作全局；在党员中认真学习和开展“争创先进党支部、争当优秀共 产 党员”的活动，教育党员始终保持共 产 党员的先进性，带头执行党的基本路线和各项决议；在业务知识上，重点学习《动物疫病防控基本知识》。做到既学政治、又学业务，既掌握业务知识、又掌握基本技能。通过学习，我们在作风建设、组织纪律、环境卫生、技术服务、整体素质提高等方面均收到了良好的效果。
二、工作情况
（一）采取的主要措施，取得的经验
为搞好全市动物疫病防控工作，切实抓好疫病监测工作，今年我们采取了以下几项措施：一是召开会议、部署工作。春
秋两次集中免疫，市委、市政府均召开了全市重大动物疫病防控会议，下发专题文件，制定工作方案，明确工作目标和任务；二是市、乡、村逐级签订目标责任书，技术部门、企业法人也均签订相应目标责任书，明确自己的目标和责任；三是加大督导督查力度。实行四大班子领导包片、局干部包乡镇、乡镇干部包村、村干部包场包户的工作机制，认真解决防控工作的实际困难和问题；四是抓好高温季节的消毒灭源工作，把此项工作列入防控工作的重要内容严格考核；五是完善应急机制，重视应急演练。做到应急物质数量足、品种全、调得出、用得上，应急预备队做到“召之既来、来之能战、战之能胜”；六是建立健全动物防控机构和防疫员队伍，妥善解决他们工资报酬，保证防疫工作顺利开展；七是加强技术培训，着力提高防疫人员和测报人员的专业技能水平，确保防疫和测报质量。
（二）重大动物疫病防控工作情况
1、免疫情况
2010我市政府订购高致病性禽流感灭活疫苗576万亳升，口蹄疫疫苗248.5万毫升；高致病性猪蓝耳病灭活疫苗21万毫升，猪高致病性蓝耳弱毒疫苗100万头份，猪瘟疫苗228.96万头份。全市高致病性禽流感、口蹄疫、猪高致病性蓝耳病、猪瘟免疫密度占应防数均达99%以上。
2、疫情监测情况
今年，我们建立完善了动物疫情三级监测网络，全市共检
测规模禽场142个，猪场98个，奶牛场30个以及一些猪、牛、羊的散养户。抽检禽流感H5免疫血清4910份，鸡新城疫免疫血清4910份，猪瘟免疫血清2535份，口蹄疫免疫血清2535份，免疫抗体合格率分别为90.5%、91.3%、90.2%、81.6%。采用虎红平板凝集试验检测布鲁氏杆菌病,共检测未免疫样品928份，其中奶牛血清478份，羊血清450份，检测结果未发现阳性。
3、疫情发生的检查处置情况
20xx年由于各级政府和业务部门高度重视动物防疫工作，保持了全市动物疫情的稳定，我市的主要疫病有：猪附红细胞体、猪大肠杆菌病、鸡球虫病、鸡传染性喉气管炎等，呈散发流行，全年无接报重大动物疫情。
4、经费与“三项储备”落实情况
20xx年我市每年将120万元动物疫病防控经费纳入财政预算，疫情应急储备金10万元。储备消毒剂火碱2吨。并按省、新乡市要求储备了高压消毒机、消毒器、防护服、防护眼镜、手套、口罩、胶鞋等应急物资。
5、消毒工作开展情况
我市认真做好高温季节消毒灭源工作，畜牧局免费发放液体消毒剂2吨，固体消毒剂240公斤。我市今年使用的消毒药品种类有：双链季胺盐、聚维酮碘、二氧化氯、火碱、复合酚。使用各类消毒剂约42吨，累计消毒面积约8600万平方米。
（三）其它动物疫病防控工作开展情况。
1、基础免疫方面
生猪和蛋鸡是我市两大畜牧主要产业。今年共防鸡新城疫1632万羽免疫密度达到100%。此外防鸡传染性法氏囊炎680万羽，鸡传染性支气管炎680万羽，马立克病650万羽，鸡痘720万羽防猪丹毒、猪肺疫65.6万头，猪伪狂犬43.1万头，猪细小病毒6.8万头，猪大肠杆菌6.8万头份；防狂犬病6500余只；防羊痘4500余只，防羊布病4600余只。
2、重点病防治情况
全市犬存栏4.5万只，免疫狂犬病6500只，免疫密度为14.4%，无狂犬病发病报告；今年重点对奶牛场和重点乡镇布病进行监测，共监测奶牛765份，羊386份，监测奶牛结核765头，其结果均为阴性，全年无布病、结核病、羊痘、炭疽、牛流行热等重点病报告；由于我市马属动物极少，马鼻疽、马传贫经流行病学调查我市无疫情发生。
（四）实验室工作情况
20xx年我市按照省、新乡市要求建立健全了三级动物疫情监测网络，其中设立三级动物疫情监测网点357个，覆盖我市22个乡镇的大、中、小养畜场和养禽场。
辉县市动物疫情测报站续建项目，已经农业部、省畜牧局批复建设，今年项目仪器设备基本到位，今年，在全局经济非常困难的情况下，投资20万元，对我中心的兽医实验室进行
了全面升级改造建设，目前实验室总面积达到380平方米，基本建成了一个集临床和特殊诊断室、无害化处理室、生理生化实验室、寄生虫和病理检验室、细菌学检验室、血清学检验室、准备室、洗涤消毒室为一体的兽医实验室，并制订了《辉县市动物疫病预防控制中心生物安全手册》、《辉县市动物疫病预防控制中心质量管理手册》，使我中心实验室向规范化、现代化迈出了重要一步。
（五）积极开展动物疫病防控技能培训工作
为提高干部、职工防控技能水平，我们首先选派两名技术人员到上级业务部门进行了技术培训，提高了他们的化验操作和样品采集技术水平。目前，我中心已有5人取得了化验室操作资格证书。其次，邀请上级业务部门专家来我市手把手对技术人员进行鸡翅静脉采血、鸡心脏采血、猪耳静脉采血、猪前腔静脉采血、牛颈静脉采血、牛尾静脉采血、牛羊O-P液采集以及鸡体解剖与采样技术培训，取得了明显效果。
（六）风险评估专家团的组成情况
我市动物疫情风险评估专家团共有7人组成。他们是：主管动物防疫的副局长、防检科长、疫控中心主任、卫生监督所长等。其中具有高级职称的4人，中级职称的3人。从3月份开始，我中心摸索撰写了疫情风险评估报告以及免疫效果的评价，用实验室监测结果指导养殖场户搞好畜禽疫病防控工作。
（七）动物标识及疫病可追溯体系建设情况
目前，我市规模养猪场有29家参加了标识及生产防疫信息报送工作，取得密钥的29家，经过培训全部实现了网上信息的上报。全市动物免疫后均建立了免疫档案，免疫的猪、牛、羊的标识佩带率为100%。
（八）积极推行动物免疫服务公开承诺制
为更好推行服务公开承诺制，我市在行政村设立了防疫明白栏、设置了固定防疫日。养殖企业屠宰企业等悬挂了法人责任制明示牌。
（九 ）专业技术人员队伍建设情况
今年局党委非常重视防控队伍建设，目前我中心大学本科生有2人，大专科生有4人，满足了各项工作的需要。
（十）基层防疫机构和防疫员队伍建设情况
我市兽医体制改革后，建立了11个区域乡镇动物检疫中心站，每站服务两个乡镇的防控工作。在全市每村选聘委托动物防疫员1名，全市共有533个村级防疫员。他们的劳务报酬，由市县两级财政解决，每半年发放一次，每年每人1200元。
（十一）动物疫情传输网络化管理情况和疫情数据上报情况。
我市动物疫情网络化管理，实现了专屋，专人，专机管理，各种疫情数据均能按照省市要求准时上报。
（十二）技术培训和技术服务情况
我们共举办动物防疫员培训班、养殖技术培训班、疫病防控技术讲座24起，培训人数4000余人次。发放《动物疫病防控明白纸》，《畜禽免疫程序》等科普资料3万余份。
二、物疫病防控工作中存在的问题及建议
（一）我市是国家级测报站，20xx年建成后，发挥了其应有的职能，但随着畜牧业发展，疫病形势日趋复杂，目前疫病监测经费紧张，监测疫病种类少，不能满足畜牧业快速发展的要求，望上级在监测经费上领导给予大力支持。
（二）部分养殖场对建立动物标识及疫病可追溯体系认识不足，缺乏上报信息的积极性和主动性。还必须进一步做好思想工作，加强上报信息的业务技能培训。
（三）加强村级防疫员队伍的技术培训，提高操作技能的业务技术水平。加强化验室人员在采血、化验操作技能方面培训，提高我市疫病监测人员的整体素质。
三、 20xx年工作的基本思路和初步计划。
（一）重点搞好重大动物疫病防控工作。
确保猪瘟、猪高致病性蓝耳病、家禽口蹄疫、高致病性禽流感、鸡新城疫免疫密度，常年保持在98%以上，秋季集中免疫密度达到100%，保证全市无重大动物疫病发生。
（二）全力做好疫病监测工作。按照省市要求圆满完成全年监测任务，通过免疫效果的检测和评价，使我市逐步走上科学防控的轨道。
（三）加强技术培训工作。对全市村级动物防疫员分批分期进行培训，对化验员有计划地选派到省、市进修学习，实验室达标建设力争通过农业部、省、新乡市考核验收。
（四）积极开展防控知识竞赛和技术比武活动。在全中心形成学、比、赶、帮、超的工作氛围，进一步提高全中心工作效率。
（五）加大监测经费的投入力度，确保疫病监测工作顺利进行。
动物疫病预防控制中心
20xx年12月3日
第二篇：20xx年动物疫病防控技能竞赛题库
河南省动物疫病防控知识竞赛复习题库
2010.9.28修改
（内部资料，注意保管）
一、法律、法规和管理制度
（一）动物疫病防控法规等
A 选择题
1、不属于我国尚未发现的动物疫病有 。（ A ）
A.A型口蹄疫 B.疯牛病
C.非洲猪瘟 D.非洲马瘟
2、我国已消灭的动物疫病有 。（ B ）
A.马传染性贫血、牛海绵状脑病 B.牛瘟、牛肺疫
C.新城疫、禽白血病 D.小反刍兽疫、马鼻疽
3、以下 为二类病原微生物。（ C ）
A.口蹄疫病毒 B.牛海绵状脑病病原
C.炭疽芽孢杆菌 D.高致病性禽流感病毒
4、动物防疫监督机构在接到报告后，怀疑是高致病性禽流感的，应在 小时以内将情况逐级报到省级畜牧兽医行政管理部门。( B )
A.1小时 B.2小时
C.3小时 D.4小时
5、重大动物疫情分为 个级别。（ C ）
A.2 B.3
C.4 D.5
6、发生口蹄疫疫情后，疫区不一定要采取的措施是 。（B）
A.在疫区周围设置警示标志、出入路口设置动物检疫消毒站，对交通工具、用具、畜舍、场地进行彻底消毒
B.对疫区内所有易感家畜进行扑杀和无害化处理
C.关闭家畜产品交易市场，禁止活畜进出及产品运出
D.如果不对疫区内所有易感家畜进行扑杀和无害化处理，应当对易感家畜进行紧急强制免疫和疫情监测
7、自疫区内最后一头（只）发病动物及其同群动物处理完毕起，经过 的监测，未出现新的病例的，彻底消毒后，经上一级动物防疫监督机构验收合格，由原发布封锁令的人民政府宣布解除封锁，撤销疫区。（ C ）
A.7天 B.20天
C.一个潜伏期以上 D.两个潜伏期以上
8、重大动物疫情的报告内容不包括 。（ D ）
A.疫情发生的时间、地点、发病的动物种类和品种
B.临床症状、发病数量、死亡数量、是否有人员感染
C.已采取的控制措施、疫情报告的单位和个人、联系方式等
D.控制疫情所需资金预算
9、以疫点为中心的一定范围内的区域划定为疫区，疫区划分时不需要考虑的因素为 。（ D ）
A.当地的饲养环境 B.天然屏障（如河流、山脉）
C.交通因素 D.当地居民的人口数量
10、有下列情况 的，可定为口蹄疫一级疫情。( A )
A.在相邻省份的相邻区域14天内有10个以上县发生疫情
B.在1个省级行政区域内有同时2个以上地(市)发生疫情
C.在1个省级行政区域内同时有5个以上县连片发生疫情
D.在1个地（市）行政区域内同时发生疫情
11、有下列情况 的，可定为口蹄疫二级疫情。( D )
A.在相邻省份的相邻区域14天内有10个以上县发生疫情；
B.在数省短期内呈多发态势的疫情
C.在1个地（市）行政区域内同时发生疫情的
D.在1个省级行政区域内同时有5个以上县连片发生疫情
12、下列 不属于我国一类动物疫病。（ D ）
A.口蹄疫 B.高致病性禽流感
C.小反刍兽疫 D.狂犬病
13、下列 属于我国二类动物疫病。（ B ）
A.猪瘟 B.伪狂犬
C.马流感 D.黑腿病
14、下列 不属于农业部发布的人畜共患病名录的病种。（ D ）
A.炭疽 B.牛结核病
C.弓形虫病 D.口蹄疫
15、对患口蹄疫或疑似口蹄疫的动物应采取 的扑杀方法？ ( B )
A.应采取放血扑杀方法;
B.应采取电击、药物注射等无出血扑杀方法;
C.应采取窒息扑杀方法;
D.应采取扭颈扑杀方法。
16、某村发生高致病性猪蓝耳病后，该村应采取以下措施，除了 。（ B ）
A.扑杀所有病猪和同群猪；
B.扑杀全村所有圈舍的生猪；
C.对未发病的相对独立圈舍的生猪用高致病性猪蓝耳病灭活疫苗进行紧急强化免疫，并加强疫情监测；
D.对病死猪、排泄物、被污染饲料、垫料、污水等进行无害化处理,对被污染的物品、交通工具、用具、猪舍、场地等进行彻底消毒。
17、当发生高致病性禽流感疫情时，应采取 的扑杀措施? （ C ）
A.扑杀疫点和疫区的所有家禽；
B.扑杀疫点的所有禽类，对疫区的部分禽类进行有针对性的扑杀；
C.扑杀疫点和疫区的所有禽类；
D.扑杀疫点、疫区、受威胁区的所有禽类。
18、关于高致病性禽流感病禽及废弃物深埋无害化处理过程，说法错误的是 。（ B ）
A.选址应当避开公共视线，选择地表水位低、远离学校、公共场所、居民住宅区、动物饲养场、屠宰场及交易市场、村庄、饮水水源地、河流等地域。位置和类型应有利于防洪。
B.坑的覆盖土层厚度应小于1.5米，坑底铺垫生石灰，覆盖土以前再撒一层生石灰。
C.禽类尸体置于坑中后，浇油焚烧，然后用土覆盖，与周围持平。填土不要太实，以免尸腐产气造成气泡冒出和液体渗漏。
D.饲料、污染物等置于坑中，喷洒消毒剂后掩埋。
19、关于口蹄疫疫点、疫区、受威胁区的划分，说法错误的是 。（ D ）
A.口蹄疫的疫点是指发病畜所在的地点。相对独立的规模化养殖场/户，以病畜所在的养殖场/户为疫点；散养畜以病畜所在的自然村为疫点；放牧畜以病畜所在的牧场及其活动场地为疫点；病畜在运输过程中发生疫情，以运载病畜的车、船、飞机等为疫点。
B.在市场发生疫情，以病畜所在市场为疫点；在屠宰加工过程中发生疫情，以屠宰加工厂（场）为疫点。
C.口蹄疫疫区是指由疫点边缘向外延伸3公里内的区域。
D.口蹄疫受威胁区是指由疫区边缘向外延伸5公里的区域。
20、根据《高致病性禽流感防治技术规范》，发生高致病性禽流感疫情后，家禽的尸体、产品及污染物有哪些无害化处理方法？除了 。（ D ）
A.深埋 B.工业化处理
C.发酵 D.化制
21、国家对动物疫病实行 的方针。（ B ）
A.强制免疫 B.预防为主
C.逐级上报 D.属地管理
B 判断题
1、种用、乳用动物应当接受动物疫病预防控制机构的定期检测；检测不合格的，应当按照国务院兽医主管部门的规定予以处理。（√）
2、根据《乳用动物健康标准》，对乳用动物的健康状况，当地动物疫病预防控制机构每年至少检测一次。（√）
3、二、三类动物疫病呈暴发性流行时，按照一类动物疫病处理。（√）
4、动物疫病预防控制机构能对动物疫情做出官方认定。（×）
5、重大动物疫情由省级兽医行政管理部门认定；必要时，由国务院兽医行政管理部门认定。（√）
6、动物疫病防治实行预防为主的方针，经强制免疫的动物应当按照国务院兽医主管部门的规定建立免疫档案，加施畜禽标识，实施可追溯管理。（√）
7、重大动物疫情应急工作按照属地管理的原则，实行政府统一领导、部门分工负责，逐级建立责任制。（√）
8、重大动物疫病应当由动物防疫监督机构采集病料，未经国务院兽医主管部门或者省、自治区、直辖市人民政府兽医主管部门批准，其他单位和个人不得擅自采集病料。（√）
9、任何单位和个人发现口蹄疫等情况，应及时向当地动物防疫监督机构报告。（√）
10、我国尚未发现的动物疫病是指疯牛病、非洲猪瘟、非洲马瘟等在其他国家和地区已经发现，在我国尚未发生过的动物疫病。（√）
11、对疑似高致病性禽流感病例，当地动物防疫监督机构应当及时采集病料送省级动物防疫监督机构实验室进行检测，检测结果为阳性的，可认定为确诊病例。（×）
12、对疑似口蹄疫病例或症状不典型病例，当地动物防疫监督机构应当及时采集病料送省级动物防疫监督机构实验室进行检测，检测结果为阳性的，可认定为确诊病例。（√）
13、发生口蹄疫疫情时，应将距疫区周边10公里内的区域划为受威胁区（√）
14、国家对严重危害养殖业生产和人体健康的动物疫病实施强制免疫。（√）
15、企业、事业单位根据需要，可以建立本单位使用的计量标准器具，其各项最高计量标准器具经有关人民政府计量行政部门主持考核合格后使用。（√）
16、属于强制检定范围的计量器具，未按照规定申请检定或者检定不合格继续使用的，责令停止使用，可以并处罚款。（√）
C 简答题
1、目前农业部发布的一类动物疫病有哪些？
答：一类动物疫病共17种，包括口蹄疫、猪水泡病、猪瘟、非洲猪瘟、非洲马瘟、牛瘟、牛传染性胸膜肺炎、牛海绵状脑病、痒病、蓝舌病、小反刍兽疫、绵羊痘和山羊痘、禽流行性感冒（高致病性禽流感）、新城疫、高致病性猪蓝耳病、鲤春病毒血症和白斑综合症。
2、《动物防疫法》对动物疫病预防控制机构职责的规定？
答：《动物防疫法》第九条规定，动物疫病预防控制机构承担动物疫病的监测、检测、诊断、流行病学调查、疫情报告以及其他预防、控制等技术工作。
3、请列出10种以上人畜共患传染病。
答：《人畜共患传染病名录》中共有26种人畜共患传染病，包括：牛海绵状脑病、高致病性禽流感、狂犬病、炭疽、布鲁氏菌病、弓形虫病、棘球蚴病、钩端螺旋体病、沙门氏菌病、牛结核病、日本血吸虫病、猪乙型脑炎、猪Ⅱ型链球菌病、旋毛虫病、猪囊尾蚴病、马鼻疽、野兔热、大肠杆菌病（O157∶H7）、李氏杆菌病、类鼻疽、放线菌病、肝片吸虫病、丝虫病、Q热、禽结核病、利什曼病。
4、《动物防疫法》关于无规定动物疫病区的界定？
答：无规定动物疫病区，是指具有天然屏障或者采取人工措施，在一定期限内没有发生规定的一种或者几种动物疫病，并经验收合格的区域。
5、什么是高致病性禽流感4级疫情诊断程序？
答：专家临床初步诊断，省级实验室确认疑似，国家参考实验室毒型鉴定（确诊），农业部最终确认和公布。
6、采集病原微生物样本应具备哪些条件？
答：采集病原微生物样本应具备以下4点：
(1)具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设备。
(2)具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员。
(3)具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施。
(4)具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。
7、我国动物疫病防治的方针是什么？对强制免疫动物采取哪些管理办法？
答：动物疫病防治实行预防为主的方针。经强制免疫的动物应当按照国务院兽医主管部门的规定建立免疫档案，加施畜禽标识，实施可追溯管理。
8、我国尚未发现的动物疫病及我国已消灭的动物疫病有哪些？
答：尚未发现的动物疫病：是指疯牛病、非洲猪瘟、非洲马瘟等在其他国家和地区已经发现，在我国尚未发生过的动物疫病。
我国已消灭的动物疫病：是指牛瘟、牛肺疫等在我国曾发生过，但已扑灭净化的动物疫病。
9、什么是官方兽医？
答：是指具备规定的资格条件并经兽医主管部门任命的，负责出具检疫等证明的国家兽医工作人员。
10、什么是一类动物疫病？
答：一类疫病，是指对人与动物危害严重，需要采取紧急、严厉的强制预防、控制、扑灭等措施的疫病。
D 问答题
1、《动物防疫法》第七十一条对动物疫病预防控制机构及其工作人员违反该法的哪些行为给予处分？
答：（《动物防疫法》第七十一条规定对动物疫病预防控制机构及其工作人员违反本法规定，有下列行为之一的，由本级人民政府或者兽医主管部门责令改正，通报批评；对直接负责的主管人员和其他直接责任人员依法给予处分）
(1)未履行动物疫病监测、检测职责或者伪造监测、检测结果的；
(2)发生动物疫情时未及时进行诊断、调查的；
(3)其他未依照本法规定履行职责的行为
2、按照《国家动物疫情测报体系管理规范》规定，应对种用、役用动物开展哪些疫病监测？(按照猪、牛、羊、马属动物、鸡、鸭鹅等动物种类分别列举)
答：
猪：口蹄疫、猪水泡病、猪瘟、伪狂犬病、猪呼吸与繁殖障碍综合征
牛：口蹄疫、结核、布氏杆菌病、疯牛病
羊：口蹄疫、布氏杆菌病、山羊/绵羊痘、痒病
马属动物：马传贫、马鼻疽
鸡：新城疫、禽流感
鸭、鹅：禽流感
3、以高致病性禽流感为例，发生疫情时如何划分疫点、疫区、受威胁区？
答：疫点：患病禽类所在的地点。一般是指患病禽类所在的禽场(户)或其他有关屠宰、经营单位；如为农村散养，应将自然村划为疫点。
疫区：由疫点边缘向外延伸3公里的区域划为疫区。疫区划分时，应注意考虑当地的饲养环境和天然屏障(如河流、山脉等)。
受威胁区：由疫区边缘向外延伸5公里的区域划为受威胁区。
4、我国对病原微生物实行分类管理，农业部颁布了动物病原微生物分类名录，将动物病原微生物分为几类？请分别说明各类动物病原微生物的划分标准（依据）？
答：国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：
第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。如口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、牛海绵状脑病病原。
第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。如蓝舌病病毒、兔病毒性出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌
第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。如低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、结核分支杆菌
第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。
5、根据动物疫病对养殖业和人体健康的危害程度，《动物防疫法》规定管理的动物疫病分为几类？各类疫病是如何界定的？
答：根据动物疫病对养殖业和人体健康的危害程度，《动物防疫法》规定管理的动物疫病分为三类。（《动物防疫法》第四条）
一类疫病，是指对人畜危害严重，需要采取紧急、严厉的强制预防、控制、扑灭措施的；
二类疫病，是指可造成重大经济损失，需要采取严格控制，扑灭措施，防止扩散的；
三类疫病，是指常见多发，可能造成重大经济损失，需要控制和净化的。
6、以高致病性禽流感为例简述对疫点应采取的应急处理措施。
答：(1)扑杀所有的禽只，并对所有病死禽、被扑杀禽及其禽类产品按国家规定标准进行无害化处理。
(2)对禽类排泄物、被污染饲料、垫料、污水等进行无害化处理。
(3)对被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、场地进行严格彻底消毒。
7、以高致病性禽流感为例简述对疫区应采取的应急处理措施。
答：(1)在疫区周围设置警示标志，在出入疫区的交通路口设置动物检疫消毒站，对出入的人员和车辆进行消毒。
(2)按规定扑杀疫区内的禽类。
(3)关闭活禽及禽类产品交易市场，禁止易感活禽进出和易感禽类产品运出。
8、请列出重大动物疫情报告应包括的内容。
答：(1)疫情发生的时间、地点；
(2)染疫、疑似染疫动物种类和数量、同群动物数量、免疫情况、死亡数量、临床症状、病理变化、诊断情况；
(3)流行病学和疫源追踪情况；
(4)已采取的控制措施；
(5)疫情报告的单位、负责人、报告人及联系方式。
（二）兽医生物安全法规
A、选择题
1、《病原微生物实验室生物安全管理条例》是 年由国务院颁发。( A )
A.2004 B.2005 C.2006 D.2007
2、国家根据病原微生物的传染性，感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为 类。( C )
A.2 B.3 C.4 D.5
3、国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，将实验室分为 个级别。( C )
A.2 B.3 C.4 D.5
4、 实验室应当通过国家认可。( A )
A.BSL-4和BSL-3; B.BSL-3和BSL-2;
C.BSL-2和BSL-1; D.BSL-1和BSL-4
5、 病原微生物统称为高致病性病原微生物。( A )
A.一类和二类 B.二类和三类
C.三类和四类 D.四类和一类
6、 实验室不得从事高致病性病原微生物活体材料的实验活动。( D )
A.BSL-4 B.BSL-3
C.ABSL-3 D.BSL-1
7、根据《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》规定：保藏机构以外的任何单位和个人 保藏菌（毒）种或者样本。( B )
A.可以 B.不得 C.适度 D.应该
8、开展口蹄疫、高致病性禽流感未经培养的感染性材料实验可以在 实验室中进行。( C )
A.ABSL-2 B.ABSL-1
C.BSL-2 D.BSL-1
9、开展口蹄疫、高致病毒禽流感灭活材料实验，可以在 实验室中进行。( D )
A.ABSL-2 B.ABSL-1
C.BSL-1 D.BSL-2
10、开展口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒分离培养应该在 实验室中进行。( B )
A.ABSL-1 B.BSL-3
C.BSL-2 D.BSL-1
11、开展口蹄疫病毒 、高致病毒性禽流感病毒动物实验活动应该在 实验室中进行。( B )
A.ABSL-1 B.ABSL-3
C.BSL-2 D.BSL-1
12、下列疫病中 属于一类动物疫病。( A )
A.口蹄疫 B.禽流感
C.狂犬病 D.炭疽
13、下列疫病中 属于二类动物疫病。( C )
A.小反刍兽疫 B.新城疫
C.布鲁氏菌病 D.猪瘟
14、下列病中 属于三类动物疫病。（ A ）
A.大肠杆菌病 B.猪圆环病毒病
C.猪细小病毒病 D.鸡传染性支气管炎
15、从事高致病性禽流感病毒、口蹄疫病毒的培养及动物接种等实验活动必须报 审批。（ D ）
A.省级兽医行政主管部门 B.中国动物疫病预防控制中心
C.中国兽药监察所 D.农业部
16、下列设备中，属于二级生物安全实验室的生物安全设备中必须有的 。（ D ）
A.生物安全柜 B.洗眼器
C.高压蒸汽灭菌器 D.包括A、B、C全部
B、判断题
1、实验室生物安全防护水平分为一级、二级、三级和四级，一级防护水平最低，四级最高。（√）
2、以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示从事体外操作的实验室的相应生物安全防护水平。（√）
3、以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3和ABSL-4表示包括从事动物活体操作的实验室的相应生物安全防护水平。（√）
4、动物病原微生物实验室根据情况决定是否建立生物安全管理体系文件。（×）
5、口蹄疫病毒、禽流感病毒属一类病原微生物。（×）
6、猪瘟病毒、新城疫病毒属二类动物病原微生物。（√）
7、猪水疱病属一类动物疫病。（√）
8、猪瘟、新城疫属一类动物疫病。（√）
9、炭疽、狂犬病属二类动物疫病。（√）
10、蓝耳病属一类动物疫病。（×）
11、菌（毒）种和样品可作为托运行李或邮件运输。（×）
12、菌（毒）种和样品及动物病料的托运人或其代理人必须按受危险品航空运输训练，并持有有效证件。（√）
13、保藏机构分为国家级保藏中心和省级保藏中心。（√）
14、保藏机构由农业部和省级兽医行政主管部门指定。（×）
15、实验室申请购买三、四类菌（毒）种或者样本的，须经农业部批准。（×）
16、实验室在相关实验活动结束后，可按规定及时将菌（毒）种和样本就地销毁或者送保藏机构保管，也可适当就地保藏。（×）
17、可在BSL-2中进行高致病性禽流感的灭活材料实验活动。（√）
18、口蹄疫病毒的分离培养活动必须在BSL-3级实验室中进行。（√）
C、简答题
1、什么是病原微生物？
答：病原微生物是指能够使人或者动物致病的微生物。
2、运输高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本时，如何选择交通工具?
答：运输高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本，应当通过陆路运输；没有陆路通道，必须经水路运输的，可以通过水路运输；紧急情况下或者需要将高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本运往国外的，可以通过民用航空运输。
3、什么是菌（毒）种？
答：菌（毒）种是指具有保藏价值的动物细菌、真菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次氏体、螺旋体、病毒等微生物。
4、什么是气溶胶？
答：是悬浮于气体介质中粒径为0.001-100μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态分散体系。
5、实验室初级物理防护屏障包括哪些内容？
答：它包括各级生物安全设备和个人防护器具。
6、实验室主要的初级生物安全防护设备设施有哪些？
答：个人防护用品——包括服装、手套、帽子、口罩等；生物安全柜等。
7、什么是人畜共患病？
答：可以由动物传播给人并引起人类发病的传染性疾病。
8、什么是外来病？
答：在国外存在或流行的，但在国内尚未证实存在或已消灭的动物疫病。
9、实验室生物安全管理体系文件通常包括哪些文件？
答：应包括实验室生物安全管理的方针和目标、管理手册、程序文件、说明及操作规程、记录等文件。
10、谁负责实验室生物安全管理体系的管理评审，评审的内容包括那些方面？
答：实验室管理层应对实验室安全管理体系及其全部活动进行评审，包括设施设备的状态、人员状态、实验室相关的活动、变更、事件、事故等。
11、什么级别的生物安全实验室可开展未经培养的高致病性禽流感病毒、口蹄疫病毒感染性材料试验？
答：二、三、四级生物安全实验室。
12、什么是微生物危害评估
答：是对病原微生物或寄生虫可能给人、动物和环境带来的危害所进行的评估。
13、我国将动物病原微生物分几类？危害程度最大的是第几类？
答：我国将动物病原微生物分为一、二、三、四类，第一类危害程度最大。
14、动物疫病分为几类？危害程度最大的是第几类？
答：根据农业部第1125号公告，我国动物疫病分为一、二、三类，第一类危害程度最大。
15、什么是高致病性病原微生物？
答：国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类，第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。
16、动物病料的跨省航空托运手续需要哪些？
答：（1）符合国家有关生物安全法律法规规定；（2）持有出发地省级兽医行政管理部门颁发的《动物病原微生物菌（毒）种或样本及动物病料准运证书》；（3）托运人须接受危险品航空动输训练，并持人有效证件。
17、运输含高致病性病原微生物的样本时，应如何对样本进行包装？
答：包装样本的容器应当密封，容器或者包装材料还应当符合防水、防破损、防外泄、耐高(低)温、耐高压的要求；容器或者包装材料上应当印有农业部规定的生物危险标识、警告用语和提示用语。
18、什么是第一类病原微生物？常见的有哪些？（至少举四种）
答：第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。常见的有：口蹄疫病毒、非洲猪瘟病毒、牛瘟病毒、高致病性禽流感病毒。
19、什么是第二类病原微生物？常见的有哪些？（至少举四种）
答：第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。
常见的有：狂犬病病毒、猪瘟病毒、新城疫病毒。
20、列举五个常见的一类动物疫病
答：口蹄疫、高致病性禽流感、猪瘟、鸡新城疫、高致病性猪蓝耳病。
21、列举十个常见的二类动物疫病
炭疽、狂犬病、魏氏梭菌病、牛结核病、牛传染性鼻气管炎、牛出血性败血病、马传染性贫血、鸡传染性喉气管炎、鸡传染性支气管炎、传染性法氏囊病、马立克氏病、鸭瘟、鸭病毒性肝炎、鸭浆膜炎、小鹅瘟。
22、列举十个常见的三类动物疫病
答：大肠杆菌病、李氏杆菌病、类鼻疽、放线菌病、肝片吸虫病、附红细胞体病、Q热、牛流行热、牛病毒性腹泻/粘膜病、猪传染性胃肠炎、猪流行性感冒、猪副伤寒、鸡病毒性关节炎、禽传染性脑脊髓炎、传染性鼻炎、禽结核病。
23、实验室的废弃物有那些？处理方法有哪些？
答：实验室的废弃物包含了废气、废液和固形物等，废弃物的处理方法主要有如高压灭菌、化学消毒、熏蒸、γ-射线照射或焚烧等。
24、BSL-2实验室内的个体防护用品有哪些？个体防护用品接触病原微生物过后应如何处理？
答：实验室个体防护用品包含防护帽、护目镜、口罩、工作服、手套等。
因接触过病原微生物，个体防护用品应当作危险废弃物进行处理，通常选用高压高温、化学消毒、焚烧等方法进行无害化处理。
25、BSL-2实验室涉及的常用危险标识有哪些？（至少举五个）
答：常用的危险标识主要有：生物危险、有毒有害、腐蚀性、辐射、刺伤、电击、易燃、易爆、高温、低温、强光、振动、噪声、动物咬伤、砸伤等。
D、问答题
1、运送高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本应具备什么条件？
答：运送高致病性病原微生物应具备以下条件：
（1）运输目的、高致病性病原微生物的用途和接收单位符合国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定；
（2）高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本的容器应当密封，容器或者包装材料还应当符合防水、防破损、防外泄、耐高(低)温、耐高压的要求；
（3）容器或者包装材料上应当印有国务院卫生主管部门或者兽医主管部门规定的生物危险标识、警告用语和提示用语。
2、二级生物安全实验室的标准操作有哪些？
答：二级生物安全实验室的标准操作有以下操作：
（1）工作一般在桌面上进行,采用微生物的常规操作和特殊操作。
（2）工作区内禁止吃、喝、抽烟、用手接触隐形眼镜和使用化妆品。食物贮藏在专门设计的工作区外的柜内或冰箱内。
（3）使用移液管吸取液体,禁止用嘴吸取。
（4）操作传染性材料后要洗手,离开实验室前脱掉手套并洗手。
（5）制定对利器的安全操作对策。
（6）所有操作均须小心,以减少实验材料外溢、飞溅、产生气溶胶。
（7）每天完成实验后对工作台面进行消毒。实验材料溅出时，要用有效的消毒剂消毒。
（8）所有培养物和废弃物在处理前都要用高压蒸汽灭菌器消毒。消毒后的物品要放入牢固不漏的容器内, 按照国家法规进行包装，密闭传出处理。
（9）昆虫和啮齿类动物的控制应参照其它有关规定进行。
（10）妥善保管菌、毒种，使用要经负责人批准并登记使用量
3、BSL-2实验室危险废弃物包含哪些？危险废弃物的处理原则有哪些？
答：BSL-2实验室危险废弃物包含了日常使用的含病原的样本：血清、组织、尸体、培养基、培养液、疫苗；操作过程中使用的滴头、离心管、试管、注射器等；以及个体防护用品如手套、口罩、防护服等。
这些危险废弃物处理的原则有以下四点：将操作、收集、运输、处理及处置废物的危险减至最小；将其对环境的有害作用减至最小；只可使用被承认的技术和方法处理和处置危险废物；排放符合国家或地方规定和标准的要求。
4、当实验室活动涉及致病性生物因子时，实验室对微生物的致病性和毒力应从哪几个方面进行评估？
答：对致病性生物因子的致病性和毒力的评估应从：①宿主范围②所引起疾病的发病率和死亡率③疾病的传播媒介④动物体内或环境中病原的量和浓度⑤排出物传播的可能性⑥病原在自然环境中的存活时间⑦病原的地方流行特性⑧交叉污染的可能性⑨获得有效疫苗、预防和治疗药物的程度等。
5、某县兽医实验室发生了禽流感感染人事件，该县和省兽医主管部门应采取那些措施？
答：该县兽医实验室应当在2小时内报告该省兽医主管部门；该省兽医主管部门应当在2小时内通报实验室所在地的县级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门，应当立即组织动物疫病预防控制机构、动物防疫监督机构和医疗机构以及其他有关机构依法采取下列预防、控制措施： ①封闭被禽流感病毒污染的实验室或者可能造成病原微生物扩散的场所。②开展流行病学调查，以确切找到病因③对病人进行隔离治疗，对相关人员进行医学检查；④对密切接触者进行医学观察；⑤进行现场消毒；⑥对染疫或者疑似染疫的动物采取隔离、扑杀等措施；⑦其他需要采取的预防、控制措施。
（三）认证认可法律法规、实验室基本管理制度、技术规范（正文）
A选择题
1、实验室应当建立标准化的管理体系文件。管理文件至少应包括质量管理手册、程序文件、作业指导书，并且 。( B )
A.管理体系文件归档存放于档案室,不得随便借阅;
B.管理体系文件摆放在明显位置,易于查阅;
C.管理体系文件只能由实验室主任、技术负责人和质量负责人查阅；
D.所有管理制度一定要上墙。
2、实验室管理制度应包括实验室岗位责任制，实验室档案资料管理制度，仪器设备使用管理制度，药品试剂管理制度，病料采集、保存及运输制度，实验室卫生安全制度， ，实验室安全操作规定，实验记录、检验报告审核制度，实验室样品管理制度，菌（毒）种管理制度，实验室剧毒药品管理领取使用制度，实验室废弃物及污染物的无害化处理制度。( A )
A.实验室生物安全管理制度；
B.技术档案管理制度；
C.仪器设备保管制度；
D.人员防护制度。
3、实验室资质认定（计量认证/审查认可）以《实验室和检查机构资质认定管理办法》为依据，按 实施评审。实验室认可根据《检测和校准实验室能力认可准则》（ISO/IEC17025）进行评审。( C )
A.《检测和校准实验室能力认可准则》（ISO/IEC17025）;
B.ISO/ IEC 导则25;
C.《实验室资质认定评审准则》;
D.ISO/IEC17025:2005《检测和校准实验室能力的通用要求》。
4、实验室管理体系应 进行的工作。( D )
A.反映检测人员;
B.反映检验室;
C.反映使用仪器设备；
D.覆盖其所有场所。
5、所有质量记录和原始记录、计算和导出数据、记录以及证书/证书副本等技术记录均应当 。( A )
A.归档并按适当的期限保存;
B.由各个检验室分散保存;
C.由检测人员各自保存;
D.交检验室主任保存。
6、每次检测的记录应包含足够的信息以 。( B )
A.使复核人员顺利复核;
B.保证其能够再现;
C.保证结果准确;
D.使批准人了解检测过程。
7、实验室应有与其从事检测活动相适应的专业技术人员和管理人员。所有人员应经过相应的培训并 。( C )
A.成为正式人员;
B.成为检测人员;
C.持证上岗;
D.能从事检测工作。
8、管理体系文件主要由管理（质量）手册、 、作业指导书、表格报告及质量记录等质量文件组成。( B )
A.管理制度;
B.程序文件;
C.收样记录;
D.仪器设备操作规程。
9、PCR实验室应当严格分区，一般分成试剂配制区、核酸（样品）提取区、 、PCR扩增结果检测（电泳）区等4个区。( A )
A.PCR扩增区；
B.核酸纯化区;
C.凝胶成像分析区;
D.加样区。
10、 高致病性禽流感的特征性临床症状有: 急性发病死亡或不明原因死亡，潜伏期从几小时到数天，最长可达21天； ; 鸡冠出血或发绀、头部和面部水肿；鸭、鹅等水禽可见神经和腹泻症状，有时可见角膜炎症，甚至失明；产蛋突然下降。( A )
A.脚鳞出血；
B.精神沉郁;
C.食欲下降;
D.羽毛松乱。
11、按照《20##年国家动物疫病监测计划》要求，高致病性禽流感病原学监测方法为 。( B )
A.血凝抑制试验(HI);
B.RT-PCR或荧光RT-PCR;
C.PCR或荧光PCR;
D.酶联免疫吸附试验(ELISA)。
12、口蹄疫的特征临床症状是唇部、舌面、齿龈、鼻镜、蹄踵、蹄叉、乳房等部位出现 。( C )
A.充血、出血；
B.肿块;
C.水泡;
D.脓肿。
13、按照《20##年国家动物疫病监测计划》要求，O型口蹄疫灭活疫苗免疫抗体检测方法为正向间接血凝试验（IHA）和 。( D )
A.血凝抑制试验(HI);
B.非结构蛋白ELISA;
C.VP1结构蛋白ELISA;
D.液相阻断ELISA。
14、按照《20##年国家动物疫病监测计划》要求，高致病性猪蓝耳病血清学检测方法为 。( B )
A.血凝抑制试验(HI);
B.ELISA;
C.正向间接血凝试验（IHA）;
D.中和试验。
15、按照《20##年国家动物疫病监测计划》要求，活疫苗免疫28天后，高致病性猪蓝耳病ELISA免疫抗体IRPC值 为合格。( A )
A.>20;
B.>30;
C.<20;
D.>10。
16、按照《20##年国家动物疫病强制免疫计划》要求，20##年对高致病性禽流感、高致病性猪蓝耳病、口蹄疫、猪瘟等四种动物疫病强制免疫的总体要求是，群体免疫密度常年维持在90％以上，其中应 免畜禽免疫密度要达到100％，免疫抗体合格率全年保持在 。( B )
A.80%以上;
B.70％以上;
C.60%以上;
D.75%以上。
17、发生高致病性禽流感疫情时，要对受威胁区域的所有家禽进行一次强化免疫；边境地区受到境外疫情威胁时，要对距边境 范围内所有家禽进行一次强化免疫。最近1个月内已免疫的家禽可以不强化免疫。( A )
A.30公里;
B.10公里;
C.20公里;
D.40公里。
18、《20##年国家动物疫病强制免疫计划》要求规模养殖家畜和种畜口蹄疫免疫程序为：仔猪、羔羊：28～35日龄时进行初免。犊牛：90日龄左右进行初免。所有新生家畜初免后，间隔 后进行一次强化免疫，以后每隔4～6个月免疫一次。( B )
A.2个月;
B.1个月;
C.15天;
D.45天。
19、《20##年国家动物疫病强制免疫计划》要求规模养猪场猪瘟免疫程序为：商品猪：25～35日龄初免， 加强免疫一次。种猪：25～35日龄初免，60～70日龄加强免疫一次，以后每4～6个月免疫一次。（ A ）
A.60～70日龄;
B.50～60日龄;
C.65～75日龄;
D.45～55日龄。
20、根据《20##年国家动物疫病监测计划》，猪瘟免疫抗体监测方法为： 和猪瘟抗体正向间接血凝。( C )
A.血凝抑制试验(HI);
B.反向间接血凝;
C.抗体阻断ELISA;
D.非结构蛋白ELISA。
21、根据《20##年国家动物疫病强制免疫计划》，小反刍兽疫免疫程序为：新生羔羊
以后免疫一次，对本年未免疫羊和超过3年免疫保护期的羊进行免疫。( A )
A.1月龄;
B.2月龄;
C.25天龄;
D.3月龄。
22、马传染性贫血（简称马传贫）的临床特征为：急性型高热稽留；亚急性型 ；慢性型不规则发热，但发热时间短；隐性型无可见临床症状，体内长期带毒。( B )
A.呈驰张热;
B.呈间歇热;
C.呈波浪热;
D.呈消耗热。
23、高致病性禽流感的血清学诊断指标有：未免疫禽H5 或H7 的血凝抑制(HI)效价达到 ；禽流感琼脂免疫扩散试验（AGID）阳性。( A )
A. 24及以上;
B. 25及以上;
C. 23及以上;
D. 22及以上。
24、关于猪水泡病以下哪项说法是错误的？ ( D )
A.猪水泡病是一类动物疫病；
B.主要在猪的蹄踵、蹄冠、唇、舍、鼻及乳头部出现水泡；
C.病毒分离鉴定主要采集水泡液和水泡皮；
D.以琼脂凝胶免疫扩散试验鉴定分离物。
25、按照布鲁氏菌病稳定控制标准，要求连续3年试管凝集试验的血清阳性率达到： ( B )
A.羊、鹿0、5%以下；牛1%以下；猪2%以下。
B.羊在0、1%以下；牛、鹿0、2%以下；猪在0、3%以下。
C.全部为阴性。
D.牛、羊0、5%以下；鹿1%以下；猪2%以下。
26、关于炭疽的典型症状，以下说法错误的是 。( C )
A.呈急性经过,多以突然死亡、天然孔出血、尸僵不全为特征。
B.牛体温升高常达41℃以上，可视黏膜呈暗紫色，心动过速、呼吸困难。
C.怀孕母畜发生流产，流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎，从阴道流出污秽不洁、恶臭的分泌物。
D.猪多为局限性变化，呈慢性经过，临床症状不明显，常在宰后见病变。
27、根据《20##年全国高致病性禽流感和口蹄疫等主要动物疫病流行病学调查方案》, 关于紧急流行病学调查，下列说法错误的是 。( D )
A.怀疑或确认发生高致病性禽流感等重大动物疫病时进行；
B.怀疑或确认发生疯牛病等外来动物疫病时进行；
C.猪瘟等主要动物疫病流行特征出现明显变化时进行；
D.非洲猪瘟等已消灭疫病再次发生时进行。
28、高致病性禽流感的病理诊断指标有哪些？ ( D )
A．消化道、呼吸道粘膜广泛充血、出血；腺胃粘液增多，可见腺胃乳头出血，腺胃和肌胃之间交界处粘膜可见带状出血；
B．输卵管的中部可见乳白色分泌物或凝块；卵泡充血、出血、萎缩、破裂,有的可见“卵黄性腹膜炎”；
C．脑部出现坏死灶、血管周围淋巴细胞管套、神经胶质灶、血管增生等病变；胰腺和心肌组织局灶性坏死；
D.以上A、B、C全都是。
29、猪链球菌病有几个病型？除了 ( D )
A．败血症型;
B．脑膜炎型;
C．淋巴结脓肿型；
D．乳房炎型。
30、根据《马立克氏病防治技术规范》，马立克氏病的实验室诊断方法有哪些？除了 ( C )
A．病原分离鉴定；
B．组织病理学诊断；
C．酶联免疫吸附试验（ELISA）；
D．琼脂扩散试验。
31、牲畜口蹄疫病原学检测结果为阳性的，应立即采取哪些措施？除了 ( C )
A．样品要及时送国家口蹄疫参考实验室进行病原分离鉴定。
B．扑杀阳性畜，必要时对同群畜进行扑杀，并作无害化处理。
C．将阳性畜所在场/村边缘向外延伸3公里内的区域划为疫区，扑杀疫区内所有易感动物。
D．将阳性情况按快报要求报告。
32、马鼻疽的实验室诊断方法有哪些？除了 ( D )
A．鼻疽菌素点眼法；
B．鼻疽菌素皮下注射法、鼻疽菌素眼睑皮内注射法；
C．酶联免疫吸附试验；
D．补体结合反应试验。
B．判断题
1、实验室应建立检测样品的唯一性标识，避免样品和记录出现混淆。（√ ）
2、检测人员在填写检测记录时写错了两个字，可用笔将其涂至认不出来后在其旁边更正。（ × ）
3、实验室应指定专人对检测标准进行定期查新，以保证检测标准的时效性。（√ ）
4、按照《20##年国家动物疫病监测计划》要求，使用O型口蹄疫合成肽疫苗免疫的猪，其免疫抗体采用VP1结构蛋白ELISA进行检测。（√ ）
5、口蹄疫各种疫苗免疫抗体合格判定标准均为抗体效价≥25。（ × ）
6、按照《20##年国家动物疫病监测计划》要求，进行口蹄疫病原学检测时，食道-咽部分泌物（O-P液）用RT-PCR方法进行检测。（√ ）
7、《20##年国家动物疫病强制免疫计划》要求对所有鸡、水禽（鸭、鹅）和人工饲养的鹌鹑、鸽子等禽只进行高致病性禽流感强制免疫。（√ ）
8、散养禽高致病性禽流感免疫程序为：春、秋两季用H5N1亚型禽流感灭活疫苗各进行一次集中全面免疫，每月定期补免。（√ ）
9、实验室所有管理体系文件都应该受控，受控的文件应有控制编号。（ √ ）
10、外购品都必须检查合格后才可以使用。（ √ ）
11、用于诊断的试剂，在使用前必须经过确认，证明能够满足检测方法规定的要求。（ √ ）
12、依据不同调查目的和任务，设置3种调查方式：紧急流行病学调查、定点流行病学调查、专项流行病学调查。（√）
13、根据《20##年国家动物疫病监测计划》，在猪瘟病原学检测中只能用RT-PCR或荧光RT-PCR方法，不能用ELISA方法。（ × ）
14、猪瘟的净化原则是：对种猪场和规模养殖场的种猪定期采样进行病原学检测，对检测阳性猪及时进行扑杀和无害化处理，逐步进行净化。（√）
C、 简答题
1、实验室检测结果的原始记录应当包括哪些基本信息？（请回答7个以上）
答：检测日期；样品名称（样品种类）、数量、编号；检测结果；依据的方法和标准；试剂名称、批号；仪器设备名称、编号；环境条件（环境温度、湿度等）；检验人员、校核或审核人员等。
2、高致病性禽流感的临床诊断指标有哪些？
答：(1)急性发病死亡或不明原因死亡;
(2)脚鳞出血；
(3)鸡冠出血或发绀、头部和面部水肿；
(4)鸭、鹅等水禽可见神经和腹泻症状，有时可见角膜炎症，甚至失明；
(5)产蛋突然下降。
3、如何判定高致病性禽流感疑似病例？
答：在临床上怀疑为高致病性禽流感，且符合以下病原学指标之一的：
(1)反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测，结果H5 或H7 亚型禽流感阳性；
(2)通用荧光反转录-聚合酶链反应（荧光RT-PCR）检测阳性；
(3)神经氨酸酶抑制（NI）试验阳性。
4、根据《20##年国家动物疫病监测计划》，高致病性禽流感的监测试验方法是怎样的？如何进行判定？
答：(1)血清学检测方法与判定标准:①方法：血凝抑制试验（HI）；②判定：弱毒疫苗，商品代肉雏鸡第二次免疫14天后，鸡群免疫抗体转阳≥50% 为合格；灭活疫苗，家禽免疫 21天后，HI抗体效价≥24为免疫合格。
(2)病原学检测方法:RT-PCR 或荧光 RT-PCR 检测方法。
5、请说出目前农业部规定的牛、羊亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活疫苗免疫抗体的检测方法？动物个体的抗体效价合格标准？存栏畜群免疫抗体合格标准？
答：亚洲1型口蹄疫灭活疫苗免疫抗体的检测方法是液相阻断ELISA，免疫效果判定标准：家畜免疫21天后，进行免疫效果监测。牛、羊亚洲I型液相阻断ELISA的抗体效价≥26判为合格；存栏家畜免疫抗体合格率≥70%判定合格。
6、口蹄疫的临床诊断指标有哪些。
答：(1)牛呆立流涎，猪卧地不起，羊跛行；
(2)唇部、舌面、齿龈、鼻镜、蹄踵、蹄叉、乳房等部位出现水泡；
(3)发病后期，水泡破溃、结痂，严重者蹄壳脱落，恢复期可见瘢痕、新生蹄甲。
(4)传播速度快，发病率高；成年动物死亡率低，幼畜常突然死亡且死亡率高，仔猪常成窝死亡。
7、如何判定疑似口蹄疫病例？
答：符合该病的流行病学特点和临床诊断或病理诊断指标之一，即可定为疑似口蹄疫病例。
8、口蹄疫的主要病理变化：
答：(1)消化道可见水泡、溃疡；
(2)幼畜可见骨骼肌、心肌表面出现灰白色条纹，形色酷似虎斑。
9、对口蹄疫疑似疫情应该如何处置？
答：（1）对疫点实施隔离、监控，禁止家畜、畜产品及有关物品移动，并对其内、外环境实施严格的消毒措施。
（2）必要时采取封锁、扑杀等措施。
10、对口蹄疫受威胁区应采取哪些措施？
答：（1）最后一次免疫超过一个月的所有易感畜，进行一次紧急强化免疫；
（2）加强疫情监测，掌握疫情动态。
11、猪瘟的典型症状有哪些？
答：（1）发病急、死亡率高；
（2）体温通常升至41℃以上、厌食、畏寒；
（3）先便秘后腹泻，或便秘和腹泻交替出现；
（4）腹部皮下、鼻镜、耳尖、四肢内侧均可出现紫色出血斑点，指压不褪色，眼结膜和口腔黏膜可见出血点。
12、高致病性猪蓝耳病的临床症状有哪些？
答：体温明显升高，可达41℃以上；眼结膜炎、眼睑水肿；咳嗽、气喘等呼吸道症状；部分猪后躯无力、不能站立或共济失调等神经症状；仔猪发病率可达100％、死亡率可达50％以上，母猪流产率可达30％以上，成年猪也可发病死亡。
D. 问答题
1、高致病性禽流感疫点内应采取哪些措施？
答：（1）扑杀所有的禽只，销毁所有病死禽、被扑杀禽及其禽类产品；
（2）对禽类排泄物、被污染饲料、垫料、污水等进行无害化处理；
（3）对被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、场地进行彻底消毒。
2、高致病性禽流感疫区内应采取哪些措施？
（1）扑杀疫区内所有家禽，并进行无害化处理，同时销毁相应的禽类产品；
（2）禁止禽类进出疫区及禽类产品运出疫区；
（3）对禽类排泄物、被污染饲料、垫料、污水等按国家规定标准进行无害化处理；
（4）对所有与禽类接触过的物品、交通工具、用具、禽舍、场地进行彻底消毒。
3、某养禽场发生高致病性禽流感疫情时，应如何进行消毒？
答：该养禽场为高致病性禽流感疫点，应对疫点进行紧急防疫消毒。
（1）对圈舍及场地内外采用喷洒消毒液的方式进行消毒，消毒后对污物、粪便、饲料等进行清理；清理完毕再用消毒液以喷洒方式进行彻底消毒，消毒完毕后再进行清洗；不易冲洗的圈舍清除废弃物和表土，进行堆积发酵处理。
（2）对金属设施设备，可采取火焰、熏蒸等方式消毒；木质工具及塑料用具采取用消毒液浸泡消毒；工作服等采取浸泡或高温高压消毒。
（3）污水沟、水塘可投放生石灰或漂白粉。
（4）在出入疫点的交通路口设立消毒站点，对所有可能被污染的运载工具应当严格消毒。
（5）从车辆上清理下来的废弃物按无害化处理。
（6）每天消毒1次连续1周，1周以后每两天消毒1次。
4、口蹄疫有哪些流行病学特点？
答：（1）偶蹄动物，包括牛科动物（牛、瘤牛、水牛、牦牛）、绵羊、山羊、猪及所有野生反刍和猪科动物均易感，驼科动物（骆驼、单峰骆驼、美洲驼、美洲骆马）易感性较低。
（2）传染源主要为潜伏期感染及临床发病动物。感染动物呼出物、唾液、粪便、尿液、乳、精液及肉和副产品均可带毒。康复期动物可带毒。
（3）易感动物可通过呼吸道、消化道、生殖道和伤口感染病毒，通常以直接或间接接触（飞沫等）方式传播，或通过人或犬、蝇、蜱、鸟等动物媒介，或经车辆、器具等被污染物传播。如果环境气候适宜，病毒可随风远距离传播。
5、对口蹄疫确诊疫情应该如何处置？对疫点、疫区分别采取什么措施？
答：疫情确诊后，立即启动相应级别的应急预案。
（1）封锁
疫情发生所在地县级以上兽医行政管理部门报请同级人民政府对疫区实行封锁，人民政府在接到报告后，应在24小时内发布封锁令。
跨行政区域发生疫情的，由共同上级兽医行政管理部门报请同级人民政府对疫区发布封锁令。
（2）对疫点采取的措施
扑杀疫点内所有病畜及同群易感畜，并对病死畜、被扑杀畜及其产品进行无害化处理；
对排泄物、被污染饲料、垫料、污水等进行无害化处理；
对被污染或可疑污染的物品、交通工具、用具、畜舍、场地进行严格彻底消毒；
对发病前14天售出的家畜及其产品进行追踪，并做扑杀和无害化处理。
（3）对疫区采取的措施
在疫区周围设置警示标志，在出入疫区的交通路口设置动物检疫消毒站，执行监督检查任务，对出入的车辆和有关物品进行消毒；
所有易感畜进行紧急强制免疫，建立完整的免疫档案；
关闭家畜产品交易市场，禁止活畜进出疫区及产品运出疫区；
对交通工具、畜舍及用具、场地进行彻底消毒；
对易感家畜进行疫情监测，及时掌握疫情动态;
必要时，可对疫区内所有易感动物进行扑杀和无害化处理。
6、猪瘟在病理学诊断上有哪些肉眼可见病变，请列举四条。
答：(1)淋巴结水肿、出血，呈现大理石样变；
(2)肾脏呈土黄色，表面可见针尖状出血点；
(3)全身浆膜、黏膜和心脏、膀胱、胆囊、扁桃体均可见出血点和出血斑，脾脏边缘出现梗死灶；
(4)脾不肿大，边缘有暗紫色突出表面的出血性梗死；
(5)慢性猪瘟在回肠末端、盲肠和结肠常见“钮扣状”溃疡。
7、简述应用深埋法对口蹄疫病死牲畜进行无害化处理的具体方法。
答：（1）选址：掩埋地应选择远离学校、公共场所、居民住宅区、动物饲养和屠宰场所、村庄、饮用水源地、河流等。避免公共视线。
（2）深度：坑的深度应保证动物尸体、产品、饲料、污染物等被掩埋物的上层距地表1.5米以上。坑的位置和类型应有利于防洪。
（3）焚烧：掩埋前，要对需掩埋的动物尸体、产品、饲料、污染物等实施焚烧处理。
（4）消毒：掩埋坑底铺2cm厚生石灰；焚烧后的动物尸体、产品、饲料、污染物等表面，以及掩埋后的地表环境应使用有效消毒药品喷洒消毒。
（5）填土：用土掩埋后，应与周围持平。填土不要太实，以免尸腐产气造成气泡冒出和液体渗漏。
（6）掩埋后应设立明显标记。
二、实验室技术理论
（一）兽医免疫学及微生物学基本知识
A、选择题
1、 炭疽杆菌抵抗力强是因为该菌存在（ C ）。
A． 质粒 B． 溶原状态
C． 芽胞 D． 荚膜
2、 正常动物受到抗原刺激后，体内首先出现的抗体是（ B ）。
A． IgA B． IgM
C． IgE D． IgG
3、 鸡马立克氏病常用的血清学诊断方法为（ C ）。
A． HI B． 病毒中和试验
C． 琼脂扩散试验 D． ELISA
4、 炭疽病死畜不能剖检的原因是（ B ）。
A．炭疽杆菌大 B． 炭疽杆菌能形成芽胞
C．炭疽杆菌能形成荚膜 D． 炭疽杆菌不易检测
5． 抗体再次应答的特征之一是（ D ）。
A． 潜伏期较长 B． IgM产量较高
C． 抗体亲和力低 D． 抗体维持时间长
6、 下列微生物中属于真核微生物的是（ B ）。
A．细菌 B．酵母
C．病毒 D．霉形体
7、 病原菌侵入血流，并在其中大量生长繁殖，产生毒性代谢产物，引起严重的全身中毒症状称为（ C ）。
A、 毒血症 B、 菌血症
C、 败血症 D、 脓毒血症
8、 需用抗酸染色法进行初步诊断的细菌是（ D ）。
A、 大肠杆菌 B、 炭疽杆菌
C、 沙门氏菌 D、 结核杆菌
9、 IgG经木瓜酶水解后，所得能与抗原结合的片段是（ A ）。
A、 Fab B、 Fc
C、 F(ab)2 D、 pFc
10、 抗体初次应答具有的特点是（ B ）。
A、 潜伏期短 B、 抗体含量低
C、 维持时间久 D、 亲和力强
11、 光滑型菌落的菌落性状为（ B ）。
A．光滑、湿润、边缘不整齐 B．光滑、湿润、边缘整齐
C．粗糙、湿润、边缘不整齐 D．粗糙、枯干、边缘不整齐
12、 隐性感染是指（ A ）。
A．动物已经感染病原但未有临床症状 B．动物在即将感染病原前的状态
C．动物已经感染病原并有临床症状 D．动物未感染病原也未有临床症状
13、 热空气灭菌法常用温度和维持时间是（ B ）。
A．121℃，15-20分钟 B．160℃，2-3小时
C．100℃，15-20分钟 D．115℃，30分钟
14、 干烤灭菌法常用温度和维持时间（ A ）。
A．160℃，2-3小时 B．121℃,15-20分钟
C．100℃，15-20分钟 D．115℃，30分钟
15、 高压蒸汽灭菌采用的温度和时间是（ A ）。
A．121℃，15-20分钟 B．160℃，2-3小时
C．100℃，15-20分钟 D．132℃ ，1-2秒钟
16、 典型的支原体菌落呈（ B ）。
A．光滑型 B．荷包蛋样
C．无固定形状 D．粗糙型
17、 典型的大肠杆菌菌落的性状为（ B ）。
A．光滑、湿润、边缘不整齐 B．光滑、湿润、边缘整齐
C．粗糙、湿润、边缘不整齐 D．粗糙、干燥、边缘不整齐
18、 炭疽杆菌在感染的动物体内，形态上通常是（ A ）。
A．有荚膜、无芽胞 B．有鞭毛、有芽胞
C．有荚膜、有芽胞 D．无荚膜、无芽胞
19、 引起断奶仔猪水肿病的病原体是（ A ）。
A．大肠杆菌 B．沙门氏菌
C．多杀性巴氏杆菌 D．轮状病毒
20、引起鸡白痢的病原体是（ D ）。
A．禽腺病毒 B．禽流感病毒
C．鸡新城疫病毒 D．沙门氏菌
21、引起禽霍乱的病原体是（ C ）。
A．禽腺病毒 B．禽流感病毒
C．多杀性巴氏杆菌 D．沙门氏菌
22、下列病原体中，能引起羊流产的是（ A ）。
A．布氏杆菌 B．大肠杆菌
C．分枝结核杆菌 D．嗜血杆菌
23、下列细菌中，属于革兰氏阳性菌的是（ A ）。
A．葡萄球菌 B．大肠杆菌
C．多杀性巴氏杆菌 D．嗜血杆菌
24、下列细菌中，属于革兰氏阳性菌的是（ D ）。
A．布氏杆菌 B．沙门氏菌
C．大肠杆菌 D．分枝结核杆菌
25、下列微生物中，属于严格细胞内寄生的是（ D ）。
A．大肠杆菌 B．沙门氏菌
C．巴氏杆菌 D．衣原体
26、下列微生物中，属于严格细胞内寄生的是（ B ）。
A．细菌 B．病毒
C．真菌 D．酵母
27、 下列微生物中，能垂直传播的病原体是（ B ）。
A．大肠杆菌 B．沙门氏菌
C．痘病毒 D．嗜血杆菌
28、 在一定时间内能使特定动物发生半数死亡的最小微生物量或毒素量，称为（ B ）。
A．MLD B．LD50
C．MID D．ID50
29、 在一定时间内能使特定动物在感染后全部死亡的最小微生物或毒素量，称为（ A ）。
A．最小致死量 B．半数致死量
C．最小感染量 D．半数感染量
30、 在一定时间内能使特定动物发生半数感染的最小微生物量或毒素量，称为（ D ）。
A．最小致死量 B．半数致死量
C．最小感染量 D．半数感染量
31、 观察病毒的常用方法是（ C ）。
A．光学显微镜观察 B．油镜观察
C．电子显微镜观察 D．普通10倍放大镜观察
32、 病毒复制过程的一般顺序是（ D ）。
A．侵入、吸附、脱壳、生物合成 B．侵入、脱壳、吸附、装配和释放
C．侵入、生物合成、脱壳、装配和释放 D．吸附、侵入、脱壳、生物合成、装配和释放
33、 下列病毒中，无囊膜的是（ C ）。
A．鸡马立克氏病病毒 B．鸡新城疫病毒
C．口蹄疫病毒 D．禽流感病毒
34、 下列中病原体中，可以引起怀孕猪流产的是（ A ）。
A．呼吸繁殖障碍综合病毒 B．大肠杆菌
C．传染性胃肠炎病毒 D．传染性腹泻病毒
35、在下列病毒中，具有凝集鸡红细胞特性的是（ D ）。
A．鸡传染性喉气管炎病毒 B．鸡马立克氏病病毒
C．鸡传染性支气管炎病毒 D．禽流感病毒
36、 下列病毒中，属于是DNA病毒的（ B ）。
A．口蹄疫病毒 B．马立克氏病病毒
C．新城疫病毒 D．禽流感病毒
37、病毒的血凝与血凝抑制实验属于（ A ）。
A．凝集试验 B．沉淀试验
C．补体结合试验 D．中和试验
38、 用牛肉膏作培养基能为微生物提供（ D ）。
A．C源 B．N源
C．生长因素 D．A、B、C都提供
39、大肠杆菌在某种培养基上形成红色菌落，该培养基属于（ B ）。
A ．营养培养基 B．鉴别培养基
C．选择培养基 D．厌氧培养基
40、 大部分细菌生长的最适pH是（ B ）。
A．7.0～7.5 B．7.2～7.6
C．8.5～9.0 D．6.4～6.6
41、 对动物注射免疫血清，属于（ A ）。
A．人工被动免疫 B．人工主动免疫
C．天然主动免疫 D．天然被动免疫
42、疯牛病的病原体是 （ B ）。
A．类病毒 B．朊病毒
C．拟病毒 D．蛭弧菌
43、 革兰氏染色法经过乙醇脱色、复染步骤后，革兰氏阴性菌（ B ）。
A．呈现蓝紫色 B．呈现红色
C．呈现无色 D．呈现深绿色。
44、 革兰氏染色法经过乙醇脱色、复染步骤后革兰氏阳性菌（ A ）。
A．呈现蓝紫色 B．呈现红色
C．呈现无色 D．呈现深绿色。
B、判断题
1、 单个细菌是肉眼看不见的，但细菌的群体——菌落是肉眼可见的。（√）
2、 细菌的基本形态包括球状、杆状和螺旋状。（√）
3、 所有细菌都具有致病性。（×）
4、 细菌的荚膜成分常常是构成细菌毒力的因素之一。（√）
5、 细菌芽胞对外界不良理化因素的抵抗力较繁殖体强得多。（√）
6、 湿热的穿透力比干热强，湿热的灭菌效果更好。（√）
7、 因为紫外线穿透力差，所以只用于动物体表及空气等消毒。（×）
8、 动物病原性细菌的培养温度大多数为37℃。（√）
9、 煮沸消毒能杀死芽孢。（×）
10、 消毒剂对动物机体细胞和微生物都有毒性。（√）
11、 支原体能进行人工培养。（√）
12、 猪喘气病的病原体是一种支原体。（√）
13、 核酸是微生物的遗传物质。（√）
14、 病毒只能在活细胞体内复制。（√）
15、 大部分病毒既含有DNA又含有RNA两种核酸。 （×）
16、 口蹄疫病毒主要感染偶蹄兽。（√）
17、 鸡传染性法氏囊炎病毒、鸡传染性贫血病毒能导致感染鸡发生免疫抑制。（√）
18、 怀疑为细菌性传染病的病料，若不能立即进行细菌分离工作，应先将病料冷冻，以免被杂菌污染。（×）
19、 发现疑似炭疽病畜尸体，应立即解剖取病料送检。（× ）
20、 血清学检验几乎不受温度的影响。（×）
21、 机体内病毒感染的表现形式和结果由病毒、机体和环境条件三者的综合作用决定。（√ ）
22、 鸡新城疫病毒接种鸡胚的部位是绒毛尿囊腔。（√ ）
23、 口蹄疫病毒能感染牛、猪、山羊和绵羊。（√ ）
24、 伪狂犬病其特征为发热、奇痒及脑脊髓炎。但是成年猪常为隐性感染，可有流产、死胎及呼吸系统症状。（√ ）
25、 T细胞是具有免疫活性的胸腺依赖性淋巴细胞，执行细胞免疫。（√ ）
26、 B细胞是在非胸腺依赖区由多能干细胞分化增殖产生的免疫活性细胞，执行体液免疫。（√ ）
27、 疫苗的运输应防止高温、暴晒和反复冻融。（√ ）
C、简答题
1、试述病毒的血凝现象及其在诊断上的重要意义？
答：病毒的血凝现象：许多的病毒表面有血凝素，能与鸡、豚鼠的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称病毒的血凝现象。当加入与病毒相特异的抗体时，则抑制了病毒凝集红细胞的特性。例如：用于诊断鸡的ND、流感、流行性乙型脑炎。
2、活苗与灭活苗的优缺点？
答：活苗优点：使用剂量小，免疫产生快。缺点：毒力返强，冷冻保存。
灭活苗优点：方便安全，容易保存。缺点：免疫期短，使用剂量大。
3、简述影响化学消毒剂作用效果的因素。
答：（1）消毒剂的浓度和作用时间：消毒剂浓度越大，作用的时间越长，杀菌效果就越好。但应注意例外，酒精在70-75%时杀菌的效果最强，而其浓度过高，会使菌体表面的蛋白迅速凝固，使酒精无法渗入菌体内部发挥作用。
（2）温度和酸碱度：通常温度升高，消毒剂的杀菌作用也增强。消毒剂的杀菌作用也与酸碱度有关。不同消毒剂有不同的最适酸碱度，如酚类消毒剂在酸性环境中的效果比较好。另外，细菌在适宜的酸碱度抵抗力较强，如果偏离其最适的酸碱度，细菌就很容易被杀死。
（3）细菌的种类和数量：不同种类的细菌对消毒剂的敏感性不同，细菌的数量越大，所需的消毒剂浓度就越高，作用时间就越长。所以应根据细菌的种类和数量来选择消毒剂的种类和浓度。
（4）环境中的有机物和其他拮抗物的影响：不同的化学消毒剂有其各自的拮抗物质。细菌也经常与血液、痰液和脓液等有机物混合在一起。这些混杂物可和消毒剂结合，从而影响化学消毒剂的杀菌作用。
4、简述血清学实验的影响因素。
答：（1）电解质：常用生理盐水，促进可见现象的发生。
（2）温度：适宜的温度可增加抗原、抗体活性及相互接触的机会。
（3）pH：pH=6-8较合适；pH=5-5.5，非特异性沉淀；pH=2-3，解离。
（4）振荡：振荡加速反应；但过速可解离。
（5）杂质：蛋白质、脂质、糖类杂质时，抑制反应进行或引起非特异性反应。故试验设立对照。
5、抗原性质有哪些？
答：抗原的性质：包括免疫原性与反应原性。免疫原性：指抗原能刺激机体产生抗体和效应淋巴细胞。反应原性：指抗原与相应的抗体或致敏淋巴细胞发生反应的特性。
6、病毒的培养方法有几种，各自特点。
答：（1）动物接种：病毒经注射、口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖，并使动物产生特定的反应。优点：操作方面易行。 缺点：受机体免疫力的影响，常需要用无菌动物。运用：分离、增殖病毒，疫苗效力试验，疫苗和抗血清的生产。
（2）鸡胚培养： 一般用9-12日龄的鸡胚，分别接种于卵黄囊内，羊膜腔，尿囊腔等部位。病毒生长的标志为鸡胚死亡、畸型和出血。用于病毒分离与疫苗生产。
（3）组织培养：在离体活细胞上培养病毒的方法
1）组织块培养：取组织片（如一段胎儿气管或一小块鼻黏膜）进行培养。
2）细胞培养：病毒感染细胞后，大多数引起细胞病变，称为病毒的致细胞病变作用。表现为细胞变形，胞浆内出现颗粒化，核浓缩、核裂解等。
7、免疫程序应当包括那些要素，制定免疫程序的依据？
答：免疫程序要素：疫苗接种的间隔时间，次数，接种方法，剂量等，动物品种、年龄，疫苗种类。
依据：（1）当地疾病流行情况及其规律。
（2）根据畜禽的种类、用途、饲养管理条件、畜禽及其产品上市的旺季。
（3）母源抗体的水平。
（4）疫苗的种类、性质、免疫途径及免疫期。
8、巴氏消毒法的内容？
答：利用高温杀死物品中的病原菌或一般杂菌，同时又不致严重损害食品质量。加温61-63℃加热30min，或71-72℃加热15-30s,然后迅速冷却到10℃左右，可将其中的非芽孢病原菌杀死。常用于葡萄酒、啤酒及牛奶等食品的消毒。
9、简述病毒鉴定常用方法
答：中和试验、补体结合试验、病毒的红细胞凝集和红细胞凝集抑制试验、荧光抗体试验、免疫酶标记技术和免疫扩散试验、聚合酶链式反应（PCR）和基因序列分析。
10、免疫血清学检测技术有哪些类型？
答：免疫非标记技术主要包括凝聚性反应（凝集试验、沉淀试验）、补体结合试验、中和试验（病毒中和试验、毒素中和试验）和免疫标记技术（标记荧光素、酶分子、金属颗粒、乳胶颗粒、放射性同位素等）。
11、凝集试验的特点何在？直接凝集试验与间接凝集试验有何异同？
答：细菌、红细胞等颗粒性抗原，与相应抗体结合，在有适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集试验。参与的抗体主要为IgG、IgM。凝集试验可用于检测抗原或抗体，优点是操作简便。
（1）直接凝集试验 颗粒性抗原与凝集素直接结合并出现凝集现象的试验称作直接凝集试验。按操作方法可分玻片法和试管法两种。
（2）间接凝集试验 将可溶性抗原(或抗体)吸附在不溶性颗粒载体的表面，与相应抗体(或抗原)作用，在电解质存在条件下，出现的特异性的凝集反应称为间接凝集反应。间接凝集试验敏感性高，比直接凝集反应敏感2-8倍。
12、简述疫苗的种类。
答：疫苗包括活苗和灭活苗、联苗与多价苗、寄生虫疫苗、类毒素、亚单位组份苗和基因工程苗。
13、简述作为菌种、毒种应具备的条件。
答：菌种、毒种是决定疫苗质量的最重要的因素。是国家的重要生物资源，一般的菌种、毒种必须具有良好的免疫原性和安全性、具有典型的生物学性状、血清型与疫苗使用地区流行的病原相符、遗传性状稳定、历史及有关资料清楚完整。
14、简述佐剂的分类及常用佐剂。
答：（1）不溶性铝盐类佐剂，主要是氢氧化铝胶，其次是明矾及磷酸三钙等。
（2）油水乳剂佐剂，此类佐剂最著名的有弗氏佐剂。
（3）蜂胶佐剂，蜂胶是蜜蜂采自柳树、杨树、栗树和其他植物幼芽分泌的树脂，并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂腊、花粉及其他一些有机与无机物的一种天然物质。
（4）微生物及其代谢产物佐剂，如结核杆菌，破伤风类毒素和分枝杆菌细胞壁的一些成分等。
（5）人工合成佐剂，如海藻糖合成衍生物等。
（6）其他类型佐剂，如免疫刺激复合物佐剂、细胞因子类佐剂、非离子阻断共聚物表面活性剂佐剂、核酸及其类似物佐剂和左旋米唑佐剂等。
15、简述疫苗运输与保存应注意的事项。
答：疫苗的运输需注意防止高温、暴晒和反复冻融。活苗需低温保存。如放入冰瓶或冷藏箱内。北方寒冷地区要避免疫苗冻结或因温度高低不定而引起反复冻结和融化。切忌将疫苗装入衣袋内，以免因体温较高而降低效力。冻干苗应在－15℃下保存，如猪瘟兔化弱毒冻干苗在－15℃可保存一年。一些国家的冻干苗因使用耐热保护剂而保存于4-6℃。多数活疫苗只能现制现用，在0-8℃可短期保存。灭活苗可在2-15℃下保存。
D、问答题
1、论述当动物发生细菌类疾病时，请应用微生物学知识做出诊断，请详细写出诊断步骤。
答：（1）细菌的检验、形态检查：
取致死畜禽的组织或血液制成血液涂片或组织触片，经染色，然后在显微镜下观察，对于一些具有特征形态的病原体，可鉴别。
复染色法：如革兰氏染色法
（2）细菌的分离培养：
1）细菌的生长表现：在固体培养基上生长为菌落。表现：大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度，表面光滑、粗糙、有无光泽。在液体培养基：所有细菌能在其扩散生长。 表现：浑浊、沉淀、形成菌环、细菌膜等。
2）细菌的分离：用人工培养方法将细菌从病料或某一个菌落移植到新的培养基中培养分离出来，称细菌的分离。
（3）细菌的生化试验：
（4）动物试验：接种于动物，通过动物的症状、病理变化、染色、细菌培养、生物化学实验、免疫学技术，检验细菌。
（5）免疫学诊断：
1）凝集试验 2）沉淀试验 3）补体结合试验。
2、 试述炭疽病的微生物学诊断方法。
答：疑似炭疽死亡动物的尸体，应尽快自末梢血管（耳尖、尾尖等）采血，涂片染色镜检，取血后应立即用烙铁将创口烙焦，以止血封口。由于病尸体内的炭疽杆菌暴露于空气中，接触了氧，气温又不适宜其生长时，就会形成芽孢，所以尸体严禁剖检。
（1）涂片镜检 取标本涂片进行革兰氏染色，发现有荚膜的呈竹节状排列的革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可作出初步诊断。陈旧病料可以看到“菌影”，确诊须做分离培养和动物接种。
（2）分离培养 取病料接种普通琼脂或血液琼脂，37℃培养18-24h，观察有无典型的炭疽杆菌菌落，同时革兰氏染色镜检。
（3）动物试验 将待检材料或培养物用生理盐水做适当稀释和磨匀后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如为炭疽，多在18-24h因败血病死亡。剖检可见注射部位皮下胶样水肿，脾脏肿大。取脏器涂片镜检，如发现有荚膜竹节状大杆菌，可确诊。
（4）血清学试验 常用炭疽环状沉淀试验（Ascoli氏反应）。方法是：在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠，若二液接触面产生灰白色沉淀环，即可诊断。
3、 口蹄疫病毒的分型及其对温度抵抗力特点？
答：口蹄疫病毒有7个血清型，分别命名为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3以及亚洲1型。各型之间几乎没有交叉免疫力，同一型之间又有不同的亚型。我国流行的主要有O、A、C型。口蹄疫病毒在低温能长期保存，但易被热灭活。
4、简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。
答：（1）病料的采集和处理 可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织，按1：5的比例假入灭菌的生理盐水或缓冲液，用研磨器将组织研碎制成20%的悬液，反复冻融2-3次，5000r/min离心20分钟，取上清，用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。
（2）分离培养 将处理好的病料经尿囊腔接种9-11日龄无母源抗体的鸡胚，37℃孵育，每天照蛋2次，弃除24小时内死亡胚，收集24 -96小时死亡胚，96小时内未死亡胚取出。
（3）收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性，对有血凝活性分离物应用标准的抗新城疫病毒，采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定。
确定为新城疫病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定--致病性试验。
5、制备细菌培养基的一般程序有哪些？细菌培养基按照用途可分为哪几类？
答：制备培养基的一般程序包括：称量、加热、溶解、调酸碱度、过滤、灭菌、分装。
按照用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基。
（二）动物传染病、流行病学基本知识
A、选择题
1、以下哪些动物不会感染口蹄疫 ？（ B ）
A.骆驼 B.马 C.牦牛 D.山羊
2、 的特征是渐进性消瘦和多种组织器官形成特殊结节。（ B ）
A.巴氏杆菌病 B.结核杆菌病
C.布氏杆菌病 D.沙门氏菌
3、 俗称猪喘气病。（ D ）
A、猪肺疫 B、猪胸膜肺炎
C、猪瘟 D、猪支原体肺炎
4.传染病流行过程的三个基本环节是： （ A ）
A.传染源、传播途径和易感动物。
B.病原体、动物机体和外界环境。
C.传播途径、易感动物和传染来源。
D.传播途径、易感动物和外界环境。
5、因某病死亡头数占同期某种动物总头数的频率指标称 （ C ）
A.患病率 B.病死率 C.死亡率 D.发病率
6、确定检疫期限是根据该种传染病的（ B ）
A.最短潜伏期 B.最长潜伏期
C.平均潜伏期 D.病程。
7、缩写的S P F是指 （ C ）
A.无菌动物 B.无病动物
C.无指定的特定的病原体动物 D.无病原体的动物。
8、动物传染病的主要发展阶段为 （ A ）。
A．潜伏期、前驱期、明显期（发病期）和转归期
B．潜伏期、前驱期、明显期（发病期）和持续期
C．潜伏期、滞留期、明显期（发病期）和转归期
D．感染期、前驱期、明显期（发病期）和转归期
9、禽流感的潜伏期从数小时到数天，最长可达 天。（ D ）
A．3 B．7 C．14 D．21
10、针对布鲁氏菌病的流行特点，以下哪些是不正确的？ （ B ）
A.布鲁氏菌是一种细胞内寄生的病原菌，主要侵害动物的淋巴系统和生殖系统。
B.羊、牛、猪的易感性最强。母畜比公畜，幼年畜比成年畜发病多。
C.羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌对人的侵害最为严重。
D.潜伏期一般为14～180天。
11、以下关于炭疽流行特点的描述错误的是 （ B ）
A.炭疽芽胞对环境具有很强的抵抗力，其污染的土壤、水源及场地可形成持久的疫源地。
B.炭疽无明显的季节性。
C.炭疽呈地方性流行。
D. 炭疽主要经消化道、呼吸道和皮肤感染。
12、关于J亚群鸡白血病的论述，以下哪条是错误的？ （ A ）
A.所有品系的肉用型和蛋用型鸡都易发。
B.ALV-J主要通过种蛋（存在于蛋清及胚体中）垂直传播。
C.也可通过与感染鸡或污染的环境接触而水平传播。
D.主要侵害骨髓细胞，导致骨髓细胞瘤和其它不同细胞类型恶性肿瘤。
B、 判断题
1、患病动物污染的饲料、饮水、垫料等可称为传染源。（×）
2、 传染病是由病原微生物引起的，具有一定的潜伏期和临床症状和传染性的疾病。（√）
3、 疫源地是传染源及其排出的病原体存在的地区。（√）
4、病毒的持续感染是动物长期或终生带毒，但无明显临床症状的感染。（√）
5、口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的危害偶蹄兽的一种急性、热性、高度接触传染性的疾病，主要侵害牛、羊、猪、骆驼、鹿等偶蹄类牲畜动物。（√）
6、猪瘟是由猪瘟病毒引起的传染病，有季节性，发病率高达95%－100%，病死率也同样高，是最严重的猪病之一。（×）
7、高致病性禽流感是一种由B型流感病毒引起的鸡的急性、热性、高度接触性传染性疾病，被世界动物卫生组织定为A类传染病，我国定为一类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。（×）
8、新城疫是由新城疫病毒感染家禽引起的急性、高度接触性传染病，是我国规定的一类动物疫病，本病春季多发。（√）
9、羊痘是由痘病毒引起的非急性、接触性传染病，多发于冬末春初，气候严寒、饲养管理不善等因素都可促使发病或加重病情。（×）
10、 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病，仔猪发病率可达100%、死亡率可达50%以上，母猪流产率可达30%以上，育肥猪可发病死亡是其特征。（√）
11、传染病的概念是由病原微生物引起的，具有一定的潜伏期和临床症状和传染性的疾病。（√）
12、检疫是指利用各种诊断方法对动物及其相关产品进行疫病、病原体或抗体检查。（√）
13、传染源是指：在体内有病原体寄生、生长、繁殖，并能排出体外的动物。（√）
14、疫源地是指传染源及其排出的病原体存在的地区。（√）
15、死亡率是指某病病死数占某种动物总头数的百分比。（√）
16、病毒的持续感染是指：动物长期或终生带毒，但无明显临床症状的感染。（√）
17、什么是终末消毒：在病畜解除隔离、痊愈或死亡后，或者在 疫区解除封锁之前，为了消灭疫区内可能残留的病原体所进行的全面彻底的大消毒。（√）
C．简答题
1、至少列出5种动物RNA病毒名称。
答：猪瘟病毒、蓝耳病病毒、口蹄疫病毒、新城疫病毒、禽流感病毒。
2、新城疫的典型病理变化是什么？
答：主要病变是出血和坏死，尤其以消化道和呼吸道为明显。腺胃乳头和乳头间有出血点，或有溃疡和坏死，肌胃角质层下也常见有出血点，气管、直肠粘膜多见出血。
3、鸡新城疫主要传染源和自然感染途径是什么？
答：新城疫的主要传染源是病鸡和带毒鸡。
新城疫的自然感染途径主要经呼吸道和消化道，其次是眼结膜，也可经外伤及交配传染。
4、猪瘟临床剖检的特征性病理变化有哪些？
答：体表有紫斑或出血点，淋巴结周边出血，呈大理石样变，脾脏出血性梗死，盲肠、回肠、结肠内形成纽扣状肿胀，肾脏表面有针尖状出血，严重时呈麻雀卵样变化，膀胱粘膜有针尖状出血。
5、炭疽的特征病变是什么？
答：天然孔出血，血液凝固不良，败血症变化，脾脏显著肿大和皮下、浆膜下结缔组织出血性胶样浸润。
6、禽流感的传播途径有哪些？家禽的主要感染途径有哪些？（间接接触传播的媒介有哪些？）
答：禽流感的传播途径包括病禽和健康禽直接接触传播、病毒污染物和健康禽间接接触传播两种。家禽主要通过呼吸道和消化道感染。
（禽流感病毒存在于病禽和感染禽的消化道、呼吸道和禽体脏器组织中。因此病毒可随眼、鼻、口腔分泌物及粪便排出体外，含禽病毒的分泌物、粪便、死禽尸体污染的任何物体都能成为间接接触传播的媒介，如饲料、饮水、鸡舍、空气、笼具、饲养管理用具，运输车辆、昆虫以及各种携带病毒的鸟类等均可机械性传播。）
7、高致病性禽流感的流行特点是什么？
答：高致病性禽流感病毒与普通流感病毒相似，一年四季均可流行，但在冬季和春季容易流行，因此禽流感病毒在低温条件下抵抗力较强。各种品种和不同日龄的禽类均可感染高致病性禽流感，发病急、传播快，其致死率可达100％。
8、简述新城疫病毒的流行特点主要有哪些？
答：鸡新城疫一年四季均可发生，特别在春初、秋冬季节变换时易发。流行时以鸡易感性最高，鸽子、鹌鹑、鹦鹉、火鸡、鹅、鸭、鸵鸟等都可感染发病。其中鸽子和鹦鹉对本病的流行起着很关键的作用。病死鸡是本病的主要传染源。健康鸡接触病鸡及其排泄物、分泌物、污染的饲料、饮水、垫料等，通过呼吸道、眼结膜以及消化道感染发病。
9、口蹄疫的主要病理变化有哪些？
答：（1）消化道可见水泡、溃疡；
（2）幼畜可见骨骼肌、心肌表面出现灰白色条纹，形色酷似虎斑。
10、牛结核病的流行特点是什么？
答：本病奶牛最易感，其次为水牛、黄牛、牦牛。人也可被感染。结核病病牛是本病的主要传染源。牛型结核分枝杆菌随鼻汁、痰液、粪便和乳汁等排出体外，健康牛可通过被污染的空气、饲料、饮水等经呼吸道、消化道等途径感染。
11、牛结核病以哪几种临床类型最为常见？
答：以肺结核、乳房结核和肠结核最为常见。
12、口蹄疫有哪几个血清型？
答：A、O、C、亚洲I(Asia-1), 南非I(SAT1)、南非II(SAT2)、南非III(SAT3)。
13、马传染性贫血病的特征性临床症状有哪些？
答：马传染性贫血病的特征是：临床反复发作，呈现发热并伴有贫血、出血、黄疸、心衰、浮肿和消瘦等症状
14、能引起母猪流产、死胎的疾病主要有哪些？
答：有猪瘟、母猪繁殖与障碍呼吸综合症、细小病毒感染、猪伪狂犬病、日本乙型脑炎、布鲁氏菌病、猪弓形虫病、猪衣原体病等。
15、能引起猪呼吸道疾病的病原体主要有哪些？
答：（1）败血支原体：引起猪喘气病；（2）胸膜肺炎放线杆菌：引起猪胸膜肺炎；（3）多杀性巴氏杆菌：引起猪肺疫；（4）败血波氏杆菌：引起猪传染性萎缩性鼻炎；（5）副猪嗜血杆菌：引起猪肺炎、胸膜炎；（6）链球菌：引起育肥猪咳嗽、肺炎。
猪繁殖与呼吸障碍综合症(PRRS)；猪圆环病毒2型：又称仔猪断奶全身消耗性综合症(PMWS)；猪流行性感冒病毒；伪狂犬病病毒(PRV)。
16、能引起鸡产蛋下降的疾病主要有哪些？
答：主要有减蛋综合征(EDS－76)、鸡传染性支气管炎(IB)、产蛋鸡非典型新城疫(ND)、鸡肿头综合征(SHS)、禽流感(AI)、禽脑脊髓炎(AE)、禽痘(POX)、败血霉形体(MG)、传染性鼻炎(IC)和禽霍乱(FC)等。
17、能引起奶牛流产的疾病主要有哪些？
答：1、病原微生物引起奶牛传染性流产疾病：如布氏杆菌病、钩端螺旋体病、弧菌病、病毒性腹泻、传染性气管炎、霉菌性流产、衣原体病、李氏杆菌病、流行性热等；2、寄生虫性流产：如滴虫病、肉孢子虫病、新孢子虫病等。
18、马立克氏病在临床上分为哪几类型？
神经型、内脏型、眼型、皮肤型。
19、为什么高致病性禽流感多发生于冬春季节？
答：第一，禽流感病毒对温度比较敏感，随着环境温度的升高，病毒存活时间缩短。另外，夏秋时节光照强度相对更高，阳光中的紫外线对病毒有很强的杀灭作用。
第二，夏秋时节，禽舍通风强度远远高于冬春季，良好的通风可以大大减少鸡舍环境中病毒的数量。因此，病毒侵入鸡体内的机会和数量明显减少，感染几率下降。同时，良好的通风也减少了不良气体对鸡呼吸道粘膜的刺激，对维持呼吸道粘膜的抵抗力具有重要意义。
D、问答题
1、生猪口蹄疫的主要临床症状和病理变化是什么？
答：临床症状：病初体温升高，食欲减退或不食、流涎、口腔内及鼻镜、乳房、蹄冠、蹄叉、蹄踵等部位，有水疱或破裂后形成红色糜烂。
病理变化：（1）在口腔、蹄部有水疱和烂斑；（2）心脏病变、心包膜有弥漫性及点状出血，心肌切面有灰白或淡黄色斑点或条纹（虎斑心）。
2、从传染病的三个基本环节来论述口蹄疫的流行病学特点。
（1）易感动物是偶蹄动物，包括牛科动物（牛、瘤牛、水牛、牦牛）、绵羊、山羊、猪及所有野生反刍和猪科动物均易感，驼科动物（骆驼、单峰骆驼、美洲驼、美洲骆马）易感性较低。
（2）传染源主要为潜伏期感染及临床发病动物。感染动物呼出物、唾液、粪便、尿液、乳、精液及肉和副产品均可带毒。康复期动物可带毒。
（3）可通过呼吸道、消化道、生殖道和伤口感染病毒，通常以直接或间接接触（飞沫等）方式传播，或通过人或犬、蝇、蜱、鸟等动物媒介，或经车辆、器具等被污染物传播。如果环境气候适宜，病毒可随风远距离传播。
3、动物传染病的常见流行形式有哪些？
答：在动物传染病的流行过程中，根据在一定时间内发病率的高低和传播范围的大小(即流行强度)，可区分为四种表现形式：
（1）散发性(sporadic)：发病数目不多，在一个较长时间里只有个别的零星发生，称为散发。
（2）地方流行性(endemic)：在一定的地区或畜禽群中，发病动物的数量较多，但传播的范围不大，带有局限性传播的特征。
（3）流行性(epidemic)：是指在一定时间内，一定畜禽群出现比寻常为多的病例，疾病发生频率较高的一个相对名词。
（4）大流行性(pandemic)：发病数量大，流行的范围可达几个省甚至全国或几个国家。4、监测采样过程中抽样方式有哪几种？（回答4种以上）
（1）简单随机抽样
（2）分层抽样（又称：分类抽样、类型抽样）
（3）整群抽样
（4）系统抽样（又称：等距抽样、机械抽样）
（5）多阶段抽样（又称多级抽样）
（6）双重抽样（又称二重抽样、复式抽样）
（7）按规模大小成比例的概率抽样（简称PPS）
5、什么叫人畜共患病？常见的人畜共患病有哪些（至少说出五种）？
答：人畜共患病指人类和脊椎动物之间自然传播的疾病。其病原包括病毒、细菌、支原体、螺旋体、立克次氏体、衣原体、真菌、寄生虫等。
主要的疾病种类有：高致病性禽流感、炭疽、狂犬病、布氏杆菌病、结核病、日本血吸虫、乙型脑炎、猪丹毒、李氏杆菌病、链球菌病、猪囊虫病、钩端螺旋体、旋毛虫病、肝片吸虫等。
6、猪繁殖与呼吸障碍综合征的主要症状？什么是高致病性猪蓝耳病？
答：猪繁殖与呼吸障碍综合征（又称猪蓝耳病）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种高度接触性传染病，不同年龄、品种和性别的猪均能感染，但是以妊娠母猪和一个月龄以内的仔猪最易感。该病以母猪流产、死胎、木乃伊胎以及自主呼吸困难、败血症、高死亡率等为主要特征。
高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病，仔猪发病率可达100%、死亡率可达50%以上，母猪流产率可达30%以上，育肥猪可发病死亡是其特征。
（三）仪器设备操作和维护
A、选择题
1、仪器使用过程中必须 。( B )
A.对仪器有一定了解 B.严格按操作规程操作
C.根据经验进行操作 D.模仿其他人的操作
2、 可以放入高压蒸汽灭菌器进行消毒（C）
A.有腐蚀性、挥发性的物品 B.不耐热的物品
C.玻璃器械 D.盐浓度过高的溶液
3、使用台式鼓风干燥箱时，所有干烤的实验器材须 。（A）
A.漓干水以后才能放入 B.洗干净后才能放入
C.洗后立即放入 D.随时可以放入
4、恒温水浴锅内用水为 。(B)
A.自来水 B.纯水
C.饮用水 D.沸后冷却水
5、超声波清洗器使用时 。(A)
A.只能将清洗物品放在清洗网中进行清洗 B.可以将清洗物品放在清洗网中进行清洗
C.迅速将清洗物品放在箱中进行清洗 D.只能将清洗物品放在箱中进行清洗
6、高速台式冷冻离心机使用时 。(B)
A.立即离心时才进行制冷 B.要预降温
C.离心时不必盖上压盖 D.离心结束后打开顶盖
7、天平使用时应注意 。（A）
A.调准水平、不得轻易挪动位置 B.挥发性，腐蚀性气体的药品操作要快
C.每次称量完毕用力关闭拉门 D.称量超过天平最大称量限度的10%
8、长度为750bp的DNA片段电泳时最适合的琼脂糖的浓度为 。（A）
A．1% B．2% C. 0.5%
9、 显微镜的目镜倍数为 。（A）
A．10× B．40× C．100×
B、判断题
1、油镜使用完毕后，应用擦镜纸蘸一点二甲苯，拭去镜头上的香柏油。（√）
2、离心机自行停转后，方可将离心机盖揭开取出离心管。（√）
3、高压灭菌后，断去电源即可打开高压灭菌器。（×）
4、使用高压锅前须检查水位。（√）
5、使用酶标仪时不管使用何种底物都不用换滤光片。（×）
6、选择移液器时选择最好使用量程范围接近的移液器。（√）
7、使用离心机前必须配平。（√）
8、 使用自动灭菌高压锅时人员可以离开。（×）
9、进行RNA操作时移液器枪头必须经过DEPC水处理。（√）
10、荧光显微镜的汞灯可以在开启后立即关闭。（×）
11、荧光染色的标本可以在荧光显微镜下长期观察。（×）
12、使用电子分析天平时，称量不得超过天平的最大量程。（√）
13、电子分析天平内应置放干燥剂，常用变色硅胶，应定期更换。（√）
14、使用台式鼓风干燥箱时可以只开启加热开关，鼓风开关开启或不开启都可以。（×）
C、简答题
1、兽医实验室有哪些仪器设备需要定期检定？（请回答5种以上）
答：游标卡尺、天平、移液器（刻度吸管）、容量瓶（量筒）、恒温培养箱、高压灭菌器（高压灭菌锅）、温湿度计、pH计等。
2、离心机使用时应如何平衡？
答：离心管至少要二二平衡，放在转头的对称位置，装管数是6、12、18的转头可3个一批平衡。最好是所有的离心管一样重。水平转头不允许有空档（即不挂吊篮的现象），否则会损坏转头。
3、使用吸管如何防止产生气溶胶？
答：（1）不要使用吸管混匀微生物悬液。必须使用时，应尽量将吸管的管口置于液面下进行吹吸，尽可能不产生或少产生气泡。
（2）吸管中液体应依靠重力沿容器壁流下，不得垂直滴入容器和用力吹出，以免产生气溶胶。
(3)在使用吸管移液时，工作台面上应铺一层浸有消毒液的毛巾，以防吸管中的微生物悬液滴落到工作台面产生气溶胶。
4、微量血凝板应如何正确清洗？
答：微量血凝板的清洗，对试验结果有很大的影响。一般的清洗程序是：试验完毕后立即将血凝板用自来水反复冲净，再用洗涤剂的温水溶液浸泡30分钟，并在洗涤剂溶液中以棉拭刷凹孔及板面，然后再用自来水反复冲净每个凹孔及板面，待反应板干燥后，放到2%-3%浓度的盐酸中浸泡24小时以上，捞出用自来水冲洗多次，最后以蒸馏水冲洗2-3次，在37℃温箱中烘干备用。
5、洗板机在使用后应做好哪些工作
答：洗板机在使用后应用去离子水或纯净水清洗管路，防止阻塞和腐蚀。
D、问答题
1、试述显微镜使用的注意事项。
答：①持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。②轻拿轻放，不可把显微镜放置在实验台的边缘，以免碰翻落地。③保持显微镜的清洁，光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。④水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，如果沾污应立即擦净。⑤放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，防止压坏玻片或碰坏物镜。⑥要养成两眼同时睁开的习惯，以左眼观察视野，右眼用以绘图。⑦不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要任意拆卸各种零件，以防损坏。⑧使用完毕后，必须复原才能放回镜箱内，其步骤是：取下标本片，转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜，下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，放回实验台柜内。最后填写使用登记表。(注：反光镜通常应垂直放，但有时因集光器没提至应有高度，镜台下降时会碰坏光圈，所以这里改为平放)
2、试述使用高压蒸汽灭菌器的注意事项。
答：①待灭菌的物品放置不宜过紧。 ②必须将冷空气充分排除，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭菌效果（非自动灭菌器）。 ③灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。 ④ 装培养基的试管或瓶子的棉塞上，应包油纸或牛皮纸，以防冷凝水入内。⑤为了确保灭菌效果，应定期检查灭菌效果，常用的方法是将硫磺粉末（熔点为115℃）或安息香酸（熔点为120℃）置于试管内，然后进行灭菌试验。如上述物质熔化，则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求，灭菌的效果是可靠的。也可将检测灭菌器效果的胶纸（其上有温度敏感指示剂）贴于待灭菌的物品外包装上，如胶纸上指示剂变色，亦说明灭菌效果是可靠的。
3、生物安全柜的使用和维护中注意的事项？
答：（1）严格按照操作规程开启、使用和关闭；
（2）清洁与消毒：化学消毒剂（75%酒精、0、2过氧乙酸、含氯消
毒剂等）、紫外线消毒等；
（3）定期检测验证：气流速度、负压/换气次数、紫外线照度等；
（4）HEPA过滤器的监测与更换：定期对过滤器进行监测，当过滤
器的阻力增大导致蝶阀开至90度，需要更换高效过滤器；
（5）生物安全柜的检测、过滤器的更换等维修工作应由具有资质的专业人员负责；在使用过程中出现故障应及时报告，经维修并检验合格后方可使用。
4、使用移液器时主要有哪些注意事项？
（1）应根据试验需要选择所需量程范围内的移液器，移液量不能超出该移液器标定的移液范围。
（2）安装吸头时用力不能过猛，不能反复撞击吸头来上紧。应轻轻用力下压，稍作旋转即可。
（3）吸头浸入液面角度应控制在倾斜20度之内，保持竖直为佳。吸头浸入液体深度要合适，不宜过深，吸液过程中浸入深度尽量保持不变。
（4）吸有液体的移液器不应平放。
（5）移液器使用完毕后不可直接搁置，务必将刻度调至量程范围内的最大值，并垂直置于加样器架上。
（6）移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体。
5、电子天平的使用维护应注意哪些事项？
答：（1）调节水平、防止振动。
（2）称量时应从侧门取放物质，读数前应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。前门仅在检修或清除残留物质时使用。称量结束应及时除去称量瓶（纸），作好清洁工作，然后关上侧门，切断电源，并做好使用情况登记。
（3）天平应保持清洁，谨防灰尘等物钻入，每次称量完毕，应及时清洁。天平不应该放在有腐蚀性气体和空气流动大的环境中。
（4）根据天平的使用程度，应作周期性的检查校准。
（5）在搬动天平、安装和拆卸外围设备前，一定要关掉显示开关，拨掉电源插头，以免损坏天平。
（6）经常使用天平时，应使天平连续通电以减少预热时间，使天平处于相对稳定状态。如果天平长期不用，应关闭电源。
（7）称量易挥发和具有腐蚀性的物品时，要盛放在密闭的容器内，以免腐蚀和损坏电子天平。
（8）操作天平不可过载使用，以免损坏天平。
（9）放入天平的物体温度不宜太高以免损坏仪器，一般温度≤70℃。
6、试述在生物安全柜内进行实验操作的主要注意事项？
答：（1）缓慢移动原则：为了避免影响正常的风路状态，柜内操作时手应该尽量平缓移动
（2）物品平行摆放原则：为了避免物品和物品之间的交*污染现象产生，在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开，避免回风过程中造成交交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路
（3）避免震动原则：柜内尽量避免震动仪器（例如离心机、旋涡振荡器等）的使用，因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落，导致操作室内部洁净度降低，同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染
（4）不同样品柜内移动原则：柜内两种及以上物品需要移动时，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则，避免污染性高的物品在移动过程中产生对柜体内部的大面积污染
（5）明火使用原则：柜内尽量不要使用明火。因为在明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域，这些高温杂质会损伤滤膜。无法避免一定需要使用的时候，宜使用低火苗的本生灯。
（四）兽医实验室基本技术（称量、配液、灭菌、消毒）
A、选择题
1、杀灭一般病原微生物煮沸时间为 。（ A ）
A.1小时 B.30分钟 C.2小时
2、用于制做标本的福尔马林浓度是 。（ A ）
A.10% B.5% C.20%
3、通常用的消毒酒精浓度为 。（ C ）
A.70% B.95% C.75%
4、配制4单位禽流感抗原64毫升需要原抗原 （已知原抗原效价为1：256）。（ B ）
A.10毫升 B.1毫升 C. 0.1毫升
5、要制备鸡红细胞悬液，用于禽流感抗体HI试验，对提供红细胞的鸡质量和数量要求是 。（ A ）
A.SPF公鸡或无禽流感和新城疫等抗体的健康公鸡至少3只。
B.无禽流感抗体的健康公鸡3只。
6、用95%酒精配制75%酒精1000毫升需加水 。（ B ）
A.733毫升 B.211毫升 C.287、5毫升
7、用人工紫外线照射进行消毒，其时间不能少于 。（ B ）
A.10分钟 B.30分钟 C.3小时
8、甲醛熏蒸消毒方法规定甲醛与高锰酸钾的比例为 。（ A ）
A. 2：1 B. 1：2 C. 3：1
B、判断题
1、新购入玻璃器皿可以直接使用。(×)
2、用后的载玻片、盖玻片可浸泡于5%石炭酸中48小时。（√）
3、普通玻璃器皿在用前可以干热消毒法（160-180℃、1-2小时）消毒。（√）
4、2％的煤酚皂溶液用于手部消毒。（√）
5、1％的煤酚皂溶液用于工作台的消毒。(×)
6、在100℃水中煮沸3-5分钟可以杀死一切传染病病原体。(×)
7、金属器材、玻璃器皿可用压力蒸汽和干热灭菌的方法，适用于耐高温、高湿的器械和物品的灭菌。（√）
8、一次性帽子、口罩、手套、工作服、防护服等使用后应放入污物袋内集中销毁。（√）
9、橡胶手套、吸液球等橡胶制品受污染后可用0、5％-1、0％肥皂液煮沸15-30分钟，然后清水洗涤沥干后，121℃，15分钟高压灭菌处理。（√）
10、棉织工作服、帽子、口罩等纺织品一般放入专用的污物袋中，用70℃以上的热水加洗涤剂洗涤。有明显污染时，随时喷洒消毒剂消毒或放入专用的污物袋中，121℃，15分钟高压灭菌处理。（√）
11、使用过的玻璃吸管、试管、离心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等玻璃器皿应立即浸入0、5％过氧乙酸或有效氯为2000mg/L的含氯消毒剂中1小时以上，消毒后用超声波清洗的方法洗净沥干，使用前再进行高压灭菌处理。（√）
12、金属注射器不能用高压消毒或干热消毒。（ √ ）
C、简答题及问答题
1、实验室常用的消毒灭菌方法有哪些？（回答出3种即可）
答：物理法：火焰、煮沸、高压蒸汽、紫外线、过滤等。化学法：强酸、强碱、消毒剂。
2、玻璃器材有哪些常用灭菌法？
答：有干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）。
3、高压蒸汽灭菌液体时应注意哪些事项？
答：灭菌液体时，应将液体灌装在硬质的耐热玻璃瓶中，建议盛液量不超过容器容积的3/4，瓶口应选用棉花纱塞，切勿使用未打孔的橡胶塞或软木塞。在灭菌结束时，不准立即释放蒸汽，必须待压力表指针回归零位方可排放余汽，否则会导致液体沸腾使玻璃容器爆裂的事故。监测灭菌效果
4、简述培养基制作的一般要求。
答：（1）培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净，称取的份量务必准确。
（2）培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7、2～7、6，呈弱碱性。
（3）培养基的灭菌时间和温度，应按照各种培养基的规定进行，以保证灭菌效果及不损失培养基的必需营养成分。培养基经灭菌后，必须置37℃温箱中培养24小时，无菌生长者方可应用。
（4）所用器皿须洁净，忌用铁或钢质器皿，要求没有抑制细菌生长的物质存在。
（5）制成的培养基应该是透明的，以便观察细菌生长性状以及其他代谢活动所产生的变化。
5、简述细菌培养基制作的一般过程。
答：不同的培养基其制备方法也不同，一般包括以下步骤：
（1）准确称量试剂 根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。
（2）校正pH值 将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6、8～8、0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
（3）过滤 将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。
（4）分装 将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。
（5）灭菌 培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。
6、简述甲醛熏蒸消毒方法及注意事项。
答：（1）按照每立方米甲醛（40%）10毫升、高锰酸钾5克计算用量。将甲醛倒入盛有高锰酸钾的容器内。不同情况用量有所不同，但比例为2：1。
（2）盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锰酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。
（3）房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。
（4）容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锰酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。
（5）消毒时间一般为20-30分钟。
（6）消毒后要打开门窗通风换气。
（五）采样及样品制备技术
A、 选择题
1、接种禽流感灭活疫苗后，进行免疫效果监测时，在家禽免疫后 天，随机采集家禽血清样品30份。（C）
A.7天 B.14天 C.21天 D.35天
2、下面不能作为样品保存液的是 。（B）
A阿氏液 B 蒸馏水 C PBS液 D 30%甘油盐水缓冲液
3、牛海绵状脑病病原检测时采取下面哪种组织（A）
A. 脑 B. 肺 C. 全血 D. 肝
4、液态样品包装时不可超过容量的 。（C）
A. 50% B. 60% C. 80% D. 90%
5、采集血液样品用于动物血清学诊断时，采集双份血清监测比较抗体效价变化的，第一份血清采于病的初期，采集第二份血清应间隔 。（B）
A. 1-2周 B. 2-3周 C. 3-4周 D. 4-5周
6、死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后 小时。（D）
A. 2 B. 24 C. 12 D. 6
B、 判断题
1、采取供病理切片的组织病料时，应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取。（√）
2、制作组织脏器材料抹片时，先用镊子夹持局部，然后以灭菌或洁净剪刀取一小块，夹出后将其新鲜切面在玻片上压印或涂成一薄片。（√）
3、欲作病毒分离的材料，最好在冷藏的条件下（装有冰块或干冰的冷藏瓶），立刻送到实验室。（√）
4、急性死亡的家畜解剖之前，必须用显微镜检查其血液涂片中是否有炭疽杆菌存在。（√）
5、采集乳汁，一定要采集最初所挤的3－4股奶。（×）
6、怀疑发生口蹄疫时，水疱液必须采自未破的水疱，不加任何保存液。（√）
7、若检查消化系统寄生虫，需采取5-19g新鲜粪便。（√）
8、作组织学检查的样品不能冷冻。（√）
9、血液染色涂片一般用革兰氏染色。（×）
10、脏器抹片要作姬姆萨染色，可用甲醇固定。（√）
11、检测狂犬病病原时应采取唾液和脑。（√）
12、实质脏器在短时间不能送到实验室的，如为供细菌检查的，应放于灭菌流动石蜡或灭菌的30%甘油生理盐水中保存。（√）
13、进行血清学检验的乳汁可以冻结、加热或强烈震动。（×）
14、用于寄生虫检验的粪便样品以冷藏不冻结状态保存。（√）
15、采集病料做病原菌检验时，应在药物未治疗前采取。（√）
16、血液样品在采集前一般禁食8小时。（√）
C、 简答及问答题
1、采集血清用于实验室检测，对于血清质量有何要求？
答：血清应未腐败（新鲜）、无溶血、清亮透明（无明显沉淀物）、未凝固或未完全凝固、体积足够检测与样品备份。（应回答其中3点以上）
2、简述采集活体牛、羊O-P液（咽食道分泌物）的技术要求？
答：牛、羊O-P液的采集技术要求：被检动物在采样前禁食（可饮少量水）12小时；采样探杯在使用前经装有0、2%柠檬酸或1%-2%氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5分钟，再用与动物体温一致的清水冲洗探杯后使用，每采完一头动物，探杯要重复进行消毒并充分清洗。采样时动物应站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10-15厘米处，轻轻来回抽动2-3次，然后将探杯拉出。如采集的0 -P液被反当胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。取出8-10毫升O-P液，倒入含有等量细胞培养液或磷酸缓冲液的灭菌广口瓶中，充分摇匀加盖封口，放冷藏箱及时送检，未能及时送检应置于-30℃。
3、采样的一般原则
答：（1）凡是血液凝固不良，鼻孔流血的病死动物，应耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病、死的动物严禁剖检。
（2）采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官做到无菌，避免外源性的污染，最后采集污染的组织，如胃肠组织、粪便等。
（3）采取的病料必须有代表性，采取的组织器官应病变部位明显。采取病料时应根据不同的疫病或检验目的，采其相应血样、活体组织、脏器、肠内容物、分泌物、排泄物或其他材料。病因不明时，应系统采集病料。
（4）病料应在使用治疗药物前采取，用药后会影响病料中微生物的检出。死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后6 h(尤其在夏季)，否则，尸体腐败，难以采到合格的病料。
（5）血液样品在采集前一般禁食8 h，采集血样时，应根据采样对象、检验目的及所需血量确定采血方法与采血部位。
（6）采样时还应考虑动物福利，并做好个人防护，预防人畜共患病感染。
（7）防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和废弃物的处理。
4、采样前应当准备好哪些用品、材料和试剂？
答：1、器械：采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头等；样品容器包括小瓶、玻片、平皿、离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等；试管架、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋等。 2、采样记录用品：不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、采样登记表等。3、保存液：甘油盐水缓冲液、肉汤、PBS液、双抗、抗凝剂等。4、防护用品 。
5、在口蹄疫诊断中，应采集哪些组织样品？
答：用于病毒分离、鉴定的样品以发病动物(牛、羊或猪)未破裂的舌面或蹄部、鼻镜、乳头等部位的水泡皮和水泡液最好。对临床健康但怀疑带毒的动物可在屠宰后采集组织样品如淋巴结、脊髓、肌肉等作为检测材料。
6、高致病性禽流感病原学检测采集什么(部位)样品？
答：活禽病料应包括喉气管拭子和泄殖腔拭子，最好是采集喉气管拭子。小珍禽用拭子取样易造成损伤，可采集新鲜粪便。死禽采集气管、脾、肺、肝、肾和脑等组织样品。
7、进行疑似高致病性禽流感样品采集时，应准备哪些器具和试剂？
答：（1）采样器具：解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头、无菌棉拭子、动物检疫器械箱等。
（2）样品容器：西林瓶、平皿、离心管、易封口样品袋、塑料包装袋等。
（3）运输容器：试管架、塑料盒（离心管专用）、铝饭盒、瓶塞、胶布、封口膜、封条、冰袋。
（4）记录用具：不干胶标签、签字笔、圆珠笔、记号笔、采样单、记录本等。
（5）防护材料：一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶鞋等。
8、当疑似有新城疫发生时，应从发病禽或死亡禽采集哪些病料进行检测？病料如何保存？
答：发病禽：采集气管拭子和泄殖腔拭子（或粪便）；
死亡禽：以脑为主；也可采集脾、肺、气囊等组织。
采集的样品应尽快处理，如果没有处理条件，样品可在4℃ 保存4天；若超过4天，需置-20℃保存。
9、动物结核病进行细菌性检查时，可采集哪些样品？
答：死畜可采淋巴结及其他组织。活畜可采其痰、乳、精液、子宫分泌物、尿和粪便。
10、如何采集畜禽肠管及肠内容物样品？
答：肠管的采集：用线将病变明显处（约5-10厘米）的两端双结扎，从两端剪断，置于灭菌容器中，冷藏送检。
肠内容物样品的采集：选择肠道病变明显部位，取内容物，用灭菌的生理盐水轻轻冲洗；也可烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取肠内容物，放入盛有灭菌的30%甘油盐水中。
11、采集全血时的注意事项有哪些？
答：血样品必须是脱纤血或是抗凝血。抗凝剂可选肝素或 EDTA，枸橼酸钠对病毒有微毒性，一般不宜采用。以冷藏状态立即送实验室。必要时，可在血中按每毫升加入青霉素和链霉素各 500-1000 IU，以抑制血源性或采血中污染的细菌。
12、对牛、马、羊、猪、家禽的采血部位各有哪些？
答：牛、马、羊从颈静脉、尾静脉、乳房静脉采血；猪从前腔静脉、股静脉、桡头静脉、隐静脉采血，用量少时也可以从耳静脉抽取；家禽从翅膀静脉或心脏用注射器抽取血液。
13、进行蓝耳病的RT-PCR检测可采取哪些样品？
答：肺、扁桃体、淋巴结和脾等组织样品；新鲜精液或冷冻精液；血清、血浆、全血或细胞培养物。
（六）检测技术基础
A选择题
1．下列 不常用作抗凝剂。（B）
A. 柠檬酸钠 B.硫酸钠
C.肝素 D.乙二胺四乙酸
2．ELISA试验中常用底物 最佳？ (C)
A. OPD B. OT
C. TMB D. ABTS
3．斑点-ELISA是指ELISA实验在 上进行，抗原（体）点样呈斑点，反应结果观察斑点的呈色。（A）
A. 硝酸纤维膜 B.玻璃板
C.琼脂 D. 96孔ELISA板
4．分离新城疫病毒时，一般可通过接种 日龄的鸡胚尿囊腔来获取。（B）
A．5-7 B. 9-11
C. 13-15 D. 15-17
5．下列 方法是实验室检查微量抗原或抗体的最敏感的方法？（D）
A.直接凝集 B.单向琼脂扩散
C.金标试纸条 D.ELISA
6．下列哪种方式不适用病毒培养 ? （D）
A.细胞培养 B.组织培养
C.动物接种 D.培养基培养
7、目前实验室禽流感病毒血清学检测、诊断最常用方法是 。(C)
A.中和试验 B.补体结合试验
C.血凝和血凝抑制试验 D. ELISA试验
8、一般保存病毒毒种的最佳温度是 。(D)
A. 37℃ B. 4℃
C. -20℃ D. -70℃
9、 布病试管凝集试验中出现前带现象的原因是 。（B）
A.颗粒性抗原过多 B.血清中抗体过多
C.颗粒性抗原过少 D.血清中抗体过少
10、PCR反应分 三个步骤？（D）
A.变性、解链、退火 B.变性、退火、复性
C.退火、复性、延伸 D.变性、退火、延伸
11、 ELISA有 三种基本反应类型。（A）
A.间接ELISA、夹心ELISA、竞争ELISA
B.直接ELISA、阻断ELISA、竞争ELISA
C.夹心ELISA、竞争ELISA、阻断ELISA
D.捕捉ELISA、直接ELISA、阻断ELISA
B判断题
1、口蹄疫病毒3ABC非结构蛋白抗体检测方法用于区分感染与免疫动物。动物在感染FMDV后既产生结构蛋白抗体，也产生非结构蛋白抗体，而接种纯化灭活病毒后，几乎只产生结构蛋白抗体。（√）
2、实验室细菌分离、鉴定常用的简单染色法有美蓝染色法、瑞氏染色法、姬姆萨氏染色法、革兰氏染色法。（×）
3、布病试管凝集试验中出现前带现象的原因是由于血清中存在不完全抗体（也有人认为是IgA）竞争抗原而造成抗原抗体比例失调。（√）
4、凡能使红细胞完全凝集（100%凝集，++++）的抗原最高稀释倍数代表1个血凝单位（HAU）。（√）
5、对口蹄疫疫苗多次重复免疫的动物进行非结构蛋白(NSP)抗体检测，出现阳性反应很可能是由于疫苗的纯度问题；由于疫苗制备时痕量NSP的存在，可导致阳性反应。（√）
6、PCR聚合酶链式反应体系的基本成分由耐热的DNA聚合酶、引物、 dNTP、 Mg2+、缓冲液、模板组成。（√）
7、评价疫苗保护率可以通过免疫抗体监测，一般认为疫苗的保护率达到50%以上，认为该疫苗的质量较好，可以有效抵御疾病的侵袭。（×）
8、在对未免疫动物种群进行流行病学调查时，抗体水平应该作为主要的感染依据。（√）
9、提取病原核酸，经氯仿去除蛋白质时，离心后上清应小心操作，靠近沉淀的那层膜，一定不要吸取，以免蛋白质污染。（√）
10、PCR引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。（√）
11、尿素酶试验原理是有些细菌能产生尿酶分解尿素产生氨，使培养基呈碱性，从而通过酚红指示剂变为红色。（√）
12、正向间接血凝试验是将可溶性抗原致敏于红细胞表面，用以检测相应抗体；反向间接血凝试验是将抗体致敏于红细胞表面，用以检测相应抗原。（√）
13、分子生物学实验室布局应该各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。 （√）
14、革兰氏染色的关键步骤是酒精脱色。（ √ ）
15、培养细菌时，培养基中的营养越多细菌生长得越快。（ × ）
16、链球菌在自然界中广泛存在，所以猪链球菌的培养要求不高，一般培养基都能生长的十分茂盛。（ × ）
17、沙门氏菌在SS培养基上菌落为无色，而大肠杆菌为红色。（ √ ）
18、将获得的单个空斑制作悬液，梯度稀释后再作空斑，最终可获得只含一个病毒颗粒及其子代的空斑，这就是病毒克隆。（ √ ）
C简答题
1、简述实验室检测的目的与意义？
答：（1）确诊疾病。
（2）检测、监测和流行病学调查。
（3）检测疫苗免疫效果和母源抗体。
（4）疾病检测净化。
2、什么是PCR，有什么特点，扩增反应有哪几个步骤？
答：PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤，变性、退火（复性）、延伸3个步骤。
3、什么叫ELISA，ELISA有哪三种基本反应类型？
答：ELISA是酶联免疫吸附试验，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。基本反应类型有间接ELISA、（双抗体）夹心ELISA(或捕捉ELISA)、竞争ELISA(或阻断ELISA)。
4、正向间接血凝试验和反向间接血凝试验有何不同？
答：正向间接血凝试验是将可溶性抗原致敏于红细胞表面，用以检测相应抗体；反向间接血凝试验是将抗体致敏于红细胞表面，用以检测相应抗原。
5、简述禽流感HI试验中非特异反应产生的原因以及消除方法？
答：禽流感HI试验中非特异反应产生的原因是血清中含有非特异性血凝抑制因子，其消除方法包括：（1）受体裂解酶（RDE）处理法；（2）高碘酸盐-胰酶处理法；（3）对于水禽和野禽血清，可采用与高浓度（5％～10％）鸡红细胞混合吸附法；（4）同种动物红细胞处理法。
6、PCR检测过程的污染控制措施有哪些？（请回答2种以上）
答： （1）对实验室进行严格的分区（包括配液区、提取区、扩增区和产物分析区的分区；也包括DNA和RNA提取的分区），以及严格控制物流的方向。例如：各个区的东西不交叉使用（包括白大褂、帽子、手套、板架、移液器、提取设备、提取试剂等）；
（2）严格控制环境：工作过程中尽量防止扩增物的扩散；垃圾等污染物要及时清理；用紫外线消除长片段污染物；实验空隙多通风，降低单位空间中的污染物；实验中严格控制层流；实验中使用帽子和口罩。
（3）设立质控，实验过程的阴阳性对照是查找污染源的很好方法；
（4）分装试剂，大包装的试剂应当分成小包装后使用；
（5）UDG酶的使用，可以有效控制污染物；
（6）其他有效措施。
7、抽提RNA时如何防止降解？（请回答2种以上）
答：（1）保持低温；
（2）尽量减少抽提时间，减少暴露在空气中的时间；
（3）使用DEPC水处理的耗材和试剂；
（4）使用RNA酶抑制剂；
（5）处理组织时，尽量灭活内源的RNA酶；
（6）使用正确的储存条件；
（7）操作过程中带口罩、手套、帽子。
8、请简述口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测方法的用途和原理？
答：口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测方法检测针对病毒衣壳蛋白的抗体，可用于不同动物免疫效果的评估工作。
其原理是先将待检血清与一定量抗原结合，占据抗原位点，然后再用已知量的阳性血清与抗原结合，最后通过检测抗原结合阳性血清的多少反推出待检血清中特异性抗体的数量，由于该试验使用酶标抗体不受待检血清来源动物种类的影响，所以适应于各种动物（猪、牛、羊）血清的检测。
9、简述禽流感HI抗体检测方法的用途和原理
答：（1）禽流感HI抗体检测方法的用途主要分两方面：
a、应用标准病毒悬液测定血清中的相应抗体水平
b、应用特异性的抗体鉴定新分离的病毒。
（2）血凝原理因病毒而有所不同，流感病毒的血凝作用是病毒囊膜上的血凝素与红细胞表面的受体糖蛋白相互吸附而发生的。当病毒的悬液中先加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接接触。这时的红细胞凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制（HI）反应，也称为血凝抑制反应。（引自农业部兽医局主办20##年全国动物防疫标准培训班材料）
10、 口蹄疫O型正向血凝试验的试验原理是什么？
抗原与其相对应的抗体相遇，在一定条件下会形成抗原抗体复合物，但这种复合物的分子团很小，肉眼看不见。若将抗原吸附（致敏）在经过特殊处理的红细胞表面，只需要少量抗原就能大大提高抗原和抗体的反应灵敏性。这种经过口蹄疫纯化抗原致敏的红细胞与口蹄疫抗体相遇，红细胞便出现清晰可见的凝集现象。
11、简述细菌鉴定的基本方法（从哪几个方面鉴定细菌）？
答：（1）菌落形态观察：观察菌落的大小、形状、隆起度、边缘、表面性状、颜色与透明度、质地和干湿度。
（2）染色镜检：按照革兰氏染色或瑞氏染色方法进行制片、初染、媒染、脱色、复染、干燥、镜检；干燥后，用油镜观察。
（3）常见的生化鉴定：如糖发酵试验、吲哚（靛基质）试验、淀粉水解试验、V-P试验、甲基红（M、R）试验、柠檬酸盐利用试验、硝酸盐还原试验、接触酶试验、氧化酶试验。
（4）血清学鉴定：检定抗原型或血清型。
（5）分子生物学鉴定：利用分子生物学手段进行细菌的种属、亚型的鉴定。
（6）动物试验：测定致病性或毒力。
D 问答题
1、间接ELISA方法的主要原理、试验步骤、结果判定方法（可举例说明）
(1)基本原理：把抗原在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品和酶标记物按一定程序反应形成复合物，并加入酶作用的底物;反应终止时，根据定性或定量分析有色产物的量来确定待检样品中的抗体的含量。
(2)试验步骤：抗原包被→洗涤封闭→加待检血清（同时设立阴阳性对照）→反应一定时间→洗涤→加酶标二抗→反应一定时间→洗涤→加底物溶液→反应一定时间→终止反应→判定结果
(3)结果判定：肉眼观察或仪器测定，可以阳性与阴性表示结果、以P/N比值表示结果、以终点滴度表示结果或以标准曲线进行定量测定。
2、请说出兽医实验室常用的血清学抗体检测的试验类型？（请回答4种以上）
答：琼脂扩散试验、凝集试验（或玻板凝集、试管凝集、间接血凝、乳胶凝集）、免疫荧光试验、免疫酶组织化学染色、免疫（过氧化物）酶（细胞）单层试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、斑点ELISA(Dot-ELISA)、补体结合试验、（血清）中和试验、免疫电泳、胶体金试纸等。
3、请说出兽医实验室常用的病原学检测试验类型（4种以上）？
答：病原（病毒、细菌、真菌或寄生虫）分离培养与鉴定、凝集试验（或玻板凝集、试管凝集、间接血凝、乳胶凝集）、（间接或直接）免疫荧光试验、免疫酶组织化学染色、免疫（过氧化物）酶（细胞）单层试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、斑点ELISA(Dot-ELISA)、中和试验、免疫电泳、胶体金试纸、核酸探针、(RT-)PCR、荧光PCR、NASBA、基因芯片、核苷酸序列测定（或分析）。
4、禽流感病毒和抗体的实验室检测方法分别有哪些？各种方法用途分别是什么？（各回答4种以上方法）
答：病毒检测方法有：
（1）病毒（鸡胚、细胞）分离培养与鉴定，用途为直接分离病毒；
（2）免疫荧光法，用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原；
（3）免疫酶法（包括免疫酶组织化学染色法和免疫过氧化物酶细胞单层试验），用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原；
（4）中和试验，用已知阳性血清检测病毒，金标准方法
（5）血凝/血凝抑制试验，用已知阳性血清检测病毒
（6）乳胶凝集试验，用已知阳性血清检测病毒抗原
（7）胶体金试纸，用已知阳性血清检测病毒抗原
（8）ELISA方法，用已知阳性血清检测病毒抗原
（9）RT-PCR（含荧光RT-PCR），用途为检测病毒核酸
（10）NASBA，用途为检测病毒核酸
（11）核酸探针，用途为检测病毒核酸
（12）基因芯片，检测病毒核酸
（13）核酸序列测定，解析病毒核酸
体检测方法
（1）琼脂扩散试验，检测病毒NP和M蛋白抗体
（2）血凝抑制试验，检测病毒HA蛋白抗体，可用于免疫效果评估
（3）神经氨酸酶抑制试验，检测病毒NA蛋白抗体
（4）中和试验，用已知病毒检测血清，金标准方法
（5）ELISA方法，用已知病毒抗原检测特异抗体
（6）胶体金试纸，用已知病毒抗原检测特异抗体
（7）乳胶凝集试验，用已知病毒抗原检测特异抗体
5、口蹄疫病毒和抗体的实验室检测方法分别有哪些？（各回答4种以上方法）
答：病毒检测方法有：
（1）病毒（乳鼠、细胞）分离培养与鉴定，用途为直接分离病毒；
（2）免疫荧光法，用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原；
（3）反向间接血凝法，用已知阳性血清检测病毒及分型；
（4）中和试验，用已知阳性血清检测病毒，金标准方法
（5）双抗体夹心ELISA方法，用已知阳性血清检测病毒抗原
（6）胶体金试纸，用已知阳性血清检测病毒抗原
（7）RT-PCR（含荧光RT-PCR），用途为检测病毒核酸
（8）核酸序列测定，解析病毒核酸
抗体检测方法有：
（1）琼脂扩散试验，检测病毒VIA抗原抗体
（2）正向血凝抑制试验，检测病毒衣壳蛋白抗体，可用于免疫效果评估
（3）液相阻断ELISA试验，检测病毒衣壳蛋白抗体，可用于免疫效果评估
（4）VP1合成肽间接ELISA检测方法，检测病毒VP1蛋白抗体，可用于免疫肽苗的家畜的免疫效果评估
（5）3ABC非结构蛋白抗体ELISA检测方法，检测病毒非结构蛋白蛋白抗体，用于感染与免疫动物的区分
（6）中和试验，用已知病毒检测血清，金标准方法
（7）胶体金试纸，用已知病毒抗原检测特异抗体
（8）补体结合试验，用已知病毒抗原检测特异抗体
6、猪瘟病毒和抗体的实验室检测方法有哪些？（各回答3种以上方法）
答：病毒检测方法有：
（1）病毒（细胞）分离培养与鉴定，用途为直接分离病毒；
（2）免疫荧光法（猪瘟荧光抗体染色法），用途为检测扁桃体等组织以及细胞培养物中病毒抗原；
（3）免疫酶法（包括免疫酶组织化学染色法和免疫过氧化物酶细胞单层试验），用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原；
（4）兔体交叉免疫试验，用以检测是否含有猪瘟病毒的定性依据
（4）中和试验，用已知阳性血清检测病毒，金标准方法
（5）ELISA方法（猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验），用已知阳性血清检测病毒抗原
（6）RT-PCR（含荧光RT-PCR），用途为检测病毒核酸
（7）核酸序列测定，解析病毒核酸
抗体检测方法有：
（1）正向间接血凝试验（IHA），用已知血凝抗原检测特异抗体
（2）中和试验，用已知病毒检测血清，金标准方法
（3）ELISA方法（猪瘟病毒抗原酶联免疫吸附试验），用已知病毒抗原检测特异抗体
（七）、各种疫病诊断技术标准
A、选择题
1、牛结核分枝杆菌在作细菌检查时，以 染色？( C )
A．美兰染色 B．革兰氏染色
C．妻-尼氏抗酸染色 D．瑞氏染色
2、禽流感抗原微量血凝试验，反应板孔内终体积为 微升，试验中所用PBS的PH值为（7.2），浓度为（0.01mol/L）。( C )
A. 25 B. 50
C. 75 D. 100
3、口蹄疫病毒感染相关（VIA）抗原琼脂凝胶免疫扩散试验,最长需要 小时进行结果终判。(D )
A.48 B.72
C.96 D.120
4、传染性法氏囊病微量中和试验，1： 判为可疑，隔周采血测定抗体仍可疑者判为（阴性）( B )
A.32 B.16
C.8 D.4
5、高致病性禽流感、鸡新城疫血凝和血凝抑制试验采用 %的红细胞。( D )
A. 0.25 B. 0.5
C. 0.75 D. 1
6、进行RT-PCR试验时，若提取的RNA需要长期保存，应在 ℃以下保存。( D )
A. -20 B. -40
C. -60 D. -70
7、判断牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应阳性依据：接种部位局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于 mm的为阳性。( D )
A. 1.0 B. 2.0
C. 3.0 D. 4.0
8、在进行禽流感血凝抑制(HI)试验(微量法)时，如果抗原液的血凝试验终点滴度为1：256，则配制A单位抗原时，稀释倍数为 。( A )
A．1：64 B．1：128
C．1：256 D．1：518
9、按以下禽流感琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验出现的结果，应判定被检血清为 血清。其中⑦为抗原，④为标准阳性血清，③为被检血清。( C )
A.非特异性反应； B.阳性；
C.弱阳性； D.弱阴性。
10、传染性囊病样品在接种鸡胚时经 部位接种，接种易感雏鸡时经 部位接种。（ D ）
A.尿囊腔；点眼 B.绒毛尿囊膜；肌肉注射
C.尿囊腔；皮下注射 D.绒毛尿囊膜；点眼、口服
11、以下 可以判定未免疫动物感染布鲁氏菌病？ ( D )
A.虎红平板凝集试验阳性；
B.全乳环状试验阳性；
C.虎红平板凝集试验阳性，但试管凝集试验阴性；
D.补体结合试验阳性
12、布鲁氏菌病的常规实验室检测方法是 。（ C ）
A.琼脂扩散实验
B. 间接血凝实验
C.平板凝集试验
D.变态反应
B、判断题
1、高致病性禽流感致病性测定可采用静脉接种致死指数测定法和致死比例测定法，应在高度生物安全性的实验室中进行。（√）
2、采用异硫氰酸胍提取病毒RNA时，第一次离心完毕后，上层水相中含有RNA。（√）
3、聚合酶链反应产物电泳时，加样的位置应该在靠近（负）极的方向。（√）
4、结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验，皮内注射后（48-72）小时观察反应结果，对于阴性牛和疑似反应牛，于注射后（96）小时和（120）小时再分别观察一次。（√）
5、PCR区应该分配液区、核酸提取区、扩增区和电泳区，流程顺序为单向。严禁器材和试剂倒流。（√）
6、10ml（10倍）浓缩洗涤液，应该加入（90）ml的蒸馏水或去离子水来稀释。（√）
7、进行ELISA试验时，试剂盒拿出冰箱后，应立即进行试验，以免试剂在室温中时间过长而失去其检测的客观性。（×）
8、不同批次的ELISA试剂盒，只要是同一种试剂盒，且试剂均在有效期内，试剂盒内的试剂是可以通用的。（×）
9、口蹄疫正向间接血凝，以呈现完全凝集“++++”的最大稀释倍数为该份血清的抗体效价。（×）
10、马鼻疽点眼反应中，点眼应在早晨进行。（√）
11、我国将炭疽列为一类动物疫病。（×）
12、新城疫病毒是DNA病毒。（×）
13、酶标仪应该即用即开，而不应该提前打开。（×）
14、在所有的ELISA反应中，孔中颜色深，表示样品为阳性；孔中颜色浅，表示样品为阴性。（×）
15、ELISA反应中，加入底物液后应该避光，时间越长，反应越充分，颜色对比越明显，因此应该放置稍长时间后加终止液。（×）
16、红细胞凝集试验所用0、1%鸡红细胞悬液采自1只健康成年鸡血液（×）
17、红细胞凝集试验用于监测抗原的HA效价，红细胞凝集抑制试验用于检测被检血清HI抗体效价。（√）
18、琼脂扩散试验结果判定，阳性对照与被检血清孔之间出现沉淀线，其末端不与阳性沉淀线相连，也可判定为阳性反应。（×）
19、琼脂扩散试验中，有的受检样品产生2条沉淀线，其中一线与已知抗原（抗体）的沉淀线融合者仍判为阳性反应。（√）
20、做动物布病平板凝集实验时，混合完毕后，2－3分钟后判定结果。（√）
21、对一头牛做牛型提纯结核菌素皮内变态反应试验，皮厚差为4、2mm，判定为疑似结核病牛。（×）
22、在猪瘟的直接免疫荧光抗体试验中，在荧光显微镜视野中，见扁桃体隐窝上皮细胞浆内呈明亮的黄绿色荧光，判为猪瘟病毒感染阳性。（√）
23、猪瘟的临床诊断和病理学诊断可以作为确诊的根据。（×）
C、简答题
1、口蹄疫O型正向血凝试验设共哪有几个对照？
答：（1）阴性对照(血清效价＜24)
（2）阳性对照(血清抗体效价＞29)
（3）稀释液对照(无凝集)
2、亚Ⅰ型口蹄疫液相阻断ELISA试验设共哪有几个对照？
答：（1）病毒抗原对照(平均OD492nm值在1、0～2、0范围内)
（2）阳性对照血清(抗体效价在1：1024±1滴度)
（3）阴性对照血清(抗体效价＜1：8)
3、按照《高致病性禽流感防治技术规范》，简述血凝抑制试验成立条件及的判定标准。
答：（1）只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。
（2）HI价小于或等于2 log2判定HI试验阴性;HI价等于3 log2为可疑，需重复试验;HI价大于或等于4log2为阳性。
4、新城疫病毒分离应采集哪些样品？
答：（1）从活禽采集样品应包括气管和泄殖腔拭子。雏禽可采用收集新鲜粪便代替。
（2）死禽以采集脑、肺脏、脾脏为主。
5、猪水泡病的血清学诊断方法有哪些？
答：（1）反向间接血凝试验；
（2）琼脂凝胶免疫扩散试验；
（3）病毒中和试验。
6、进行猪瘟直接免疫荧光抗体试验应采哪些猪组织？
答：扁桃体、淋巴结、脾脏、肾脏。
7、伪狂犬病毒检测的方法通常有哪些？
答：病毒分离鉴定、聚合酶链式反应、家兔接种试验。
8、伪狂犬病毒抗体检测的方法有哪些？
答：中和试验、酶联免疫吸附试验和胶乳凝集试验。
9、符合哪些特征可判为致病性猪链球菌2型阳性？
答：符合猪链球菌2型特性，且主要毒力基因(mrp,ef,orf2,sly)全部或之一PCR检测阳性。
10、马传贫实验室诊断方法主要有哪些？
答：（1） 马传贫琼脂扩散试验(AGID)
（2） 马传贫酶联免疫吸附试验(ELISA)
（3） 马传贫病原分离鉴定
11、国标中规定的新城疫诊断方法有哪些？
答：临床诊断、病毒分离与鉴定、血凝试验、血凝抑制试验、反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。
12、按国标规定，新城疫RT-PCR检测呈阳性后，还应对RT-PCR产物进行序列测定和分析，才能判定为强毒，而非疫苗毒？
答：对毒株的F基因编码的氨基酸序列进行分析，分离毒株F1蛋白N末端117位为苯丙氨酸，F2蛋白C末端有“多个碱性氨基酸残基”。
13、布鲁氏菌病血清学监测中，筛选检测、复核各采用什么试验方法？
答：筛选检测用琥红平板凝集试验；阳性样品用试管凝集反应或补体结合试验进行复核。
14、血吸虫病用什么试验方法进行监测？
答：用间接血凝方法或Dot-ELISA方法检测，结果为阳性的，用粪检法复检，仍为阳性的确诊为阳性畜。
15、狂犬病病毒和抗体常用什么试验方法进行监测？
答：（1）病毒检测：脑组织以直接免疫荧光或RT-PCR进行检测。（2）抗体检测：ELISA方法、免疫荧光灶抑制试验。
16、J亚群鸡白血病有哪些实验室诊断方法？
答：（1）病原分离鉴定；
（2）组织病理学诊断；
（3）酶联免疫吸附试验。
17、高致病性猪蓝耳病的病原监测采用什么试验方法？其与经典猪蓝耳病鉴别的原理是什么？
答：RT-PCR或荧光定量PCR。针对猪蓝耳病病毒的NSP2基因的特征性缺失进行鉴别检测。
18、猪瘟的监测方法有哪些？
答：免疫抗体监测：方法：正向间接血凝试验。（2）判定：免疫21天抗体效价≥25为免疫合格。
原学检测:用荧光免疫抗体或RT-PCR或ELISA方法，对流产、死胎及以高热为特征的死亡病例进行病原学检测。
19、鸡新城疫的监测方法有哪些？判定标准是怎样的？
答：免疫抗体监测方法、判定标准（1）方法：血凝抑制试验。（2）判定：免疫21天抗体效价≥25为免疫合格。
用RT-PCR鉴定方法进行病原学检测。病毒检测：RT-PCR方法结合核酸序列测定。抗体检测：ELISA方法。
20、猪蓝耳病的实验室诊断方法有哪些？
答：（1）病毒分离与鉴定；
（2）免疫过氧化物酶单层试验（IPMA）；
（3）间接免疫荧光试验（IFA）；
（4）间接ELISA；
（5）RT-PCR及荧光RT-PCR。
D、问答题
1、按照GB/T 18936-2003高致病性禽流感诊断技术，简述禽流感病毒的鉴定步骤。
答：（1）A型流感病毒的型特异性鉴定:用具有血凝活性鸡胚的绒毛尿囊膜(CAM)制成抗原，与A型禽流感病毒标准阳性血清进行AGID试验，检测样品中是否含有A型流感病毒。
（2）血凝素亚型鉴定:用禽流感病毒15种血凝素(H1-H15)亚型分型血清，采用HA-Hl试验方法，对样品进行病毒亚型鉴定。
2、请说出出下列英文简称的含义：HA、HI、IHA、ELISA、PCR、RT-PCR 、AGIP 、CF、VN、HAU、ICPI、IVPI、TCID50。
答：HA:血凝、HI：血凝抑制、IHA：间接血凝抑制、ELISA：酶联免疫吸附试验、CF:补体结合试验、VN:病毒中和试验、HAU：血凝单位、PCR：聚合酶链反应、RT-PCR：反转录-聚合酶链反应、AGIP：琼脂凝胶免疫扩散试验、ICPI：脑内接种致病指数、IVPI：静脉接种致病指数、TCID50：半数组织培养感染量。
3、牛、羊、猪口蹄疫感染情况、不同亚型口蹄疫免疫抗体水平的监测方法有哪些？如何对结果进行判定？
答：(1)免疫抗体检测方法及判定标准：（1）方法：O型口蹄疫用正向间接血凝试验或液相阻断ELISA，亚洲Ⅰ型口蹄疫用液相阻断ELISA。（2）判定：正向间接血凝试验，免疫21天抗体效价≥25为免疫合格；液相阻断ELISA，免疫21天抗体效价≥26为免疫合格。
(2)牛、羊口蹄疫感染情况使用非结构蛋白抗体ELISA方法检测。检测结果阳性的，采集其食道－咽部分泌物（O－P液）用RT－PCR方法检测，若检测结果为阴性应间隔15天再采样检测一次，RT-PCR检测阳性的判定为阳性畜。
(3)对猪的检测：从屠宰场采集猪颌下淋巴结用RT－PCR方法进行检测，结果为阳性的判定为阳性猪，对阳性猪进行流行病学调查。
4、布鲁氏菌病的试管凝集试验，牛、羊、猪各种家畜血清样品判断为阳性的标准是什么？判为可疑后，如何复检、判定。
答：（1）牛、马、鹿和骆驼1:100血清稀释，猪、山羊、绵羊和狗1:50血清稀释，出现“++”以上凝集现象时，受检血清判定为阳性。
（2）牛、马、鹿、骆驼1:50血清稀释，猪、山羊、绵羊、狗1:25血清稀释，出现“++”以上凝集现象时，受检血清判定为可疑反应。
（3）可疑反应家畜经3周-4周后重检，如果仍为可疑，该牛、羊判为阳性。猪和马经重检仍保持可疑水平，而农场的牲畜没有临床症状和大批阳性患畜出现，该畜被判为阴性。
5、如何进行鸡传染性支气管炎的综合判定？
答：对于未接种IBV疫苗，经任何一种方法检测呈阳性结果时，都可判定为IBV感染鸡群。对于接种过IBV疫苗并在疫苗免疫期内的鸡或已超过免疫期的鸡，当病毒分离鉴定试验为阳性时，可判定为IBV感染鸡；当仅血清学试验呈阳性时，应结合病史和疫苗接种史，进行综合判定。
6、高致病性禽流感的病原学诊断指标有哪些？
答：（1）反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测，结果H5 或H7 亚型禽流感阳性；
（2）通用荧光反转录-聚合酶链反应（荧光RT-PCR）检测阳性；
（3）神经氨酸酶抑制（NI）试验阳性；
（4）静脉内接种致病指数（IVPI）大于1、2或用0、2mL 1:10无菌感染流感病毒的鸡胚尿囊液,经静脉注射种8只4-8周龄的易感鸡,在接种后10天内,能致6-7只或8只鸡死亡,即死亡率≥75%;
（5）对血凝素基因裂解位点的氨基酸序列测定结果与高致病性禽流感分离株基因序列相符。
7、如何判定口蹄疫确诊病例？
答：（1）疑似口蹄疫病例，以下病原学检测方法任何一项阳性，可判定为确诊口蹄疫病例：
①间接夹心酶联免疫吸附试验，检测阳性（ELISA OIE 标准方法 ）；
②RT-PCR试验，检测阳性（采用国家确认的方法）；
③反向间接血凝试验（RIHA），检测阳性；
④病毒分离，鉴定阳性。
（2）疑似口蹄疫病例，在不能获得病原学检测样本的情况下，未免疫家畜血清抗体检测阳性或免疫家畜非结构蛋白抗体ELISA检测阳性，可判定为确诊口蹄疫病例。
①中和试验，抗体阳性；
②液相阻断酶联免疫吸附试验，抗体阳性；
③非结构蛋白ELISA检测感染抗体阳性；
④正向间接血凝试验（IHA），抗体阳性。
三、疫苗的使用和储运知识
1、什么叫疫苗、菌苗？
答：疫苗是指将微生物毒力致弱或灭活后，失去原有致病性而仍有良好抗原性，用于预防传染病的一大类生物制品，一般将病毒制成的生物制品称疫苗，以细菌制成的生物制品叫菌苗。
2、一般商品猪猪瘟疫苗免疫两次，是在什么时间？
答：20日龄和60日龄。
3、兽用生物制品包括哪些？
答：包括：疫苗、抗血清和抗毒素、诊断制品、血液生物制品、抗生素、微生态制剂。
4、弱毒疫苗应怎样保存、运输？
答：弱毒疫苗要求在－15℃以下保存、运输。运输必须加冰低温运输，长途运输则需用冷藏车或需用铁皮保温运输箱，尤其是夏季运输必须采取降温措施。
5、灭活疫苗应怎样保存、运输？
答：灭活疫苗一般要求储藏于0~8℃暗处，在运输过程中要防止冻结，冬季运输应采取保暖措施，并要求轻装轻卸，避免破损。
6、疫苗保管记录登记哪些内容？
答：疫苗保管记录登记应注明入库时间、疫苗品名、生产厂家、批号、规格、数量、失效期、保存温度及检查人等。
7、领取疫苗时应注意什么？
答：领取疫苗时要认真核对疫苗品名、生产厂家、规格、数量、批号及失效期，检查疫苗瓶是否破裂、瓶塞是否松动、内容物是否编制，注意真空检测是否合格，了解运输包装条件、储存情况等。
8、某种疫苗批号为081105-1，失效期为091105，各是什么含意？这种疫苗的有效期有多长？
答：081105-1表示该疫苗产品是20##年11月5日生产的第1批次疫苗。091105表示在疫苗瓶签所示保存条件下该疫苗于20##年11月5日失效，在此之前可正常使用。
此疫苗的有效期为1年。
9、村防疫员怎样处理当天未用完的疫苗？
答：村防疫员应当制定合理的使用计划以最大可能地使用疫苗，减少浪费。对当天未用完的疫苗，应废弃不用，并加以消毒处理。
10、注射疫苗是属于人工主动免疫吗？
答：是。
11、干扰素在兽用生物制品分类中应归哪一类？
答：血液生物制品。
12、猪传染性胸膜肺炎疫苗、猪伪狂犬疫苗、猪传染性萎缩性鼻炎疫苗、猪大肠杆菌三价苗这四种疫苗哪一种是病毒苗？
答：猪伪狂犬疫苗。
13、在氢氧化铝胶、明矾、蜂胶、白油这四种佐剂中，既能提高机体的特异性免疫力，又能提高机体的非特异性免疫力的佐剂是哪个？
答：蜂胶。
14、属于应用基因工程技术生产的新型疫苗有哪些？
答：有亚单位疫苗、活载体疫苗、基因缺失疫苗、合成肽疫苗、核酸疫苗等。
15、“禽流感鸡痘二联活疫苗”属于应用基因工程技术生产的新型疫苗中的哪一种？
答：活载体疫苗。
16、猪瘟超免的最佳时机是什么时间？
答：乳前1.5小时。
17、“猪支原体活疫苗”应采用下列那种注射方法效果最好？ 。
答：肺内注射。
18、“胃肠炎、流行性腹泻二联灭活苗” 采用哪种注射效果最佳。
答：后海穴注射。
19、活疫苗从冰箱取出进行免疫接种的正确程序是什么？
答：恢复至室温、配稀释液、保定并局部消毒、免疫注射、更换针头。
20、成鸡最合理的免疫注射方法是哪两种？
答：胸部肌肉注射、大腿内侧皮下注射。
21、使用新城疫活疫苗采用哪种免疫方法刺激机体粘膜免疫？
答：点眼、滴鼻。
22、确定鸡法氏囊疫苗首免时间应综合考虑哪些因素？
答：母源抗体、本场病史、疫苗毒力、周边疫情等。
23、养殖场免疫程序的制定应综合哪些因素？
答：本场病史、感染压力、母源抗体、动态监测、本场病原谱、疫苗特性、动物健康状况等。
24、疫苗通常在什么温度下保存？
答：在国内现有的条件下，国产冻干疫苗一般在-15℃以下条件下保存，进口冻干疫苗在2—8℃条件下保存，灭活苗在2—8℃条件下保存，马立克细胞结合苗液氮（－196℃）保存。
25、疫苗饮水免疫时用的稀释剂，能否使用自来水？
答：不能，因为自来水中的消毒剂会杀死疫苗病毒。
26、气雾免疫时用的稀释剂，是否能用生理盐水？
答：不可以，因为如果稀释水中含有盐，雾滴喷出后，由于水分蒸发，导致盐类浓度升高，会使疫苗灭活。
27、饮水或气雾免疫时加入0.1%的脱脂奶粉有什么作用？
答：保护疫苗的活性。
28、使用疫苗注意事项有哪些？
答：疫苗在使用前要仔细检查疫苗瓶口和胶盖封闭是否完好，疫苗是否过期。仔细阅读疫苗的说明书，使用方法、用量严格按瓶签规定要求，用规定的稀释液稀释或溶解，稀释后要尽量在4小时内用完，并按规定的使用途径及用量使用。
29、疫苗接种主要途径有哪些？
答：接种的途径有滴鼻、点眼、刺种、注射(皮下、肌肉)、饮水、气雾等。
30、免疫失败的原因主要是什么？
答：（1）疫苗质量不佳；
（2）疫苗稀释失误；
（3）接种途径选择不当；
（4）免疫接种时操作不当；
（5）多种疫苗之间的干扰作用；
（6）抗病毒药对弱毒疫苗的影响。
31、接种疫苗期间能否使用抗生素？
答：最好不应用抗生素，因为抗生素对细菌性活疫苗具有抑杀作用，对病毒性疫苗也有一定程度的影响。
32、接种鸡痘疫苗常什么方法？
答：用刺种法，用鸡痘刺种针或钢笔尖蘸取稀释的疫苗，于鸡翅膀内侧无血管处皮下刺种，在拔针时要防止将苗液带出一部分，使得接种剂量不足，导致个别鸡免疫不确实，散发鸡痘。
33、购买疫苗时应注意哪些事项？
答：购买疫苗时，应仔细检查疫苗瓶身是否有裂纹，瓶内是否有异物，瓶签所标明的生产日期和失效期。
34、疫苗在运输过程中应注意哪些事项？
答：疫苗在运输过程中，应保持冷链运输系统的正常工作，疫苗由冷库或温库进入冷藏车，被运往各地，或将疫苗装入具有冰块的保温箱内，由公路、铁路或飞机运往各地。
35、常用的注射方法有哪些？
答：皮下注射；皮内注射；肌肉注射；腹腔注射；静脉注射等。
36、《20##年国家动物疫病强制免疫计划》对规模场种鸡、蛋鸡高致病性禽流感的免疫程序是怎样规定的？
答：雏鸡7～14日龄时，用H5N1亚型禽流感灭活疫苗或禽流感－新城疫重组二联活疫苗（rL-H5）进行初免。在3～4周后可再进行一次加强免疫。开产前再用H5N1亚型禽流感灭活疫苗进行强化免疫，以后根据免疫抗体检测结果，每隔4～6个月用H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫一次。
37、《20##年国家动物疫病强制免疫计划》对规模场商品代肉鸡高致病性禽流感的免疫程序是怎样规定的？
答：7～14日龄时，用禽流感－新城疫重组二联活疫苗（rL－H5）初免；2周后，用禽流感－新城疫重组二联活疫苗（rL－H5）加强免疫一次。或者，7～14日龄时，用H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫一次。
38、《20##年国家动物疫病强制免疫计划》对规模场商品猪、种母猪和种公猪高致病性猪蓝耳病的免疫程序是怎样规定的？
答：（1）商品猪：使用活疫苗于断奶前后初免，4个月后免疫1次；或者，使用灭活苗于断奶后初免，可根据实际情况在初免后一个月加强免疫1次。
（2）种母猪：使用活疫苗或灭活疫苗进行免疫。70日龄前免疫程序同商品猪，以后每次配种前加强免疫1次。
（3）种公猪：使用灭活疫苗进行免疫。70日龄前免疫程序同商品猪，以后每隔4～6个月加强免疫1次。
四、公务礼仪
（一）是非题：
1、与他人交谈时，要盯着他人的眼睛。（×）
2、有人问路可以用手指指示方向。（× ）
3、行握手时，与多人同时握手时，可以交叉握手。（×）
4、与他人交谈完毕就可以立即转身离开。（× ）
5、接待来访时，结束接待，婉言提出，也可用起身的体态语言告诉对方。（√）
6、接打电话时不能吃东西喝水等。（ √ ）
7、男女接打电话时，通常由女士先挂断。（×）
8、陪同客人乘无人管理的电梯，由客人先进入并摁住开关。（×）
9、对一个国家来说，个人礼仪是一个国家文化与传统的象征。（√）
10、礼貌待人有利于构建和谐社会。（ √ ）
11、客人到家里做客，客人走时，主人主动给客人开门。（×）
12、要想在社会中，增强竞争能力，不但要掌握一定的专业技能，还要有良好的礼仪修养。（√）
13、在公共场所的礼仪要求中，有“禁止吸烟”标志的地方，没有人时可以吸烟（×）
14、递接物品时应该要用左手递接。（× ）
（二）选择题
15、客人来访时，我们要为客人打开房门。当房门向外开时（A ）进。
A、客人先进 B、我们先进 C、同时进门
16、正式交往场合我们的仪表仪容要给人（ C）的感觉。
A、随意、整齐、干净 B、漂亮、美观、时髦 C、端庄、大方、美观
17、做客时入座动作要（C ）。
A、快捷 B、轻稳 C、缓慢
18、礼仪是一个人性格、（C ）、文化程度、道德修养的外化。
A、仪容仪表 B、服饰打扮 C、气质
19、男士与女士之间握手时正确的方法是（B ）
A、男士握女士的手指部位 B、男士用手掌握女士的手掌 C、男士先伸手
20、行握手礼时，礼貌的伸手方式是伸出右手（A ）
A、手掌与地面垂直 B、掌心向下倾斜 C、随意
21、介绍他人或为他人指示方向时的手势应该用（C ）
A、食指 B、拇指 C、掌心向上
22、在社交场合初次见面或与人交谈时，双方应该注视对方的（A ）才不算失礼。
A、双眉到鼻尖的三角区域内 B、上半身 C、胸部
23、正式场合着装，整体不应超过（B ）种颜色。
A、两 B、三 C、四
24、在参加各种社交宴请宾客中，要注意从座椅的（B ）侧入座，动作应轻而缓，轻松自然。
A、前侧 B、左侧 C、右侧
25、一般性的拜访多以（B ）为最佳交往时间。
A、1小时左右 B、半小时左右 C、十分钟左右
26、上下楼梯或在楼道行走时应（ A）。
A、靠右侧行走 B、靠左侧行走 C、走中间
27、在公共场合体聚餐时，为了尽兴，可以（B ）。
A、大声交谈、劝酒 B、轻声交谈，适当敬酒 C、不必顾及他人
28、正确握手的时长一般为（A ）
A、3—4秒 B、5—6秒 C、10秒
29、女士随身携带的小手提包，在参加宴会就餐期间应放在（A ）。
A、放在背部与椅背之间 B、挂在自己椅子的靠背上 C、挂在衣架上
30、宴会上，为表示尊重，主宾的座位应（A ）。
A、在主人的右侧 B、在主人的左侧 C、随其所好
31、在参加宴请中，应等（ B）坐定后，方可入座。
A、主人 B、长者 C、女士
32、使用餐巾时，不可以用餐巾来：（C ）。
A、擦嘴角的油渍 B、擦手上的油渍 C、擦拭餐具
33、在可以吸烟的餐厅用餐中，如需抽烟，你应该：（A ）。
A、征得邻座同意再抽 B、先给其他人上烟自己在抽 C、不声不响的走开自己抽
34、在交际场合应该用怎样的目光与人交流？（ A）。
A、坦然 B、鬼祟 C、冰冷
35、当你离开朋友家，请主人不要送的时候应说：（A ）。
A、留步 B、失陪 C、拜访
36、别人给你服务，做事和帮忙，无论给你的帮助多么微不足道，都要说（A ）。
A、谢谢 B、请 C、对不起
37、接电话要迅速，铃响（C ）声之前要接电话。
A、五声 B、四声 C、三声
38、服务人员与服务对象所保持的最常规的服务距离是（A）
A、0.5—1.5米 B、1—3米 C、3米以外
（三）填空题
39、饮酒是各种宴请都不可缺少的内容，为客人斟酒时应该站在客人的 ，斟酒的顺序是先 ，然后 给每人逐个斟酒。
（右侧；位高者、年长者、远道而来者；顺时针）
40、在正式场合，行握手礼时最为重要的是握手的双方应当由谁先伸出手来握手。在公务场合，握手时伸手的先后次序要取决于 ；在社交、休闲场合，主要取决于 。
（职位、身份；年纪、性别、婚否）
41、陪客人一齐乘车时，通常应请客人坐在主人的 侧。小车的座次安排也有讲究：有司机时，后排 为上。车主当司机时 为首；车主为司机并有太太同坐时，太太应坐 。
（右；右；司机旁边；车主司机的旁边）
（四）问答题
42、夫妻间应做到的礼仪要求是什么？
答：夫妻平等、互相尊重、互相关心、相互宽容和相互谅解。
43、渴酒的礼仪有哪五个基本要求？
答：（1）姿势要正确；（2）酒量要适中；（3）速度要适中；（4）拒酒要得体；（5）劝酒要适度。
44、在人际交往中，正确的称呼是对他人尊重的基本要求，应注意哪三种禁用称呼？
答：1、禁用错误的称呼（误读、误会）；
2、禁用庸俗低级的称呼；
3、禁用绰号作为称呼。
45、什么是创先争优？
答： 创先争优就是创建先进基层党组织、争当优秀共产党员。
46、怎样礼貌地问路？
答：（1）在问询之前要热情、礼貌的称呼对方。
（2）当别人回答了你的问题，应诚挚道谢。
（3）如果对方回答不了问题，也要礼貌道谢。
47、并行走路时，应遵循什么原则？
答：一对男女走在人行道上，男子往往走在外侧，提东西的人通常走在右边。男子应帮衬女子提东西，但不能帮助女子提坤包。
三人并行，老年人走在中间。车辆多的地方，男子走在人行道靠马路的一侧。
四人同行，最好前后两两并行。
48、饮茶的礼节、礼貌要求是什么？
答 ：请客人喝茶，要将茶杯放在托盘上端出，或用双手奉上。
茶杯应放在客人右手的前方。要及时给客人添水。
客人则须善“品”，小口啜饮，而不是大口喝。
49、同事之间应遵循的礼仪是什么？
答：（1）尊重同事，行为举止要有分寸；
（2）物质上的往来应有是非标准；
（3）对同事的困难应给予关心和慰问，力所能及的事应尽心帮忙；
（4）不在背后议论同事的隐私；
（5）不说长道短，不搬弄是非；
50、参加工作会议的一般礼仪有哪些？
答：（1）参加会议应衣着整洁，仪表大方，准时入场，进出有序，按会议安排落座。
（2）开会时关闭手机或将手机调至静音，避免在会场接打电话。
（3）开会时认真听讲，及时记录，不要私下小声说话或交头接耳，发言人发言结束时，应鼓掌致意。
(4)中途退场，应轻手轻脚，不打扰他人。
五、其他
1、防疫公开承诺服务制度的具体内容都有哪些？
答：一是制作防疫明白栏。每个行政村要制作一个动物防疫明白栏，防疫明白栏内写明防疫对象、强制免疫项目、计划免疫项目、收费标准、固定防疫日和县畜牧局防疫监督电话等。
二是印发服务名片。服务名片上印有防疫员的姓名、服务范围、联系电话、监督电话。
三是制定固定防疫日。在固定防疫日重点对新补栏的畜禽、断奶的幼畜、病愈牲畜、空怀母畜及已到防疫日龄的家禽进行重大动物疫病的补免。
四是设立防疫热线电话。向养殖户公开防疫服务热线电话，使养殖户能及时通过电话了解防疫方面的有关政策，同时，也接受群众对防疫工作的监督。
2、《河南省市、县级动物疫病预防控制中心实验室建设与管理规范（试行）》是哪一年制定下发的？是几号文？其主要内容是什么？
答：是20##年11月9日制定下发的，文号为豫牧医【2004】44号，其主要内容为：规定了市、县两级生物安全实验室的建设和生物安全管理，同时还规定了实验室设施设备和技术人员的配置、运行流程、实验室人员行为的要求及各项规章管理制度。