实验报告

唐贝对糖尿病模型小鼠治疗作用的实验研究

材料与方法

1.      材料

1.1实验动物：C57BL/6J小鼠，Ⅱ级，雄性，体重18±2g，购自中国医学科学院实验动物中心；合格证号：京动许字003。

1.2 主要试剂：
链脲佐菌素（STZ）：Sigma公司产品；

柠檬酸：西陇化工产品；

柠檬酸三钠：西陇化工产品；

1.3实验器材：

0.25ml注射器；

0.22μ m微孔滤膜；

罗氏乐康全血糖仪及血糖试纸；

电子天平

2.  方法

2．1动物分组及造模方法：

取C57BL/6J小鼠40只，抽签法随机分为3组：

模型组：5只，禁食不禁水12小时，腹腔注射STZ40mg/kg体重（STZ临用前用0.1mol/L、PH4.5的柠檬酸缓冲液配成1%STZ溶液，经0.22μ m微孔滤膜过滤除菌），每天1次，连续5天；

正常组：5只，禁食不禁水12小时，腹腔注射等量柠檬酸缓冲液，每天1次，连续5天；

唐贝组：5只，禁食不禁水12小时，腹腔注射STZ40mg/kg体重（STZ临用前用0.1mol/L、PH4.5的柠檬酸缓冲液配成1%STZ溶液，经0.22μ m微孔滤膜过滤除菌），每天1次，连续5天；模型成功后，灌胃给予唐贝0.9g/kg体重，每天一次，连续10天。

2.2统计学处理：

数据用SPSS10.0统计软件进行处理。

结果

血糖的变化

在实验过程中，我们动态观察了小鼠血糖的变化。结果显示：造模后，模型组及唐贝组小鼠的血糖与正常组小鼠相比显著升高（P＜0.001）；给药第5天时，唐贝组小鼠血糖有所降低；给药第10天时，唐贝组小鼠血糖比模型组小鼠明显降低（P＜0.001）。

注：与正常组比较 ﹡P＜0.05  ﹡﹡﹡P＜0.001。

与模型组比较 △P＜0.05  △△△P＜0.001。

结论

唐贝能够降低糖尿病模型小鼠的血糖，从给药的第5天时血糖开始降低，实验介绍（给药第10天）时，唐贝组小鼠的血糖明显低于模型组小鼠。

检验者：王俊霞                                      负责人：杨泽

                                   卫生部老年医学研究所

                            中国老年保健医学研究会基础医学分会

                                      20##年2月28日

第二篇：糖尿病小鼠模型的建立及中药荔枝核提取液对其治疗的实验研究

当代医学　20xx年6月第15卷第18期总第173期　Contemporary Medicine, Jun. 2009,Vol.15 No.18 Issue No.173

糖尿病小鼠模型的建立及中药荔枝核提取液对其治疗

的实验研究

梁丹 黎卫冲 覃冬菊 覃玉君 黄秋岸 张树球

[摘要] 目的 探讨糖尿病小鼠模型建立的方法以及中药荔枝核提取液对其治疗后的各项生化指标变化。方法 选用小鼠作为研究对象,随机分成3组，即治疗组、模型组、正常组，后两组用四氧嘧啶建成模型，48小时后测空腹血糖，接着治疗组用中药荔枝核提取液灌胃治疗，时间7天。结果 实验前后体重3组(治疗组、模型组、正常组)分别是(±s)：25.40±1.55、28.10±1.80、27.33±1.37、和21.40±1.37、23.43±2.73、27.33±0.75(g)；造模前、后和实验结束时的空腹血糖3组分别为：治疗组2.84±0.54、10.78±4.83、5.03±3.99，模型组

2.90±0.70、10.80±4.71、10.46±3.19，正常组3.66±1.37、4.28±0.63、5.11±0.41(mmol/L)；实验结束时甘油三脂分别为0.66±0.23、0.92±0.39、079±0.23(mmol/L)，尿素分别为10.06±4.58、13.93±3.83、9.23±1.34(mmol/L)；总胆固醇分别为2.53±0.43、1.99±0.29、

1.94±0.21(mmol/L)。结论 造模组造模后血糖明显升高，成功率为70.83%，治疗组治疗后血糖有明显的降低，尿素、甘油三脂也低于非治疗的模型组。

[关键词] 小白鼠；糖尿病模型；荔枝核

糖尿病是临床常见的疑难病，目前全球病人约1～1.5亿，只，模型组10只。

且发病率逐年上升[1]。此病的病因尚未明确，无法根治，目前1.5 动物实验方法 称体重，模型组和治疗组用四氧嘧啶治疗只是控制血糖水平和防治并发症。本次实验对小鼠建立糖腹腔注射，剂量为220mg/kg体重，48小时后，测定空腹6小时尿病模型，用荔枝核提取液治疗来观察各生化指标的变化，现血糖，空腹血糖≥8.0mmol/L为建模成功[2]。治疗组用中药荔将实验报告如下。枝核提取液治疗，每只灌胃0.4ml，每天一次，连续7天，模型

1 材料及方法组用等量蒸馏水灌胃，测定造模前后，实验结束的空腹血糖。

1.1 实验方法 随机分组，对照实验。实验结束取眼球血离心，分离血清，测定总胆固醇、甘油三

1.2 试剂 邻甲苯胺(自配)、30%三氯醋酸(自配)、饱和脂、尿素和总蛋白的浓度。

硼酸(自配)、24%硼酸溶液(自配)、四氧嘧啶(进口，sigma产1.6 测定方法 血糖测定用邻苯甲胺法[3]，甘油三脂用品)、甘油三脂GPO-PAP法检测试剂盒(四川省迈克科技有限公GPO-PAP法测定，总胆固醇用COD-CE-PAP法测定，尿素司生产)、总胆固醇COD-CE-PAP检测试剂盒、尿素脲酶波氏用脲酶波氏法测定，总蛋白用双缩脲法测定具体操作按试剂盒检测法试剂盒(四川省迈克科技有限公司生产)、葡萄糖标准液说明书。

(5.55mmol/L)。1.7 统制学处理 用上海科技出版社2.00版软件统制，方

1.3 治疗中药 荔枝核(产地广西靖西县)煮沸水提取一小差分析，Q检验。用(s)表示。

时，过滤浓缩，乙醇沉淀过滤，回收乙醇，高压灭菌(每ml含生2 结果

药0.1g)。2.1 造模成功情况 对24只小鼠造模，有17只成功，成功

1.4 动物 小白鼠(昆明种，由学院动物室提供)30只，率为70.83%。

雌雄随机分组，体重：22～31g，分组：正常组6只，治疗组142.2 各组小鼠血糖测定结果 结果显示，造模后治疗组、

模型组血糖明显升高(P<0.01或P<0.05)；治疗后治疗组血糖明

作者单位：533000 右江民族医学院 (梁丹 黎卫冲 覃冬菊 覃玉君 显下降。见表1。

黄秋岸 张树球)2.3 治疗后血清中总蛋白、总胆固醇、甘油三脂、尿

[6] Drobná Z,Xing WB,Thomas DJ,et al.shRNA Silencing of AS3MT Perspect,2005,113(5):775-781.

Expression Minimizes Arsenic Methylation Capacity of HepG2 Cells[J].Chem Res [9] Lindberg AL,Kumar R,Goessler W,et al.Metabolism of low-dose Toxicol,2006,19(7):894-898.inorganic arsenic in a central European population:influence of sex and genetic

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methylated arsenic and CYT19 polymorphisms in children[J].Environ Health

当代医学　20xx年6月第15卷第18期总第173期　Contemporary Medicine, Jun. 2009,Vol.15 No.18 Issue No.173

素测定结果 结果显示，治疗组与模型组血清总蛋白有明显差异(P<0.01)；治疗组的总胆固醇明显高于模型组和正常组(P<0.01)和P<0.05)；治疗组与模型组的甘油三脂比较,前者较低；治疗组尿素明显低于模型组(P<0.05)。见表2。

表1 各组小鼠血糖测定结果比较(s)单位：mmol/L组别 正常组 模型组 治疗组

n 6 10 14

造模前 3.66±1.37 2.90±0.70 2.84±0.54

造模后 4.28±0.63 10.80±4.71b 10.78±4.83c

治疗后5.11±0.41d10.46±3.195.03±3.99e

表3 各组小鼠体重测定结果比较(±s)单位：g组别 正常组 模型组 治疗组

实验前 27.33±1.37(n=6) 28.10±1.80(n=10) 25.43±1.55(n=14)

实验后27.33±0.75(n=6)23.43±2.73(n=10)21.40±1.74(n=8)

方差分析：组内比较：模型组实验前后比较P<0.01；治疗组实验前后比较P<0.01。

3.3 从3组小鼠的甘油三脂来看，实验结束时的浓度，模型组最高，治疗组最低，正常组居中，说明糖尿病一般伴有甘油三脂浓度升高[4]，用纯荔枝核提取液治疗，除了可降低血糖外，还可使甘油三脂浓度下降。模型组尿素明显高于治疗组，说明荔枝核对糖尿病小鼠肾脏有一定保护作用。血清总蛋白的治疗组也明显高于模型组，可能是药物促进血清蛋白合成有关。治疗组总胆固醇明显高于其它两组，原因有待研究。

3.4 体重 从测定结果看，模型组和治疗组在实验结束后明显消瘦，而正常组体重没有变化。由于糖尿病小鼠不能很好的利用血糖而从尿液中大量排出，机体只能通过糖异生把蛋白质或脂肪转化为葡萄糖，为机体提供能量，最后导致小鼠消瘦[5]参考文献

方差分析：组间比较：造模后 与正常组比较bP<0.05；与正常组比较

c

P<0.01；治疗后与模型组比较dP<0.01，eP<0.05。

表2 治疗后各组小鼠血清中总蛋白、总胆固醇、甘油三脂、尿素测定结果之间的比较(s)单位：mmol/L组别 正常组 模型组 治疗组

n 6 10 8

总蛋白 32.78±3.22 30.54±4.42 37.90±5.17a

总胆固醇 1.94±0.21b 1.99±0.29b 2.53±0.43

甘油三脂 0.79±0.23 0.92±0.39 0.66±0.23

尿素9.23±1.3413.93±3.8310.06±4.58c

方差分析：总蛋白：与模型组比较aP<0.01；总胆固醇：与治疗组比较

b

P<0.01；尿素：与模型组比较cP<0.05。

2.4 各组小鼠体重测定结果 结果显示模型组与治疗组实验后都有明显下降(P<0.01)。见表3。

3 讨论3.1 造模成功率为70.83%，与文献报道的基本类似[3]部分小鼠没有建立模型成功，可能是因为部分小鼠本身耐受能力强有关。

3.2 治疗后，治疗组血糖明显下降，说明荔枝核提取液对降低血糖有明显的作用与文献报道一致[1]，具有开发前景。

[1] 李朝敢,张树球,王三艳,等.荔枝核提取液对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血生化指标的干预实验[J].中国临床康复,2006,10(31):61-63.

[2] 黄松.糖尿病动物模型研究现状及进展[J].广西医学,2002, 24(1):46-48.

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[4] 钱荣立.糖尿病与血脂异常[J].中国糖尿病杂志,2000,10(2): 62-63.

[5] 周爱儒.生物化学[M].第6版.北京:人民卫生出版社,2003:103.

(上接第153页)

3.3.3 严重的压力性尿失禁 Ⅲ度压力性尿失禁治疗效果欠满意，考虑增加治疗疗程或配合药物手术治疗加以改善。

4 经验体会4.1 患者多数为老年人，理解能力差，需要耐心的指导，使其配合生物反馈治疗。

4.2 治疗过程要循序渐进，先从较低的难度开始，使患者能够掌握正确的盆底肌肉的收缩方法。如果起始难度过高，治疗过程中就会辅助使用肢体及腹部肌肉，形成错误方法，影响治疗效果。

4.3 每次20min的锻炼时间须根据患者的耐受程度分为4～5节，每节4～5min，每节过长的盆底锻炼难以坚持，且肌肉过度疲劳可导致症状的反复或加重，影响患者的治疗信心。

4.4 盆底锻炼需要长期坚持而且刚开始治疗时比较疲劳，

治疗过程中除了要让患者看到症状改善，还要不断地鼓励患者，使其树立信心。

生物反馈治疗仪在治疗尿失禁的过程中，具有安全、无创、无副作用的优点，适用于轻中度的压力性尿失禁，作为手术及药物治疗的辅助手段也有良好的预期。相信随着人们生活质量的提高，尿失禁的治疗将被逐渐提上日程，从而促成生物参考文献

[1] 郭应禄,杨勇,尿失禁[M].济南:山东科学技术出版社,2003:325.

[2] Mouristen L,Annlise R. Bladder neck mobility evaluated by beginal ultrasonogrphy[J].Br J Urol,1993,71:166-171.

[3] 李龙坤,宋波,张兴洪,等.电刺激盆底肌对膀胱功能影响的实验研究[J].中华泌尿外科杂志,2000,2(12):738-740.