实验名称：小鼠的一般操作   实验日期：

姓名：  学号： 专业： 

一、 实验目的和要求

掌握小鼠实验的一般操作：动物的抓取和保定，性别鉴定，编号，给药，麻醉，采血，处死，解剖等。

二、 实验准备

1、  动物：昆明小鼠，雌雄各2只

2、  器械：毛笔，解剖剪，解剖镊，眼科剪，眼科镊，解剖板，灌胃针，注射器，头皮针，干棉球及酒精棉球，20ul采血针。

3、  药品：苦味酸，0.9%生理盐水及2%水合氯醛

三、 实验步骤

1、  抓取和保定

右手将小鼠尾巴提起，置于粗糙的平面上，此时小鼠向前挣扎，用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤，翻转小鼠，其背部置于掌心，小指压住小鼠尾巴

2、  性别鉴定

小鼠抓取后翻转，观察肛门与生殖器之间的距离，距离远者为雄性，近者为雌性。雄性小鼠睾丸降至阴囊内，生殖器有明显突起；雌性小鼠的肛门至会阴处为无皮毛覆盖的细线。

3、  编号

用苦味酸（黄色）的酒精饱和溶液逆着小鼠的毛染色（可维持1~2个月）不同的颜色部位代表不同的标号。一般习惯上的部位顺序为：1左前肢。2左腹部，3左后肢， 4头颈部，5背部，6尾根部，7右腹部9右后肢。

4、  给药

（1）       灌胃

左手抓取和固定小鼠，特别是其头颈部，右手持灌胃针，用灌胃针轻轻压其头部，尽量使其口腔和食道成一条直线再将灌胃针沿上腭壁轻轻进入食道，当灌胃针进入约3cm左右时即到达胃内，向胃内注射0.9%生理盐水后轻轻抽出灌胃针，小鼠每次最大灌胃量为0.5ml。

（2）       腹腔给药

左手抓取和固定小鼠，右手持注射器，从左下腹部腹股沟上约0.5cm，腹中线旁外1cm进针，进针时腹部平面形成45度，进针深度约1cm。

（3）       尾静脉注射

将小鼠放入固定的小笼内，尾巴滞留在外，消毒尾部，并挤压尾根部用左右拇指和食指控制小鼠尾巴角度。

右手持注射器，使其与尾两侧的静脉平行，从尾下1/4处进针，将注射器外套置于拇指与中指交叉处，保持针头刺入点、血管、注射器成一条直线。向充盈的尾静脉刺入3—5mm，食指及中指夹住注射器外套，拇指推注射器，将0.9%生理盐水按一定速度推入。注射时若出现隆起的白色皮丘，说明针头未注入血管，应重新向尾巴根部移动进针注射。

5、  采血

眼眶后静脉丛穿刺采血：左手抓取并保定小鼠，使右眼后侧皮肤绷紧，使眼球暴露突出，右手将针头从内侧眼角转动插入，由鼻侧眼眶壁平行向前推动，有突破感，血液流出。取血后，拔出针头，用干棉球压迫眼眶止血。

6、  麻醉

采用小鼠腹腔注射麻醉，麻醉剂为2%水合氯醛，用量为400mg/kg，注射量为0.5ml/25g。本组小鼠体重分别为①24.6g②23.5g③23.2g④23.5g。

7、  处死

小鼠处死一般采用引颈法。将教书置于一处其可抓住的地方，左手拇指和食指用力向下按住小鼠头部，右手抓住小鼠尾部用力向上向后拉，将脊髓拉断，小鼠即刻死亡。

8、  解剖

固定小鼠，以下腹部最低点起始，V字开口，沿中线剪开皮肤至剑突，再剪开腹膜，暴露腹盆腔器官。观察腹腔内器官（肝脏、胆囊、脾脏、胰腺、胃、肠道、肾脏、输尿管、膀胱、生殖器等）。

小鼠解剖学特点：

1、  小鼠腹腔内肝脏、胆囊、胃、肠、肾、膀胱、脾等。肝脏分为左、右、中、尾四叶，胆囊藏在肝分叶的深层，较透明；胰腺为弥散状，分散在十二指肠、胃底及脾门处，色淡红，似脂肪组织。推开肠管可见肾脏，左肾位置偏下被脾脏覆盖，右肾偏上被肝脏遮盖，肾上腺位于肾上极，白色，周围有较多脂肪组织包绕。

2、  小鼠胸腔有气管、肺、心脏和胸腺。肺脏有4叶组成，剪开胸部皮肤和肋骨，可见两侧肺脏和中间心脏，向上有气管。甲状腺位于气管旁，深红色。

3、  雌鼠生殖器官有卵巢、输卵管、子宫，阴道等。其子宫为“Y”型（双角子宫），分为子宫角、子宫体、子宫颈。沿两个角向上寻找卵巢，位于双侧肾脏下缘附近。卵巢被系膜包绕，不与腹腔相通。

4、  雄鼠的生殖器有睾丸、附睾、副性腺（如凝固腺）、输精管等。挤压雄鼠阴囊，腹腔内可见两椭圆形白色物质，即为睾丸。凝固腺附着于精液腺内侧，是半透明的半月形器官。副性腺分泌物有营养精子、形成阴栓等作用。

四、 实验注意事项：

1、  抓取和保定小鼠时多抓一些皮肤更易固定小鼠。并用小时固定小鼠后肢及尾巴，防止其挣扎影响操作。

2、  用苦味酸涂染小鼠毛法简便、清晰，适用于短期实验，如要做长期试验，为避免褪色，可每隔2~3周重染一次。

3、  经口灌胃时，插入灌胃针是不可强行差=插，可退回后在尝试插入，若小鼠强烈挣扎，提示插入位置不正确，需拔出重插，否则可将药物灌入气管内，造成小鼠死亡。

4、  腹腔进针注射时，针头不能插入太深，选择进针的地方应该尽量靠近下腹部，尽可能避免刺伤肝脏、脾和膀胱。推注射器前可先回抽，确认无血液及肠内容物后再注射。

5、  尾静脉注射时，选择起始进针位置应靠近尾尖，进针角度应该<30度，防止血管对穿。进针后由于小鼠血管较细，回抽也不一定有血，主要通过观察推药时血管的颜色和尾巴是否水肿出现。

6、  小鼠麻醉时：存在个体差异，对麻药量的耐受性也不同，应注射后观察小鼠的反应，如麻醉药剂量不足，理论上补1/3的原剂量。

7、  处死小鼠时：右手用力应从小逐渐增大，避免突然用力，以免小鼠尾拉断而脊髓未断。右手除向后用力还应该部分向上用力，使小鼠的身体和头部成一定的角度，更容易处死。

五、 实验讨论

1、  给药途径有经口灌胃法、经呼吸道吸入、经皮肤吸收和注射给药法等，选择歌谣途径的依据：

（1）       根据药物的性质悬着给药途径；如有刺激性的药物不适用于皮下、肌肉和腹腔注射，只能经口给药或静脉注射，如在消化道内破坏或吸收不好的药物应该注射给药。

（2）       根据实验要求选择给药途径；如要求药物作用出现快，可用注射给药。如要药物作用相对延长，可注射油剂。若为雾状药物或毒物则需要通过呼吸道吸入。有些毒物易经皮肤吸收，可采用皮肤给药。

（3）       根据剂型选择给药途径；水溶液可以采用任何给药途径，油剂溶液可经口给药，也可通过肌肉注射给药。

2、  尾静脉注射时，可将小鼠尾用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭，可使血管扩张，同时也可软化表皮角质。以左手拇指和食指夹住鼠尾，使静脉充盈，中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢，右手持注射器，针头与静脉夹角一般<30度，从距尾尖2 - 3厘米处进针，此处皮薄易进入，先抽回血，见到血后再缓慢注入少量溶液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。一般推注速度为0.05 - 0.10ml/秒，一次注入量为0.05 - 0.25ml/10g体重，单次小鼠尾静脉注射的剂量不易超过0.4ml，大剂量迅速推注容易造成小鼠超负载性死亡。如反复注入，应尽可能从尾末端开始，以后向尾根部方向移动注射。

第二篇：实验动物学实验报告

实验动物学实验报告

一、实验动物：小鼠

二、操作流程：抓取，固定，编号，给药，取血，麻醉，绝育，解剖。

三、具体操作

1、抓取：抓取小鼠时，右手抓住小鼠尾巴，不要过于用力，以免惊吓小鼠。左手从小鼠身体后部向前抓（以免小鼠向后缩咬伤自己），抓住小鼠颈部。固定住小鼠后，将小鼠皮肤往上抓，尽量将小鼠背部皮肤抓住。左手将小鼠腹部朝向自己，把小鼠尾巴用左手无名指和小指夹住，这时小鼠腹部皮肤紧绷，不能动弹。

2、固定： 通常使用固定器进行固定。将固定器拧开后，抓住小鼠尾巴，使其钻入固定器中，再将拧下的固定器部分装好，使小鼠尾部露出，再将可旋转的铁片固定住即可进行后续实验。

3、编号：编号方式有两种：①剪脚趾编号：把小鼠腹面朝上，在下的脚趾从左至右依次编为1~10号，剪10号脚趾加1~9号脚趾依次编为11~19号，在上的脚趾依次编为20,30,40,50,60,70,80,90号，其余编号与11~19号类似。②打耳钉编号：耳钉上均有唯一编号，通过使用耳钉钳将耳钉打在小鼠耳朵上即可。实验时通常使用的是第一种方式进行编号，第二种编号通常用于需要长距离运输的动物。

4、给药：常用的给药方式有：

①口服给药：即灌胃。将注射器装入药物溶液，装上灌胃针（灌胃针有直头和弯头两种，区别不大）。如上所述，抓取小鼠后，使其头部朝上，尽量呈一直线，取灌胃针，从小鼠嘴角一侧缓缓插入（保持刻度在自己能看到的位置），顺着小鼠口腔食道的弧度让小鼠将针咽入，灌胃过程中如果遇到阻碍一定要及时拔出灌胃针，不可强行灌胃以免伤及小鼠食道以及肺部。灌胃针顺利进入后基本与小鼠身体呈一条直线，注入适量体积后再顺着食道缓缓取出灌胃针。

②静脉注射：小鼠尾部有3条静脉和1条动脉，3条静脉非别位于背部，及两侧。静脉注射时一般选取两侧静脉，因为其相对于背部静脉更为清晰饱满。将小鼠固定后，用酒精擦拭其尾部静脉，使其充血，以便注射。之后使注射器针孔处朝上，针与尾部呈约30°扎入尾部后向上轻挑，再向内扎入部分，此过程应该比较顺畅，没有阻碍，若阻碍较大则有可能扎入到了皮肤中。扎入后将活塞向后回抽一点可见到有血回流，则说明成功扎入静脉当中，注射适当体积后迅速拔针，用酒精进行消毒。

5、取血：有断尾取血法和眼眶取血法两种。本次实验使用的是眼眶取血法。抓取小鼠，固定其头部用手指将其上下眼睑分开，露出其眼球并且不能闭上。用玻璃毛细管从其上眼角处扎入眼球后方毛细血管从，使血液顺着毛细管留下，取血完成后快速将毛细管取下。

6、麻醉：抓取老鼠，使其头部朝下，使其腹部脏器向胸腔靠拢，露出腹部空腔，以免刺伤脏器。将注射器竖直扎入靠近后腿部腹腔，刺入之后稍微向前倾斜但不要向前刺入，一般注入0.5mL麻醉剂即可。随后拔出针，方向小鼠，等待几分钟后即可麻醉。

7、绝育：绝育手术是通过剪除雌鼠卵巢或雄鼠输精管来实现的。将麻醉的雌鼠背面朝上，从其胸腔和尾部之间向下三分之一处剪开一个小口，用镊子将其卵巢取出，上面呈现红色斑点的部分即为卵巢，用剪刀将这一部分剪除，然后用缝合针线将其缝合，缝合方法为将针穿过后，将线缠绕镊子两圈再逆时针缠绕两

圈，再重复缠绕一遍，将镊子夹住线头把缠绕的线移至线头系紧即可（缝合过程全程用镊子和剪刀操作），里面肌肉层以及外面皮层均需缝合。雄鼠则从外生殖器向上1-2cm处剪开小口，用镊子在其中找出输精管（较细长的乳白色小管），尽量多减掉一些，以免其长长愈合，以上述方法缝合伤口即可。

9、解剖：以颈椎脱臼法处死小鼠，使其腹面朝上。用镊子将其腹部皮肤夹起，然后用剪刀剪开，观察各个器官所在位置和形态，解剖完的小鼠放入尸体袋中。