实验三、血清伽马球蛋白的分离纯化和鉴定
1、实验原理
蛋白质粗提,盐析法:蛋白质溶液是亲水胶体,稳定因素为水合膜和吸附电荷,可以向溶液中加入大量中性盐使蛋白质析出。
凝胶层析法:凝胶是一种不带电的具有三维空间的多孔网状结构、呈球状颗粒的物质,每个颗粒的细微结构及筛孔的直径均匀一致,像筛子,小的分子可以进入凝胶网孔,而大的分子则排阻于颗粒之外。当含有分子大小不一的蛋白质混合物样品加到用此类凝胶颗粒装填而成的层析柱上时,这些物质即随洗脱液的流动而发生移动。大分子物质沿凝胶颗粒间隙随洗脱液移动,流程短,移动速率快,先被洗出层析柱;而小分子物质可通过凝胶网孔进入颗粒内部,然后再扩散出来,故流程长,移动速度慢,最后被洗出层析柱,在凝胶柱中所经过的路程和时间也不同,从而使样品中不同大小的分子彼此获得分离。
离子交换法:由于蛋白质在一定pH下静电荷的正负不同,利用离子交换剂对不同电荷亲和力的不同,可使不同蛋白质分离。
电泳:使用ph大于于蛋白质等电点的缓冲溶液使蛋白质带负电荷,将其置于电场中时,蛋白质会在电场力的作用下向正极移动,经染色后在醋酸纤维试纸呈现出一条条带。
2、实验结果:
通过我们的纯化、电泳、染色,最终呈现出一条条带。并与血清做对比,可以明显看出区别。
3、结果分析:
本次实验较为简单,我们的结果也符合预期。
第二篇:医学化学实验报告3
酸、碱标准溶液的配置与标定
一、实验目的
1、掌握酸、碱标准溶液的配制方法与标定方法;
2、练习滴定操作,掌握滴定管、移液管的正确使用和确定终点的
方法;
3、掌握酸、碱指示剂的选择方法。
二、实验原理
标准溶液是已知准确浓度的溶液,常用酸标准溶液是HCl
溶液,常用的碱标准溶液是NaOH溶液。
由于浓盐酸易挥发,而氢氧化钠晶体易吸收空气中的水和二
氧化碳,因此和标准溶液只能用间接法配制,即先配制成接近所需浓度的溶液,然后再用基准物进行标定。也可利用另一已知准确浓度的标准溶液滴定该溶液,再根据他们的体积比求得该溶液的准确浓度。
标定溶液常用的基准物质是无水碳酸钠,标定反应如下: Na2CO3 + 2HCl = 2NaCl + H2O + CO2↑
测HCl浓度,选用甲基橙作指示剂。
C(HCl) = 2m(Na2CO3)/[M(Na2CO3) *V(HCl)] ①
标定溶液用已知准确浓度的溶液,标定反应如下:
HCl + NaOH = NaCl + H2O
测溶液浓度,选用酚酞作指示剂。
C(NaOH) =[C(HCl)* V(HCl)]/V(NaOH)
三、实验步骤
1、室温下,用电子天平准确称取1·3220g无水碳酸钠晶体于烧杯中,加约40mL蒸馏水溶解后,定量转移至250mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度线,摇匀。
2、用量筒取8·56mL HCl溶液,倒入500试剂瓶中,加水稀释至500mL,盖上玻璃塞,摇匀。
3、用托盘天平取2·0g NaOH晶体于烧杯中,加蒸馏水溶解后,倒入500mL试剂瓶中,加水稀释至500mL,用橡皮塞塞好瓶口,摇匀。
4、用移液管移取25·00mL Na2CO3溶液于250mL锥形瓶中,加2滴甲基橙试剂,用HCl溶液滴定至溶液颜色由黄色变为粉红色且30秒后不褪色,即为滴定终点。平行滴定三次,计算HCl标准溶液的准确浓度,记录表格略。
5、润洗移液管,用移液管移取10·00mL HCl标准溶液于锥形瓶中,加2滴酚酞指示剂,加NaOH溶液滴定至溶液颜色由无色变为粉红色,且30秒后不褪色,即为滴定终点。平行滴定三次,计算NaOH标准溶液的准确浓度,记录表格略。