HC2介绍

●Digene杂交捕获二代测试是目前唯一经美国食品和药品监督管理局FDA、欧洲CE和中国食品药品监督管理局SFDA共同认证的领先检测技术它利用分子生物学技术在分子DNA水平直接检测高危型HPV病毒。这项分子ELISA技术通过将RNA探针与单束HPVDNA杂交随后通过化学发光检测到RNA/DNA杂交物。HC2的临床敏感度很高大多数发表的结果显示敏感度超过99。它弥补了细胞学检查的不足使宫颈癌在感染期尚无细胞病变即敲响警钟使检验者远离宫颈癌健康地生活。

●HC2检测的最大优越性之一是发现高危型HPV阳性而细胞学图片正常的妇女因这一人群中10会在四年内发展成CINⅢⅢ期宫颈上皮内瘤样变。

子宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一。在全球范围内每年约有20多万女性死于宫颈癌。

很多女性朋友不禁想问有没有可以预知癌症预防癌症的办法呢本期我们要介绍的HC2检测即基因杂交捕获Ⅱ代技术对于宫颈癌就有早期发现、早期预防的作用。

在三八妇女节到来之际希望有更多的女性朋友能够认识和了解这一福音并且亲身体验对自己的身体负起责任。

专家有话1.1应做宫颈癌筛查的人群有关调查资料显示我国青少年目前性成熟年龄普遍比上个世纪70年代提前了45岁在21岁的年轻人当中79有过婚前性行为在农村地区超过80婚前性行为呈现出低龄化的趋势。

有资料表明早婚早育、有流产史、性病史、拥有多名性伴侣的女性都是宫颈癌的高发人群。有多个性伴侣的妇女患宫颈癌的危险性比只有一个性伴侣者高23倍以上。

因此建议任何有3年以上性行为或21岁以上有性行为的妇女应该开始定期做宫颈癌的筛查65岁后患宫颈癌的危险性极低故一般不主张对65岁以上的妇女进行宫颈癌筛查。

1.2警惕阴道出血宫颈癌因为癌变部位位于子宫颈上在癌变破裂时会出现不规则的出血有时性交也会引发出血著名妇科专家林巧稚就曾经强调过“凡阴道出血都要看”因为对妇科疾病来说这是一个危险的信号不能放任不管。

目前中国的很多女性生活方式已经和西方女性相差无几西方女性一般都有按规律体检的习惯而我国的很多女性却连许多必须的检查都没有做过许多年轻的女性也是病了之后才开始找大夫其实病人自己觉得不舒服或身体有反应的时候很多病已经错过了最好的治疗时机。

1.3怀孕是最危险的对宫颈癌患者来说最危险的是怀孕因为宫颈癌早期不会影响怀孕如果在怀孕之前没有检查出来妈妈已经有宫颈癌那么随着怀孕子宫大量充血妈妈输送来的营养不仅养了宝宝同时会使癌变部位以极其迅速的速度增长。

再加上身体因怀孕分泌的一些激素对癌症有促进作用怀孕时身体免疫力下降对抗癌细胞的作用起不到而宫颈癌的一些征兆如出血等又会被认为是先兆流产的现象而被忽略等到生完宝宝再发现时就晚了预后的效果很不好。所以孕妇在怀孕前一定要做好各种检查。

重点推荐2.1基因杂交捕获Ⅱ代技术HC2近几年来发达国家在开展多种检测HPV人类乳头状瘤病毒技术的基础上美国又推出了基因杂交捕获Ⅱ代技术。

原理基因杂交捕获Ⅱ代技术是基于信号放大的酶标板技术它使用化学发光来定量检测病毒的DNA或RNA是当前唯一获美国FDA认证的HPV-DNA检测方法可

以同时检测引起宫颈癌的13种高危型HPV。

方法HC2检测是用一个特制的小刷子在宫颈口取脱落细胞通过分子生物学的方法早期发现感染高危型HPV的妇女进而追踪随访达到筛查和预防宫颈癌及其早期病变的目的。

2.2HC2检测并非越早做越好30岁以前的女性虽然处于性生活活跃阶段感染机会很高但30岁前的妇女抵抗能力比较强绝大多数可以通过自身免疫力来清除这个病毒。

而超过30岁还有HPV感染的可能就是持续的HPV感染发展成子宫颈病变甚至子宫颈癌的机会就增加了。所以建议30岁以上的妇女都应HC2检测特殊人群应该提早检测。

2.3检测前注意事项做HC2检测前应做到采集标本的前3天不要阴道用药或冲洗不要选择在经期进行该项检查但少量血液不影响检测结果另外采样前不要进行醋酸或碘液涂抹。

2.4检测1次放心5年98的宫颈癌患者中可以检测到HPV不感染HPV几乎就不会发生宫颈癌。所以通过HC2技术筛查1次之后确定没有感染HPV的人通常可以确定在58年之内是没有感染的危险的而假如连续两次筛查都没有问题的话则意味着8年以上的时间都不会有感染的危险。

普通筛查3.1巴氏涂片巴氏涂片目前在许多国家仍作为常规筛查项目。巴氏涂片对高级-鳞状上皮内损害和宫颈癌鉴别有很高的特异性对低级-鳞状上皮内损害则特异性较低。

近来对宫颈细胞学假阴性率极为关注。在探索和减少巴氏涂片假阴性率方面应注意使用适当技术最大限度的提高涂片质量涂片需在妇科检查前获得检查前24h应避免润滑剂及冲洗无阴道出血及明显阴道炎在宫颈及宫颈管分别作涂片。若材料来自后穹隆假阴性率≥50认为一半以上假阴性涂片是由于标本的错误其次是筛查和准备过程的错误。

3.2宫颈癌摄影和阴道镜检查巴氏涂片和宫颈摄影阴道镜检查相结合可提高诊断率宫颈摄影对巴氏涂片中非典型鳞状细胞和低级-鳞状上皮内损害有助于CINⅡⅢ损害的检出其灵敏性优于重复巴氏涂片。

而对于组织学高级-鳞状上皮内损害的高发生率假若患者不及时行阴道镜检查延误治疗可能会发展为浸润癌。但阴道镜检查是一种直观技术需要丰富的经验。

3.3液基细胞学检查液基细胞学TCT检查是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行TBS细胞学分类诊断它是目前国际上最先进的一种宫颈癌细胞学检查技术与传统的宫颈刮片巴氏涂片检查相比明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率TCT宫颈防癌细胞学检查对宫颈癌细胞的检出率达95以上同时还能发现癌前病变微生物感染如霉菌、滴虫、衣原体等。

该检查的报告系统将宫颈鳞状上皮内病变分成五种类型非典型鳞状细胞意义不明确非典型鳞状细胞倾向上皮内高度病变上皮内低度病变上皮内高度病变和鳞状细胞癌。同时对每一种病变的处理提出建议从而为临床选择治疗方案提供依据。

预防知识4.1晚婚、晚育20岁以前结婚或发生性行为者患宫颈癌的比例比其他妇女高2倍18岁以前结婚生育者则高3倍。

4.2防止不洁性交性生活紊乱者危险性高23倍。

4.3治愈慢性妇科疾病宫颈慢性炎症、糜烂、白斑、滴虫和霉菌感染等都可

能诱发宫颈癌。

4.4清除包垢男性阴茎包皮过长容易积垢刺激宫颈因而必须每天清洗。

4.5定期检查要定期进行妇科检查尤其是45岁以上的妇女每23年应作1次妇科检查和宫颈刮片诊断以便早期发现尽早治愈。

4.6讲究饮食多摄取β胡萝卜素蕃薯、胡萝卜、无头甘蓝、番茄红素红葡萄柚、红椒、番茄、叶酸天冬、菠菜、小麦胚和维生素C哈密瓜、菜花、浆果。

第二篇：RDB和HC2的介绍

RDB和HC2的介绍

反向斑点杂交（RDB）工作原理，利用生物素等标记的探针和特意性扩增PCR产物(靶DNA序列)杂交。但是不同于一般的斑点杂交。一般的点印迹杂交是靶DNA固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上，标记的探针和靶DNA杂交显色。这种方法每次杂交反映只能判断待测DNA是否含有某一种探针的同源序列，对于某些基因座位可能含有十几至几十个等位基因(如HLADRB位点或地中海贫血突变基因等)，用这种点杂交方法就会很繁杂，甚至可能做不到。而RDB正是解决了这一难题。RDB是先将待用的探针分别点到硝酸纤维素膜或尼龙膜上，每个探针一个点并编上号，再将待测的DNA样本(一般是经PCR特意性扩增的产物，在PCR引物5’端预先进行生物素标记，使扩增产物相应标记有生物素)与之杂交，这样待检样本就会与具有同源序列的探针结合，经洗涤去除未结合的DNA样本，由于待测的DNA样本具有生物素类的标记物，结合了待测DNA的探针点上就带有生物素类的标记物，再经相应的显色反应就能显出杂交信号。这样一次就可以判断某一基因座位的大部分或全部等位基因，因此利用这样的工作原理还可以用于基因分型、病原体检测、肿瘤研究等。

杂交捕获法（HC2），先用试剂中的RNA与标本中的HPV病毒DNA杂交。RNA的稳定性是很难保证的。再用微孔板中的包被抗体捕获RNA-DNA杂交体，通过化学发光进行检测。由于所检测对象为13种病毒中的一种或几种，RNA-DNA杂交体的抗原性是很难保证的。由于没有扩增放大，该检测灵敏度低，且无法进行HPV分型。HC2是唯一获美国FDA认证可用于临床的HPV DNA检测技术,已获欧洲CE及中国SDA认证。

有研究表明HC2检测法能定量地检测到HPV病毒的DNA，具有灵敏度高、特异性好、重复性和客观性强的等优点，无需严格的实验室环境及复杂的实验室技能，无需基因扩增，免除了交叉污染的后顾之忧。但是HC2是进口试剂，成本高，目前在我国不能用于全面普及筛查。

RDB检测具有快速、简便、高灵敏性、特异性强的特点，尤其是在基因分型和病原体检测方面有其独特的优势。另一突出优势是成本较HC2检测低。

以下是集中HPV检测方法的比较