药理学设计性实验

时间:2024.3.23

药理学设计性实验

实验一、石菖蒲的镇静作用

【目的】

1、应用小动物自主活动学习镇静药物的实验方法。

2、应用小动物自主活动仪,研究地西泮、石菖蒲对小鼠自发活动的影响。

【原理】小动物自主活动仪的原理:在活动箱内,将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上,动物在箱内每活动一次,感应电流发生改变,经过放大装置,使电脉冲驱使继电器启动,通过记录器记录动物活动次数。

地西泮是镇静催眠的代表药。石菖蒲具有宁心安神作用,其挥发油对中枢有广泛的抑制作用。本实验以小鼠自发活动次数为指标,观察药物的镇静作用。

【动物】小鼠6只,实验前禁食12h。

【药品】0.05%地西泮溶液,石菖蒲水煎液,生理盐水

【主要器材】动物自主活动仪1台,电子称1台,1ml注射器2支,烧杯2杯。

【方法】将6只动物随机分为甲乙丙组,甲组灌胃生理盐水,乙组灌胃石菖蒲水煎液(连续两天),丙组灌胃地西泮1次,0.2ml/10。给药后1小时各组动物放入小动物自主仪,先适应2分钟,再记录5分钟内小鼠自主活动次数。

【结果】地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响。(结果见表1)

表1 地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响

组别

生理盐水组

地西泮组

石菖蒲组 动物数 自主活动次数

【注意事项】1、实验室要尽量保持安静,以免惊动动物使自主活动次数增多。

2、实验室温度应在20-25℃之间。

参考文献:

[1] 胡锦官,顾健,王志旺.石菖蒲及其有效成分对神经系统作用的药理研究[J].中药药药理与临床.1999.15(30:19

[2] 刘新民.石菖蒲的研究现状[J].中医药研究.1992.(4):57

[3] 吴启端,吴清和,石菖蒲的药理学研究进展[J].2006,17(6):477-480

实验二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用

【目的】

1、学习小鼠跳台原理和操作,正确运用跳台实验仪器对小鼠进行学习记忆能力行为学测试。

2、观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效作用。

【原理】鼠跳台实验装置由DT-200小鼠跳台测试箱和DT-200小鼠跳台测试仪组成。测试箱由6个小房间构成,一次可同时试验6只动物,每个小房间有一橡皮台,箱底是可通电的铜栅,在训练期通电小鼠跳下平台在箱底不断被电击,这个过程中小鼠获得记忆,24 h后测试时观察小鼠第一次跳下平台的时间和5 min内跳下平台的次数,比较各组老鼠记忆保持的能力。

戊巴比妥钠能造成小鼠学习记忆障碍。石菖蒲具有开窍醒神,宁心安神的作用,能够促进学习记忆。本实验以小鼠跳下潜伏期及5min内错误次数作为指标,观察药物对小鼠学习

记忆能力影响作用。

【动物】小鼠6只

【药品】生理盐水、0.08g/ml盐酸多奈齐、石菖蒲挥发油乳浊液、0.5%戊巴比妥钠溶液

【主要器材】小鼠跳台仪1台,电子称1台,1ml注射器2支。烧杯2只。

【方法】按小鼠跳台法筛选6只合格小鼠(2~60s)。将6只小鼠随机分为甲乙丙组,分别灌胃生理盐水、盐酸多奈齐、石菖蒲挥发油乳浊液,每天一次,0.1mg/ml,连续14天。第15天给药1h后,分别腹腔注射0.1mg/g,15min后将6只小鼠分别放入反射箱内,先适应3min,然后通电。训练5min并记录5min内跳下的错误次数。24h后重新测试,重测时把小鼠放到跳台上,记录小鼠第1次跳下时在跳台上的停留时间,即为潜伏期,并记录5min内的出错次数。测试时若小鼠停留在平台上超过3min,其潜伏期按180s计。

【结果】盐酸多奈齐、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用。(结果见表2)

表2 盐酸多奈齐、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用

组别

生理盐水组

盐酸多奈齐

石菖蒲挥发油乳浊液 动物数 潜伏期 训练时5min内出错次数 测试时5min内出错次数

参考文献:

[1] 徐叔云,卡如濂,陈修.药理实验方法学(第三版).北京:人民卫生出版社,2002,413-550.

[2] 胡锦官,顾健,王志旺.石菖蒲及其有效成分对学习记忆的实验研究.中药材[J],1999,22

(11):584-585

[3] 程秀娟,等.脑血管扩张剂-尼莫地平、硝苯吡啶和长春胺对大鼠和小鼠记忆障碍的改善作用[J].药学学报,1986,21(10):731

实验三、石菖蒲的抗癫痫作用

【目的】

1.学习癫痫药物的实验方法

2.研究石菖蒲水煎液对戊四唑(PTZ)所致癫痫小鼠的作用

【原理】一般认为 石菖蒲的挥发油抗癫痫的作用最强,其中化学成分较多a-细辛醚是其主要有效成分之一,用于急性传染病、麻醉药及巴比妥类药物中毒时引起的呼吸抑制、急性循环衰竭。大量可致惊厥。

【动物】小鼠, 18~ 20g, 雄性实验前禁食12h

【药品】0.07%戊四唑,石菖蒲醇溶液,生理盐水

【主要器材】注射器,灌胃针头,烧杯,天平。

【方法】用PTZ腹腔注射小鼠,连续5天,建立癫痫小鼠模型。将小鼠随机分成2组, 每组2 只。受试药物组以石菖蒲醇溶液(10g/kg)灌胃3d, 每天2 次(上、下午各一次) , 对照组给予生理盐水(10g/kg), 第4d 上午给药一次( 给药前精确称重) , 末次给药30min 后开始实验, 腹腔戊四唑(PTZ)(40mg/kg),记录小鼠癫痫潜伏期、癫痫持续时间、死亡率和死亡时间等指标。

【结果】石菖蒲对戊四唑所致惊厥小鼠的影响。(结果见表3)

表3石菖蒲对戊四唑所致惊厥小鼠的影响

药物

石菖蒲醇溶液

生理盐水 动物数(n) 剂量(g/kg) 癫痫潜伏期 死亡时间

参考文献:

[1] 吴启端, 吴清和, 石菖蒲的药理研究进展 [J]. 中药新药与临床药理2006.17(6):477-480

[2] 陈莉,廖卫平,等,石菖蒲水煎液抗癫痫动物模型的药效学[[J].广州医学院学报.2002,30

(3):13

[3] 周大兴,包祖晓,吴雄生,等.石菖蒲醇提取物的抗癫痫作用[J].中国现代应用药学杂志,1999,16(2):19

[4] 唐洪梅, 席苹. 石菖蒲不同部位镇静抗致惊厥作用实验研究[J]. 中国实验方剂学杂志,2004, 10: 45-47.


第二篇:药理学设计性实验


药理学实验设计

1. 实验项目名称:奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用

2.国外研究现状:胃溃疡是临床常见病,为研究其发病和治疗机制,国内外业已建立起多种胃溃疡小鼠动物模型,有的模型在中医药研究中亦被广泛引用。但研究中存在的突出。奥美拉唑对小鼠水浸应激性溃疡的形成具有很强的抑制作用,表现为溃疡数和溃疡发生率下降,且呈量效关系。

国外临床研究表明,奥美拉唑钠对胃溃疡的疗效明显优于H+受体拮抗剂,表现为起效快,症状消失迅速,用H+受体拮抗剂无效的患者改用本药可得到满意的疗效。

3.实验原理 :利血平是肾上腺素能神经元阻断性抗高血压药。用药后交感神经系统的功能受到遏制,副交感神经系统的功能相对占优势,结果出现利血平的副作用,引发溃疡,因此在本实验中引用利血平制作小白鼠的胃溃疡模型。

奥美拉唑选择性性地作用于胃粘膜壁细胞,抑制处于胃壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+-K+-ATP酶的活性,从而有效地抑制胃酸的分泌,起效迅速,适用于胃及十二指肠溃疡,返流性食管炎和胃泌素瘤。由于H+、K+-ATP酶是壁细胞泌酸的最后一个过程,故本品抑酸能力强大,有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。 它不仅能非竞争性抑制促胃液素、组胺、胆碱及食物、刺激迷走神经等引起的胃酸分泌,而且能抑制不受胆碱或H2受体阻断剂影响的部分基础胃酸分泌,对H2受体拮抗剂不能抑制的由二丁基环腺苷酸(DcAMP)刺激引起的胃酸分泌也有强而持久的抑制作用。显效快,可逆,且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。本品对胃蛋白酶分泌也有抑制作用,对胃黏膜血流量改变不明显,也不影响体温、胃腔温度、动脉血压、静脉血红蛋白、动脉氧分压、二氧化碳分压及动脉血pH。有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。显效快,可逆,且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。用于胃及十二指肠溃疡、反流性或糜烂性食管炎、佐-埃二氏综合征等,对用H2受体拮抗剂无效的胃和十二指肠溃疡也有效。 用于胃及十二指肠溃疡、反流性或糜烂性食管炎、佐-埃二氏综合征等,对用H2受体拮抗剂无效的胃和十二指肠溃疡也有效。本实验采用奥美拉唑抗利血平引起的胃溃疡。

4.实验目的及意义:观察奥美拉唑对利血平引起的胃溃疡治疗效果。近年来,随着强效抑制胃酸分泌的H2受体阻断剂和胃黏膜保护剂等药物的开发,消

化性溃疡的死亡率已经逐年降低了。容易产生溃疡的部位胃主要可分为胃体部(上2/3)和幽门部(下1/3)两个部分,胃溃疡大多发生在幽门窦胃角部附近。随着年龄增长,易发生溃疡的部位将逐渐移向胃体部上部的食管附近。十二指肠溃疡多半发生在靠近胃的十二指肠球部。

近年来的实验与临床研究表明,胃酸分泌过多、幽门螺杆菌感染和胃粘膜保护作用减弱等因素是引起消化性溃疡的主要环节。胃排空延缓和胆汁反流、胃肠肽的作用、遗传因素、药物因素、环境因素和精神因素等,都会引起消化性溃疡的发生。而奥美拉唑能有效治疗消化性溃疡,防止溃疡的进一步恶化。

5.实验材料与方法

5.1实验材料:

奥美拉唑10mg/kg 利血平1 mg/ml 小白鼠(30只) 生理盐水 解剖镜 注射器 天平 鼠笼 1%的甲醛液 解剖器材

5.2实验方法:

5.2.1 取雌、雄各半体重相近的小白鼠40只,随机分为4组(1组为空白对照组,2组为奥美拉唑组,3组为利血平组,4组为利血平+奥美拉唑组),禁食不禁水24 h。

5.2.2 第一组禁食不禁水,第四组腹腔注射给药利血平注射液0.1 mg/10 g,24h后对第四组腹腔注射奥美拉唑10mg/kg。第二组腹腔注射给药奥美拉唑10mg/kg,第三组腹腔注射给药1 mg/ml利血平注射液0.1 mg/10 g。

5.2.3 12h后取出,颈椎脱位处死。打开腹腔,结扎贲门和幽门并经胃壁向胃腔内注入1%的甲醛液2m1,将胃取出浸入1% 甲醛液中,30min后沿胃大弯剖开,解剖显微镜下计数胃部出现的溃疡点数目。

5.2.4记录并比较四组小白鼠胃部溃疡点数目。

5.3数据处理

组别 剂量 动物数/只 溃疡指数/ mm2(x±s) 1

2

3

4

【注意事项】

1. 实验时4组小白鼠注射药液时间应接近,即实验应快速完成。

2. 实验应选用健康,无怀孕,体重相近的雌、雄各半。

3.各项实验用的注射器及针头应注意区分,以免污染影响实验结果。

4.药物注射剂量要准确。

6.参考文献

【1】 卢文丽 方肇勤 潘志强等;6种胃溃疡小鼠模型的征候特征及比较;上海

中医药杂志;2007 41(8) 64-66

【2】 薛淑英 陈思维 吴静生等;奥美拉哇抗实验性胃溃疡的作用;中国医药工

业杂志;1995,26(2) 65-66

【3】 刘昌官 林中明 褚军等;国产奥美拉唑抑制胃酸分泌和抗胃溃疡作用;

上海实验动物科学1997,17( 4) 234~236

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