顶岗实习报告(10000字)

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河 北 化 工 医 药 职 业 技 术 学院

顶岗实习的岗位技术总结报告

石药集团河北中润制药厂实习报告

姓 名

专 业 生物化工工艺

班 级生工30901

校内指导教师 崔润丽

校外指导教师实习时间 2011-08

制药工程系

实习单位: 石药集团河北中润制药有限公司

前言

石药集团河北中润制药有限公司-简介

石药集团河北中润制药有限公司坐落于河北省省会石家庄市,注册地址位于石家庄市丰收路47号,是世界最主要的抗生素原料供应商。公司成立于19xx年,是石药集团控股的香港中国制药集团有限公司的境内投资子公司,属于中外合资企业。公司现有员工3200余人,全部人员经过严格的GMP知识、制药技能的培训,具有持续创新的工作能力。中润是中国国内制药企业外资投资额最大的公司。

公司拥有青霉素、头孢菌素、生物酶、碳青霉烯四大系列40余个产品。青霉素系列产品主要包括青霉素钾工业盐、青霉素钾、青霉素钠、6-APA、阿莫西林、氨苄西林、氨苄西林钠,产能和市场份额位居世界抗生素前列。头孢菌素系列主要包括中间体7-ACA、头孢曲松钠、头孢唑林钠、头孢哌酮钠、头孢噻肟钠等。主打产品7-ACA年产能世界第一。中润也是唯一拥有锌盐化学法、钠盐化学法和酶法三种工艺生产7-ACA的企业

工作范畴:原材料的入厂合格检验、发酵过程每隔6小时总糖测定,发酵过程每隔6小时氨氮测定。配料的氨氮、总糖、还原糖、氨基氮的测定;霉菌组实验:测定生产过程发酵液的效价和杂质等;提炼组实验:测定结晶岗位的脱脂液、稀释液的水分、效价、PH值;提炼岗位的FAB、转化岗位的钠盐母液、钠盐转化液、钠盐溶解液等样品的效价、水分和含量;无菌室的丁醇、丁醇水、乙酯、乙酯水、钠盐母液的水分、效价、PH值;还测定回收岗位的丁醇、丁酯、乙酯半成、品酯化成品、酯化割头、废乙酯的含量水分和含量;原材料:玉米浆、原材料、液糖聚合物等的含量、总氮、干物质、折光率。

目录

第一章 青霉素钠中间体

一.钠盐溶解液的测定………………………………………………………………………1

二.钠盐转化液的测定………………………………………………………………………1

三.钠盐结晶母液的测定……………………………………………………………………1

第二章 提炼岗位

一.提炼实验室需测定的项目………………………………………………………………2

二.实验用到的仪器…………………………………………………………………………2

三.成品丁酯的测定…………………………………………………………………………2

四.硫酸含量的测定…………………………………………………………………………3

五.Na2CO3含量的测定………………………………………………………………………3

六.脱脂液的测定……………………………………………………………………………3

七.稀释液的测定……………………………………………………………………………3

八.丁醇结晶母液的测定……………………………………………………………………4

第三章 青霉素效价和苯乙酸残量的测定………………………………………………5

一.仪器与材料………………………………………………………………………………5

二.测定步骤…………………………………………………………………………………5

三.仪器的维护及正确使用…………………………………………………………………7

四.流动相的配制……………………………………………………………………………11

五.测定过程中所遇到的问题………………………………………………………………11

第四章 结语…………………………………………………………………………………12

第五章 实习心得……………………………………………………………………13

第一章 青霉素钠中间体

第一节 钠盐溶解液的测定

1.效价:吸取样品10ml溶于100ml容量瓶中,加纯化水稀释至刻度摇匀,用制备好的样品冲洗旋光管2~3次,装满样品放入旋光仪测定旋光度;

公式:效价(μ/ml)=α×5580×10

2.水分:取样20μl注入自动水分滴定仪测定读取显示屏上的数据;

第二节 钠盐转化液的测定

1.效价:吸取样品10ml溶于100ml容量瓶中,加纯化水稀释至刻度摇匀,用制备好的样品冲洗旋光管2~3次,装满样品放入旋光仪测定旋光度;

公式: 效价(μ/ml)=α×5750×10

2. 水分:取样20μl注入自动水分滴定仪测定读取显示屏上的数据;

3.PH:纯化水冲洗电极用滤纸拭干,放入样品中测PH值,读取显示屏上的数据;

4.K﹢:取两滴样品于滴定板上,加入一滴钴亚硝酸钾,判定:有黄色漂浮或黄色沉淀,证明有K﹢,判为不合格,没有变化,证明没有K﹢,判为合格;

第三节 钠盐结晶母液的测定

1.效价:吸取样品10ml溶于100ml容量瓶中,加纯化水稀释至刻度摇匀,用制备好的样品冲洗旋光管2~3次,装满样品放入旋光仪测定旋光度;

公式:效价(μ/ml)=α×5580

2.水分:取样20μl注入自动水分滴定仪测定读取显示屏上的数据;

第二章 提炼岗位

第一节 提炼实验室测定的项目

1.回收岗位:丁醇、丁酯、酯化成品、乙酯半成品、废乙酯、酯化割头;

2.无菌室:丁醇、丁醇水、乙酯、乙酯水、结晶母液、转化液;

3.过滤:乙醇、乙酯;

4.提炼:FBA、乙酯、硫酸;

5.碱化:FBA、Na2CO3、K2CO3;

6.结晶:脱脂液、稀释液

7.制氺:纯化水;

第二节 所用到的仪器

水分滴定仪、旋光仪、电导仪、高效气相色谱仪;

第三节 成品丁酯的测定

1.水分检测:准确吸取样品20μL再按START键然后拔下进样口处塞子迅速将样品注射到水分阳极池中,滴定仪开始滴定并显示结果,水分滴定仪编号MEB08445,水分%=0.01%水分%=0.01%,两次平均值=0.01%。内控标准水分≤0.5%,结论:合格。

2色级测定:将澄清透明的样品25ml加入到250ml比色管中,与铂-钴标准比色液比较,得出结果,色级=5号,铂-钴标准比色液批号13-S-Co-101201内控标准色级≤20号,结论:合格。

3含量测定:将液体注入到气相色谱仪中分析,色谱条件:柱子温度70℃以4℃/min的速率升温到110℃,检测器温度200℃,进样口温度200℃,进样量0.3μl,气相色谱仪编号C11324010245,色谱柱编号us8802935H,色谱图标号丁醇12,正丁醇含量=63.36%正丁醇乙酸丁酯含量之和=99.72%,其他单杂含量=0.06%,内标标准丁醇含量≥65.0%,正丁醇乙酸丁酯含量之和≥98.0%,其他单杂含量≤0.5%,结论:不合格。

第四节 硫酸含量的测定

操作过程:吸取样品1ml加纯化水约30ml加酚酞指示剂2滴,用氢氧化钠滴定液滴至微红色;

计算公式:含量%=CNaOH?VNaOH?0.049

V样×100%

合格标准14.00~18.00%

第五节 Na2CO3含量的测定

操作过程:精密吸取样品1ml于三角瓶中,加纯化水30 ml加甲基橙指示剂2滴,用盐酸滴定液滴定至棕红色为终点; 计算公式:含量%=CHCl?VHCl?0.053

V样×100%

合格标准:5.00~15.00%

第六节 脱脂液的测定

1.效价:吸取样品5ml溶于50ml容量瓶中,加纯化水稀释至刻度摇匀,用制备好的样品冲洗旋光管2~3次,装满样品放入旋光仪测定旋光度;

公式:效价(μ/ml)=α×5580×10

2.酯含量:取滤后样品1ml,加入1mol/L氢氧化钠和中性乙醇各10ml放20min后加0.5%酚酞2滴用0.500mol/L盐酸滴定;

公式;酯含量%=

(V空白-V盐酸-效价V样品/B?C盐酸?0.116×100%

第七节 稀释液的测定

1. 效价:吸取样品5ml溶于50ml容量瓶中,加纯化水稀释至刻度摇匀,用制备好的样品冲洗旋光管2~3次,装满样品放入旋光仪测定旋光度;

公式:效价(μ/ml)=α×5580×10

2. 水分:取样20μl注入自动水分滴定仪测定读取显示屏上的数据;

3. PH:纯化水冲洗电极用滤纸拭干,放入样品中测PH值,读取显示屏上的数据;

第八节 丁醇结晶母液

1.效价:过滤用滤后样品冲洗旋光管2~3次,装满样品放入旋光仪测定旋光度; 公式:效价(μ/ml)=α×5580

2.水分:取样20μl注入自动水分滴定仪测定读取显示屏上的数据;

第三章

1.仪器 发酵液中青霉素效价及其苯乙酸残量的测定(高效液相色谱法)第一节 仪器与材料

安捷伦高效液相色谱仪、戴安高效液相色谱仪、Waters515液相色谱仪;

2.材料

401~415十五个大发酵罐的青霉素发酵液和307~310四个中级发酵罐中的青霉素发酵液,以及302、306小发酵罐中的青霉素发酵液;

第二节 测定步骤

1.1原理:用高压输入液泵把流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样器进入样品。由流动相带入色谱柱内,在柱内各组分被分离后,依次进入检测器变成电信号,由化学工作站记录为色谱峰和数据。

1.2仪器与试剂:高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗仪、溶剂过滤器、PH计、C18色谱柱、1ml移液管、2ml移液管、烧杯、量筒、50ml容量瓶、100ml容量瓶、注射器、0.45μm微孔滤膜、甲醇(色谱纯)、磷酸二氢钾(分析纯)、磷酸(分析纯)。

1.3试剂配制

磷酸盐缓冲液:称68g磷酸二氢钾于烧杯中加1000 ml纯化水使溶解,摇匀,用磷酸调节PH至3.5即得68g/L磷酸二氢钾缓冲液。

5%甲醇水:用量筒分别量取色谱纯甲醇50ml和纯化水950ml混合均匀,用0.45μm的滤膜过滤后备用。

流动相:以68g/L磷酸二氢钾溶液-纯化水-甲醇(100:500:400)为流动相;经0.45μm微孔滤膜过滤后备用。

1.4色谱条件

色谱柱:0DS,5μm,250mm×4.6mm

流速:1.0ml/min

检测波长:225nm

进样量:20μl

柱温:30℃

1.5系统适用性试验:将对照品溶液连续5次注入高效液相色谱仪中,记录色图谱色谱峰流出顺序为苯乙酸、青霉素,而色谱峰之间的分离度应大于1.5,记录峰面积计算RSD,苯乙酸峰面积的RSD小于10.0%,青霉素峰面积的RSD小于2.0%

1.6操作过程

1.6.1对照品溶液的制备:精密称定苯乙酸对照品25mg于50 ml容量瓶中,加水稀释至刻

度摇匀,做储备溶液A;精密称定青霉素对照品25mg于50mg容量瓶中,加纯化水溶解;精密吸取0.5ml储备液于该容量瓶中,然后加纯化水稀释至刻度,摇匀。

1.6.2供试品溶液的制备:根据发酵液的生长周期,参考下表取过滤好的发酵液,精密量取相应量。置于规定体积的容量瓶中,加纯化水溶解并稀释至刻度,摇匀。

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将对照品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后,取20μl注入液相色谱仪。连续进样两次,记录色谱峰面积,将供试品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后,取20μl注入液相色谱仪记录色谱峰面积。

1.7计算结果

1.7.1青霉素效价(μ/ml)

效价=W对照?P?1598?1.1136?A样品?D样品

A?

式中 A对照:对照品溶液中青霉素的峰面积

A样品:发酵液样品溶液中青霉素的峰面积

W对照:青霉素钾对照品的质量g

1598:青霉素钾的理论效价

1.1136:青霉素钾与青霉素分子量的比值

P:青霉素对照品的含量

D样品:样品的稀释倍数

50:对照品溶液定容后的体积ml

1.7.2苯乙酸含量(μg/ml)

苯乙酸含量=W对照?P?100?A样品?D样品

A对照?5000

A对照:对照品溶液中苯乙酸的峰面积

A样品:发酵液样品溶液中苯乙酸的峰面积

W对照:苯乙酸对照品的质量mg

P:苯乙酸对照品的含量

D样品:样品的稀释倍数

5000:苯乙酸标准品稀释倍数

1.8注意事项

高效液相色谱仪的操作见《高效液相色谱仪使用维护操作规程》检测效价用的样品应于氨氮,氨基氮用的样品分析使用,用移液管转移样品时用滤纸擦后再定刻度。

第三节 仪器的维护及正确使用

Waters515液相色谱仪使用维修操作规程

1仪器简介

1.1本仪器由515泵、waters2487检测器、进样系统、微机色谱工作站、打印机等组成。

1.2生产厂家:美国waters公司

1.3技术指标

流量准确度:±0.1%RSD

流量精度:±0.1%(f=1ml/min.甲醇,压力为1000~2000psi的背压)

波长精度:±n/m

波长重现性:±0.10NM

漂移:1.0×10ˉ4AU/hour/℃(245nm预热1小时)

噪音:单波长≤±0.35×10ˉ5AU(干电池,在254nm时间常数1.0)

2waters液相色谱仪环境要求

2.1通风良好并严格禁止静电;

2.2避免阳光直射;

2.3一起放置的台面应水平无震动;

2.4环境温度:10~30℃应无大的波动;

2.5相对湿度:20~90%

3waters液相色谱仪使用

3.1样品准备

3.1.1液相色谱仪使用前应准备好0.45μm微孔滤膜过滤,并经脱气处理的纯化水,流动相(下简称水、流动相)及色谱纯甲醇(简称甲醇)

3.1.2调整好检测器的检测波长

3.2开机准备

3.2.1依次打开泵、检测器、显示器、微机的电源;

3.2.2将吸滤器放入盛有水的贮液瓶中并封好口;

3.2.3打开泵上的清洗旋钮,用针管从液体出口处抽出约10ml液体关闭清洗旋钮。

3.2.4换洗柱用水,旋开泵旋钮按MENLV键,泵显示PURGE时按RUN/STOP排气。当流路无气泡时,按RUN/STOP键停止排气关泵头旋钮。并按RUN/STOP键运行泵,从泵的面板上按EDIT键,输入流速值XXXml/min应由小到大输入。

3.2.5待流速至设定流速后泵运行约30min后应由大到小降低流速至0.01ml/min将吸滤器从水中取出,放入盛有流动相的贮液瓶。并封好瓶口,流速从0.0ml/min逐渐升至设定流速。

3.3系统操作

3.3.1微机进入显示系统,用鼠标点击start programs millenniu32在文件中指向oracle 打开start database ,或直接输入设定密码,进入主系统操作。

3.3.2双击Millenmin32图标单击login输入use name xxx 及pasword xxx点击ok待大图标又灰转亮,且2487检测器自检完成。

3.3.3在project中选中cfc,双击run samples,在run samples中选中waters-2487按ok

3.3.4单击single在sample name 中输入样品号,function中选inject sample me the set中选2478,在RUN TIME中输入预定测样运行时间,在injection vocume设置10.0

3.3.5选右上角RUN and process continue on fault 单击monitor进行基线预览,等待泵显示压力稳定,屏显示的基线噪声水平符合要求(约需30min)

3.3.6点击红灯abrot待inject亮后点击inject,当仪器显示single inject waitting时即可开始进样。

3.4进样测定

3.4.1将预分析的样品按一定方法处理好后置于洁净小瓶中,用此样品清洗进样针数次,另取一定的样品液,于手动进样器处于inject位时插入进样针。扳手柄至load位推入样品液,迅速扳手柄到inject位置

3.4.2液相色谱仪即开始测定样品,自动记录谱图

3.5数据处理:带测定结束后,打开Milleenninm32主画面,选择Browse project选YYY点击ok。在channels中选样品名后,击rerenl出现图谱击integrecte积分,击peaks得到处理后的结果,用于计算;

3.6关机操作

3.6.1测定结束后,关闭检测器电源;

3.6.2关闭色谱工作站,要将打开的所有窗口逐项的关闭,然后关闭主机、显示器电源;

3.6.3将流动相换成甲醇水,操作同3.2.4-3.2.5,洗柱约30min,更换为甲醇再洗柱60min,关闭515泵电源;

3.6.4清理液相色谱仪及周围卫生罩上机罩;

3.6.5认真填写《液相、气相色谱仪使用记录》和《检验设备维护记录》

4waters液相色谱仪使用注意事项

4.1仪器室内要经常保持通风并保持清洁;

4.2液相色谱仪使用过程中所用的各种液体(水、流动相)和进样用的样品溶液均需经0.45微米微孔滤膜严格过滤,成用液体的贮液瓶定期清洗,保证清洁防止仪器污染;

4.3不锈钢吸滤器要经常超声波清洗保证清洁,滤头要定期清洗。先用清洁的纯化水超半小时,然后换洗柱用水超半小时,安装滤头时不要手碰,以免污染滤头;

4.4洗柱用水不能长时间保存,如果水中有异物,应新配置实用;

4.5为延长检测器氘灯的使用寿命,测定结束后,宜先关闭检测器电源且使用过程中电源不宜频繁开关,氘灯达到其使用寿命时要及时更换;

4.6测定结束后应分别用甲醇水和甲醇清洗色谱柱,防止出现结晶,延长仪器和色谱柱的使用寿命;

4.7液相色谱仪使用过程中要随时记录使用情况,记录内容包括色谱柱的使用情况(如柱型号、柱压)色谱柱的出峰情况(如保留时间,峰面积等)

4.8液相色谱仪使用过程中要注意观察如发现异常应尽快处理,如遇较大故障,仪器不能工作时要及时与厂商联系;

4.9液相色谱仪检定周期为二年,检定有效期前应及时送检;

5常见故障处理和维护保养

5.1泵的保养

5.1.1使用流动相尽量要清洁;

5..1.2进液处的砂芯过滤头要经常清洗;

5.1.3流动相交换时要防止沉淀;

5.1.4避免泵内堵塞和有气泡;

5.2进样器的保养:每次分析结束后,要反复冲洗进样口,防止样品的交叉污染系统压力

过高;

5.3柱的保养

5.3.1柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;

5.3.2当柱子和色谱仪联结时,阔件或管路要清洗干净;

5.3.3要注意流动相的脱气;

5.3.4避免使用高粘度的溶剂作为流动相;

5.3.5进样样品要提纯;

5.3.6严格控制进样量;

5.3.7每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;

5.3.8每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱;

5.3.9若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭;

5.4检测器(UV)的保养

5.4.1紫外灯的保养:在分析前,柱平衡的差不多时;打开检测器在分析完成后马上关闭检测器;

5.4.2样品也要保养

6常见故障及处理

6.1手动进样阀的5.6口漏液时,应检查换转子密闭圈是否损坏;

6.2系统压力超过设定值,系统停机。首先检查流路中的管路是否有打析或液压变形的情况,然后按由近及远的原则检查流路各段确定堵塞位置。顺序为泵到进样器管路,进样器六通阀、色谱柱、检测器出口管,可断开相应接口后启动泵进行测试;

6.3系统压力低,不稳定或无压力;

6.3.1流路中存在气泡执行排气泡操作,排除气泡;

6.3.2流路中有漏液,检查并排除漏点。

6.3.3进出口单向阀污染,清洗或更换单向阀;

6.3.4柱塞杆及密封圈磨损,更换柱塞密封或柱塞杆,建议两个同时更换;

6.3.5进样器六通阀定子或转子密封面磨损,更换定子或转子密封面;

6.3.6流动相打空色谱柱内有气体,设定0.2-0.5ml/min流速,用异丙醇清洗色谱柱直至压力稳定;

6.3.7流通池内存在气泡,堵住排液管出口3~5秒迅速公开,重复操作至压力稳定;

6.4基线噪音大或基线不稳定

6.4.1流动相或流路污染,检查更换流动相,冲洗流路可先断开色谱柱测试,如故障不能排除可判断为流动相或流路污染;

6.4.2色谱柱污染,对色谱柱进行清洗或更换,根据流动相情况先置换色谱柱内流动相,按相似相溶原理选择合适溶剂清洗色谱柱2~3小时测试;

6.4.3流路或检测器中存在气泡,排除气泡;

6.4.4出现密集正负信号,流通池内充满空气排除空气;

6.4.5压力波动,检查排除,漏点清洗单阀;

6.4.6基线漂移检查室内温度或柱温箱温度,冷藏后的流动相使用前应放置室温并脱气;

第四节 流动相的配制

高效液相色谱仪使用的流动相是纯化水、甲醇、磷酸二氢钾按5∶4∶1的比例配制而成的,通常实验室一天要配置2000ml流动相,纯化水和磷酸二氢钾要经过真空抽滤除去杂质,首先用一1000ml的量筒量取1000ml纯化水经过真空抽滤后倒入5000ml的试剂瓶中,然后在量取200ml的磷酸二氢钾经过真空抽滤后倒入试剂瓶中,最后量取800ml的甲醇水倒入试剂瓶中,充分摇动试剂瓶使其充分混匀;

第五节 测定过程中多遇到的问题

1.测定过程中首先要进行青霉素标准品的称量,在称量前电子天平一定要先进行校准,如果校准不得当会导致青霉素标准品称量不准确,青霉素标准品要精确至小数点后四位,标准品偏高会导致测定的发酵液效价偏低,标准品偏高会导致测定的发酵液偏高;

2.测定过程中要严格控制好实验室的温度,温度对样品在色谱仪的出峰时间有影响,温度偏高会导致样品的出峰时间偏后,温度过低会导致样品的出峰时间提前,所以实验室温度一般保持在25℃左右;

3.流动相对样品出峰时间的影响,流动相是甲醇、纯化水、磷酸二氢钾按一定比例配制而成的,甲醇过高会是样品的出峰时间提前;

第四章 结语

从实习至今我在104化验室以实习半年之久,我对化验室的工作有了很多了解,已经熟练掌握了实验室的每项工作,熟悉了实验室的各个实验仪器;比如青霉素发酵液的前

序工作:氨氮、氨基氮、还原糖、硫酸铵的测定,氨氮的测定需要用到水浴锅进行20分钟的水浴加热,A、B两样品试管用橡胶管连接,A试管需放在水浴锅内,水浴锅的温度为80℃,在测样品时两试管连接时不能连接的过于紧密否则会有气泡产生,导致样品测定存在的误差增大;在测苯乙酸的过程中会用到离心机对样品进行离心,离心后的样品会分层,在用移液管吸取上层清液时要注意管尖不能伸到分层的液面以下,否则影响样品的测定;在测定青霉素效价和苯乙酸残量过程中,青霉素标品称量时电子天平一定要进行校准,青霉素标品的重量对青霉素发酵液效价的影响非常大,常导致效价下降,效价只能升不能降否则要重新复样,高效液相色谱仪的柱子里不能存在气泡,测样前要检查机子是否存在气泡,还要严格控制实验室的温度和湿度,温度一般控制在25℃左右,流动相配置时甲醇的含量要严格控制,会影响样品的出峰时间;在提炼实验室使用旋光仪测旋光度时要保护好钠灯,要保持旋光仪内部的清洁,还有旋光管不能漏液否则测得的旋光度偏低。用水份滴定仪测水分时要排尽针里的气泡;原材料的聚合物进行液相测定时,色谱柱一定要先用纯化水冲平后在用流动相冲柱30分钟左右才能进样,玉米浆测总氮时用浓硫酸碳化要时不时的观察回流状况。

第五章 实习心得

进入石药集团中润制药厂已有八个月之久,从一开始的不懂不会到现在的操作熟练,期间经过了一段学习期适应期。进入化验室对我们学分析的来说可谓是对口工作,在学校

是今天天与实验室的瓶瓶罐罐打交道,来到实验室后并没感到陌生,然而经过这几个月的学习时候有了好多见识,在学校不常见或没见过的仪器化验室里就有,使我对仪器分析有了很多的了解。对不同岗位实验的学习使我学习到了好多知识,对好多试剂的性质用途有了深深的了解。更对化验室的危险源了如指掌,在化验室接触的大部分都是有毒有害气体、液体试剂,为了自身的安全考虑我们必须深知这些试剂的危害程度。在化验室工作必须对化验室的各岗位工作牢牢地掌握,以适应轮岗工作。轮岗对我们来说很重要,轮岗也是应对化验室人员变动的有效措施,如果岗位缺人就应该及时轮换以保证化验工作的正常进行,化验室人员变动很频繁。我已经适应了化验室的工作,我在以后会做的更好。



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