ABO血型鉴定实验

                    

1 实验目的及原理

1.1  ABO血型鉴定

血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型，如表1。

表1

2实验器材和药品

（1） 器械 采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔，桌椅。

（2） 药品 标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。

3实验步骤

3.1玻片法ABO血型鉴定

（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。

（2） 细胞悬液制备 从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。

（3） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。

（4） 竹签两头分别混合，搅匀。

（5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。

（6） 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。

图 1

4 注意事项

4.1  ABO血型鉴定

（1）所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。

（2）A及B标准血清绝对不能相混，所用滴管上贴橡皮膏标明A及B、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一侧就不能去接触另一侧。

5结果与分析

5.1  ABO血型鉴定

实验结果如图3所示，该被测者血液遇抗A血清凝集抗B血清补凝集，故该被测者血液中红细胞有A抗原，无B抗原，由此判断该被测者血型为A型。

图4

6思考题

6.1 在无标准血清情况下已知某人为A或B型，用其血去检查未知血型的方法如下：

已知A或B型血中仅含有A或B抗原，则向未知血型的血样中滴加A或B型血时若均凝集最则为AB型，若均不凝集则为O型，若加入A凝集而B不凝集则为A型，否则为B型。

6.2 交叉配血时若主侧不凝集而次侧凝集可以少量输血，其原因主要是：最常见的严重溶血反应，多因受血者血清中的血型抗体（凝集素）作用于输入红细胞膜上的抗原而引起，并非因输入血清中的血型抗体作用于受血者的红细胞所致，而交叉配血中的主次侧为：将供血者的红细胞与受血者的血清（主侧）及受血者的红细胞与供血者的血清（次侧），分别做配血试验，观察有无凝集反应。由于输入的血型抗体可被受血者的血浆稀释，并可被固定组织抗原中和而失效。故临床上配血，主要检查供血者红细胞膜上的血型抗原与受血者血清中的血型抗体是否发生凝集反应。

交叉配血的两侧均无凝集反应，为配血相合，可以输血。主侧出现凝集反应，为配血不合，不能输血，主侧无凝集反应，次侧出现凝集反应，为配血基本相合，进行此种输血时要注意只有在紧急情况下才可输血，但要特别慎重，不可输得太快、太多，并密切观察有无输血反应。

第二篇：A B O 血型鉴定

实验一、A B O 血型鉴定

一、实验目的

1 、观察红细胞凝集现象。

2 、学习A B O 血型鉴定方法， 掌握血型鉴定原理。

二、预习内容

红细胞凝集原因和血型鉴定原理

三、实验原理

A B O 血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A 凝集原的称为A 血型， 存在

B 凝集原的称为B 血型。而血清中还存在凝集素。当A 凝集原与抗A 凝集素相遇或B 凝集原与抗B 凝集素相遇时， 会发生红细胞凝集反应。一般A 型标准血清中含有抗B 凝集素， B 型标准血清中含有抗A 凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应，以确定其血型。

四、实验器材和试剂

受检者血液、A 型标准血清和B 型标准血清。双凹载玻片，采血针， 采血管， 7 5 % 的酒精， 医用棉签， 消毒牙签， 玻璃记号笔， 显微镜等。

五、实验方法与步骤

1 . 取一双凹载玻片， 用记号笔在左上角写“ A ” 字，右上角写“ B ” 字， 中间写受检者的姓名。

2 . 用小滴管吸A 型标准血清， 滴一滴在左侧小凹内。用另一小滴管吸B 型标准血清，滴一滴在右侧小凹内。

3 . 用7 5 % 的酒精棉签消毒受检者的指尖。

4 . 捏紧指尖，用消毒采血针迅速刺破皮肤，深二三毫米。

5 . 待血流出后用采血管吸取血液。各滴一滴在左侧和右侧盛有A 型和B 型标准血清的小凹内。（ 采完血后用消毒的干棉签压迫受检者被采血的指尖以止血）

6 . 取两根消毒牙签，一根用来混合A 型标准血清和血液， 另一根用来混合B 型标准血清和血液。

7 . 静置1 - 2 分钟后，观察有无凝集现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。

8 . 根据凝集现象的有无判断血型。见表：

血型

抗A血清

抗B血清

A

+

-

B

-

+

O

-

-

AB

+

+

六、实验报告要求

报告自己的血型鉴定结果。

七、实验思考题

结合父母及您本人血型，简述人类A B O 血型的遗传特点