生物技术制药总结

时间:2024.3.20

生物技术制药总结

1.什么是生物技术?生物技术包括的主要内容有哪些?

生物技术又叫生物工程,以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,生产出所需产品或达到某种目的的技术。生物技术包括的主要内容有基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程等

2.什么是生物技术药物?按照它们的生化特性可以分为哪几类?

生物技术药物采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物,主要是重组蛋

1按用途分类:治疗药物、预防药物、作为诊断药物(免疫诊断试剂、白或核酸类药物 分类:○

酶诊断试剂、器官功能诊断药物、放射性核素诊断药物、诊断用单克隆抗体(McAb)、诊断用

2按作用类型分类:细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单DNA芯片 ○

3按生化特性分类:克隆抗体药物、反义核酸药物、RNA干扰(RNAi)药物、基因治疗药物 ○

多肽类药物、蛋白质类药物、核酸类药物、聚乙二醇(PEG)化多肽或蛋白质药物

3.生产用动物细胞的种类有哪些? 原代细胞,传代细胞系,转化细胞系,工程细胞系

4.与微生物细胞、植物细胞相比,动物细胞的体外培养有何特点?

1比微生物细胞大得多,无细胞壁,抗机械强度低,对剪切力敏感,适合环境能力差 ○2倍○

3对培养基要求高,易受微生增时间长,生长缓慢,正常二倍体细胞的生长寿命是有限的 ○

4生长大多需贴附于基质,相互粘连以集群形式存在,并物污染,培养时常需添加抗生素 ○

5多半将产物分泌心在细胞外,6对蛋白质的合成条件和有接触抑制现象 ○便于收集和纯化 ○

修饰功能与细菌不同 。动物细胞可对蛋白质进行完善的翻译后修饰,特别是糖基化,与天然产物更一致,更适于临床应用

5.单克隆抗体的制备过程大体上可以分为哪几步?

可分抗原的制备、动物的免疫、B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞、筛选杂交瘤细胞、筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞、杂交瘤细胞的克隆化、体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆、单抗的纯化及鉴定

6.单克隆抗体的制备的原理?

单克隆抗体的制备原理是基于动物细胞融合技术得以实现的,即骨髓瘤细胞与B细胞的融合。骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖,但不能分泌特异性抗体;而抗原免疫的B细胞能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖,将免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞,继承了两个亲代细胞的特性,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。

7.酶分离纯化的一般程序。

酶分离纯化的一般程序主要包括原材料的选择和预处理、酶的分离、酶的精致和酶的浓缩干燥及结晶等步骤。

8.与游离酶相比,固定化酶有何优缺点?

游离酶的缺点:酶是蛋白质,稳定性差(热、酸碱、有机溶剂对其有影响)。酶不能回收,无法重复使用。产物中混杂酶蛋白,分离纯化困难。 固定化酶:优点:(1)可提高酶的稳定性。(2)酶能回收,易与产物分离,可反复使用。缺点:(1)存在扩散限制。适于催化小分子物质。(2)酶活性下降。固定化细胞:优越性:(1)降低成本,省去酶的分离纯化工作:(2)既可作为单一酶,也可作为复合酶系完成部分代谢过程。局限性:(1)细胞内多种酶的存在,会形成不需要的副产物。(2)细胞膜、细胞壁和载体都存在着扩散限制作用。

9.微生物转化中药的的基本途径有哪些?

1微生物将中药中的有效成分经代谢形成新的化合物 ○2微生物将原转化途径归纳下来有:○

3微生物产生的某些次级代谢产物与中药中的本没有活性的化合物转化成有活性的化合物 ○

4微生物在中药的特殊环境中有可能改变自身的代谢途某些物质发生反应形成新的化合物 ○

5微生物的分解作用有可能将中药中径,从而形成新的活性物质或者改变活性成分的比例 ○

的有毒物质降解,从而降解药物的毒副作用。利用微生物转化来炮制中药,有可能较大幅度的改变药性,提高药效,降低毒副作用,扩大适应症。

10.甾体药物的微生物转化反应有何特点。

不同于常规的发酵过程,甾体药物大都不溶于水,且终反应产物对改造位点的专一性要求高。

11.什么是蛋白质的化学修饰?它有何意义?

从广义上讲,凡是通过基团引入或去除导致蛋白质一级结构发生改变的过程,统称为蛋白质

1增大分子量,避免肾小球滤过 ○2免疫原性降低或消的化学修饰。意义:循环半衰期延长○

3物理、4增加药物溶解度,失,毒副作用减少 ○化学和生物稳定性增强 ○延长体内水解时间

12,。蛋白质药物的PEG化修饰的修饰策略。

利用活化的修饰剂对蛋白质进行修饰是活化的修饰剂与蛋白质分子功能集团的反应,这些功能集团主要是蛋白质的氨基、巯基、羧基等,针对不同的功能集团和修饰所需达到的目的,

1随机修饰:氨基(游离赖氨酸残基-NH2) ○2定点修饰:针对特往往采取不同的修饰策略。○

定基团或专一位点进行修饰,有利于保持蛋白质药物活性,质量易控。氨基修饰(N-末端-NH2);巯基修饰(-SH高亲和性);羧基修饰(-COOH)

分析题

1.基因工程制药中,三大主要基因工程表达体系有何不同?请完善如下表格内容:

2.基因工程药物与化学药物相比,具有什么特点?

基因工程特点:基因重组,通过外源载体将外源基因导入受体细胞实现目的蛋白的表达。 化学药物特点:通过元素之间的组合成一种化合物质,对人类有作用的一类化合物。

3.疫苗的概念、组成及其作用原理。

概念:主要是指将病原微生物(细菌、病毒、真菌、立克次氏体、支原体、衣原体等)及其代谢产物,经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的免疫制剂 组成:具有免疫保护性的抗原如蛋白质、多肽、多糖或核酸等与免疫佐剂混合制备而成。 作用原理:当机体通过注射或口服等途径接种疫苗后,疫苗中的抗原分子就会发挥免疫原性作用,刺激机体免疫系统产生高效价特异性的免疫保护物质,如特异性抗体、免疫细胞及细胞因子,当机体再次接触到相同病原菌抗原时,机体的免疫系统便会依循其免疫记忆,迅速制造出更多的保护物质来阻断病原菌的入侵,从而使机体获得针对病原体特异性的免疫力,使其免受侵害而得到保护 培养特性 4.试设计皮内注射用卡介苗的主要制备流程。 毒力试验

生物技术制药总结

种子批的传代无有毒分 生产用种子与培养基杆菌试验 免疫力试验 种子批的保存 接种与培养

收获与合并 成品

5.请设计青霉素发酵生产的一般流程 综合利用

过滤

6.试分析发酵过程的影响因素及控制。

1菌体浓发酵过程的影响及控制:菌体浓度、营养物质、温度、pH值、溶氧、泡沫、染菌 ○

度—通过控制培养液中营养基质的浓度(基础培养基各成分要有适当配比;通过中间补料调

2营养物质:碳源、氮源—用含有两种碳/氮源的培养基进行控制;磷酸盐整培养基成分) ○

3温度—在发酵不同阶段,采用不—对初级代谢产物及次级代谢产物的控制;补料的控制 ○

4pH值—调节培养基组分,增加缓冲体系;补料;同温度;针对不同条件,采用不同温度 ○

5溶氧—调节搅拌转速和通气率;控制菌体浓度,使细菌比生长速率略高于临界补加酸碱 ○

6CO2—控制通气量;7泡沫—机械消沫;7值 ○控制搅拌速度;控制补料工艺 ○消泡剂消沫 ○染菌—设备无渗漏;管道系统无渗漏;空气净化系统正常


第二篇:生物技术制药试题


生物技术制药试题

1. 生物技术制药

生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。

2. 基因表达

基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。

3. 质粒的分裂不稳定

通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分离不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。一般情况下具有质粒的细胞(即P+细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。

4. 补料分批培养

发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足。

5. 人-鼠嵌合抗体

嵌合抗体( chimeric atibody )是最早制备成功的基因工程抗体。它是由鼠源性抗体的 V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因,然后插入载体,转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。因其减少了鼠源成分,从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应,并有助于提高疗效。

6. 悬浮培养

非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。细胞悬浮于培养基中生长或维持。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单,只要增加体积就可以子。深度超过5mm,需要搅动培养基,超过10cm,还需要深层通入CO2和空气,以保证足够的气体交换。通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于培养液内的培养方法。

7. 贴壁培养

也称为细胞贴壁,贴壁后的细胞呈单层生长,所以此法又叫单层细胞培养。大多数哺乳动物细胞的培养必须采用这种方法。

8. 固定化酶

不溶于水的酶。是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中制成的。酶固定化后一般稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用。便于运输和贮存,有利于自动化生产。

9. 双功能抗体

将识别效应细胞的抗体和识别靶细胞的抗体联结在一起,制成双功能性抗体,称为双特异性抗体。如由识别肿瘤抗原的抗体和识别细胞毒性免疫效应细胞( CTL 细胞、 NK 细胞、 LAK 细胞)表面分子的抗体( CD3 抗体或 CD16 抗体)制成的双特异性抗体,有利于免疫效应细胞发挥抗肿瘤作用。

10. 组织工程

应用生命科学与工程学的原理与技术,在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上,研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的生物替代物的一门新兴学科。

11.生物药物

指包括生物制品在内的生物体的初级和次极代谢产物或生物体的某一组成部分,甚至整个生物体用作诊断和治疗疾病的医药品。

B12.生物制品

指用细菌疫苗制成的供预防、治疗和诊断特定传染病的药品。

13.生物技术药物

采用DNA重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术研制的蛋白质、治疗性抗体或核酸类药物。

14、抗体酶

具催化能力的免疫球蛋白称为催化抗体,即抗体酶。

15. 单克隆抗体

只识别一种表位(抗原决定簇)的高纯度抗体,一般来自单个B淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。

16. 细胞因子

在体内或体外对效应细胞的生长、增殖和分化起调节控制作用的一类物质。化学本质主要是蛋白质和多肽,许多生长因子在靶细胞上有特异性受体,如细胞生长因子和细胞生长抑制因子。

17.微生物的生物转化

指微生物对有机化合物某一特定部位(基团)的作用,使它转变成结构上相类似的另一种化合物。转化的产物不是由营养物质经微生物细胞的一系列代谢过程后产生的,而是利用微生物细胞的酶系对底物某一特定部位进行化学反应形成的。

18. 拷贝法 主要根据抗体生成过程中抗原- 抗体互补性来设计的。

19.引入法 则借助基因工程和蛋白质工程将催化基因引入到特异抗体的抗原结合位点上,使其获得催化功能。

移动基因(movable gene)又叫转位因子(transposable elements),可以在染色体基因组

上移动,甚至可在不同染色体间跃迁,故又称跳跃基因(jumping gene),后来称其为insertion sequences(现在一般叫IS elements)。现在已发现在细菌中存在着三种类型的转位因子,相对分子质量小于2000bp的一般叫插入序列(IS),大于2000bp的称为转位子(Transposon,Tn),第三种类型为噬菌体Mu和D108。

20.化学修饰法 对抗体进行化学修饰,使抗体与催化基团相连。

21.诱导法 是利用反应过渡态类似物为半抗原制作单克隆抗体,筛选出具高催化活性的单抗即抗体酶。

22.分生组织培养(meristem culture)又称生长锥培养,是指在人工培养基上培养茎端分生组织细胞。

23.无性繁殖系(clone)又叫克隆,是指使用母体培养物反复进行继代培养时,通过同种外植体而获得越来越多的无性繁殖后代而言,如根无性系、组织无性系、悬浮培养物无性系等。

24.突变体 细胞本身发生遗传变异或应用诱变处理发生的遗传变异所得的新细胞,即为突变体(mutant)。

25.植物抗毒素(phytoalexins)是指在植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物(根据其功能又称为“后感染防御物质”)。

26.原代细胞:是直接取自动物组织、器官,经过粉碎、消化而获得的细胞悬液。

27.二倍体细胞系:原代细胞经过传代、筛选、克隆,从而从多种细胞成分的组织中挑选并纯化出某种具有一定特征的细胞株。

28.转化细胞系:失去了正常细胞的特点,可以无限增殖。

29.天然培养基:在细胞培养的早期阶段使用的培养基,主要为来自天然的材料如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸液以及羊水、腹水等。

30.编码区是基因功能发挥的结构基因(或称功能基因),调控序列和启动子起调控启动作用,终止的非编码区属于调控基因。

31.限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割双

链DNA双链结构的核酸内切酶。它们主要是从原核生物中分离纯化出来的。

32. 反义核酶 作为一种基因下向调节作用因子,在抑制一些有害基因的表达和失控基因的过度表达上发挥着重要作用。

33.DNA疫苗

是指将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体的免疫系统,从而诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答。

二、问答题

1.、生物药物的药理学特性

(1)、治疗的针对性强

细胞色素c用于治疗组织缺氧所引起的一系列疾病。

(2)、药理活性高

注射用的纯ATP可以直接供给机体能量。

(3)、毒副作用小、营养价值高

蛋白质、核酸、糖类、脂类等生物药物本身就直接取自体内。

(4)、生理副作用时有发生

生物体之间的种属差异或同种生物体之间的个体差异都很大,所以用药时会发生免疫反应和过敏反应。

2.、生物药物在生产、制备中的特殊性有哪些?

(1)、原料中的有效物质含量低:激素、酶在体内含量极低。

(2)、稳定性差:生物药物的分子结构中具有特定的活性部位,该部位有严格的空间结构,一旦结构破坏,生物活性也就随着消失。酶,很多理化因素使其失活。

(3)、易腐败:生物药物营养价值高,易染菌、腐败。生产过程中应低温、无菌。

(4)、注射用药有特殊要求:生物药物易被肠道中的酶所分解所以多采用注射给药,注射药比口服药要求更严格,均一性、安全性、稳定性、有效性。理化性质、检验方法、剂型、剂量、处方、储存方式。

填空题

A克隆真核基因常用的方法有逆转录法 和化学合成法 。

A将抗体转变为酶可通过诱导法、拷贝法、引入法 和化学修饰法 等途径。

B酶固定法中的包埋法可分为网格型 和 微囊型 2种

A噬菌体抗体库的表达载体系统为 λ噬菌体 、 单链丝状噬菌体 和噬菌粒 。 A细胞培养基的三类:天然培养基 、 合成培养基 和 无血清培养基。

鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型 人-鼠嵌合抗体、改形抗体 、Fab抗体

生物技术制药试题

生物技术制药试题

B微生物转化中常用微生物有 细菌 、放线菌 和霉菌 。

、 启始复制子、多克隆位点 和标记基因。

、透析 、层析 和离心 。

B鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型 人-鼠嵌合抗体、改形抗体 、Fab抗体 、单链抗体、单域抗体 和分子识别单位 。

4、蛋白质类药物分离提取方法有:

沉淀法(盐析、有机溶剂、等电点);

按分子大小分离(超滤、透析、层析、离心);

电荷(离子交换、层析、电泳、等电聚焦);

亲和层析法(酶与底物、抗原与抗体、激素与受体)。

5、氨基酸类药物的分离纯化方法

氨基酸的生产:蛋白质水解,盐酸水解迅速、完全,色氨酸被破坏,丝氨酸部分破坏;碱水解易产生消旋作用;酶水解不完全。发酵法,从发酵液中提取。和学合成与酶促合成法,化学合成产物混旋需拆分,酶促合成效果较好。

分离方法:沉淀法(溶解度差异),吸附法(吸附能力差异),离子交换法(所带电荷不同)。

A6、动物核酸类药物主要种类和用途

DNA:能改善机体虚弱疲劳、与细胞毒药物合用可提高细胞毒药物对癌细胞的选择性作用,与红霉素合用,可降低毒性、提高疗效;

RNA:口服可用于精神迟缓、记忆衰退、动脉硬化性痴呆、静注用于刺激造血和促进白细胞生成、治疗慢性肝炎、肝硬化和初期癌症;辅酶A用于动脉硬化、白细胞、血小板减少,肝、肾病等;

ATP:用于心力衰竭、心肌炎、心肌梗死、脑动脉和冠状动脉硬化、急性脊髓灰质炎、肌肉萎缩、慢性肝炎等。

7、试述微生物的生物转化及其特点

答案要点:

微生物的生物转化是指微生物对有机化合物某一特定部位(基团)的作用,使它转变成结构上相类似的另一种化合物。转化的产物不是由营养物质经微生物细胞的一系列代谢过程后产生的,而是利用微生物细胞的酶系对底物某一特定部位进行化学反应形成的。 生物转化的特点:专一性,底物及产物空间结构专一;产量高,一个酶促反应可代替几个化学反应,收率高;反应条件温和,常温常压,可改善工人劳动条件,避免减少使用强酸、强碱或有毒物质;可进行化学法难以进行的反应。

8、基因工程技术生产药物的优点是什么?

答案要点:1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽,为临床使用提供有效的保障;

2、可以提供足够数量的生理活性物质,以便对其生理、生化和结构进行深入的研究,从而扩大这些物质的应用范围;3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质;4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处,可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除;

5、可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。

9、基因工程药物生产的基本过程是什么?

答案要点:基因工程技术就是将重组对象的目的基因插入载体,拼接后转入新的宿主细胞,构建成工程菌,实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。

基因工程药物制造的主要程序是:目的基因的克隆;构建DNA重组体;将DNA重组体转入宿主菌构建工程菌;工程菌的发酵;外源基因表达产物的分离纯化;产品的检验等。 通常将基因工程药物的生产分为上游和下游技术。上游阶段是研究开发必不可少的基础,它

主要是分离目的基因,构建工程菌,主要在实验室完成。下游阶段是从工程菌的大规模培养到产品的分离纯化、质量控制,该阶段是将实验室成果产业化、商品化。

10、克隆真核基因常用的方法有哪几种?

答案要点:克隆真核基因常用的方法有逆转录法和化学合成法。

一、逆转录法

逆转录法就是先分离纯化目的基因的mRNA,再反转录成互补DNA,然后进行互补DNA的克隆表达。从产生该蛋白质的真核细胞中提取mRNA,以其为模板,在逆转录酶的作用下,反转录合成该蛋白质mRNA的互补DNA,再以互补DNA为模板,在逆转录酶或DNA聚合酶作用下,最终合成编码该蛋白质的双链DNA序列,该序列不含内含子。

1、mRNA的纯化

细胞内含有三种RNA,mRNA占RNA总量的2%-5%,相对分子量大小不一致,分离也有很大的困难,但是mRNA的3’末端常含有一多聚腺苷酸组成的末端,长达20-250个腺苷酸,足以吸附于寡聚胸苷酸-纤维素上,从而可以用亲和层析法将mRNA从细胞总RNA上分离出来,可得到纯度较高的mRNA。

2、互补DNA第一链的合成

mRNA的3’末端常含有一多聚腺苷酸序列,可用寡聚脱氧胸苷酸为引物,在逆转录酶的催化下,开始互补DNA的合成。在合成反应体系中加入一种放射性标记的dNTP,在反应中以及反应后可通过测定放射性标记的dNTP掺入量,计算出互补DNA的合成效率,在凝胶电泳后,进行放射自显影分析产物的分子大小,探索最佳反应条件。

3、互补DNA第二条链的合成

先用碱解或核酸酶酶解的方法除去互补DNA-mRNA杂交链中的mRNA链,然后以互补DNA第一链为模板合成第二链,并用核酸酶S1专一性切除单链DNA。

4、互补DNA克隆

载体有两种质粒和噬菌体,根据重组后插入的互补DNA是否能够表达、能否经转录和翻译合成蛋白质,又将载体分为表达型载体和非表达型载体。互补DNA插入片段小于10千碱基对,可选用质粒载体,如大于10千碱基对则选用噬菌体作为载体。

二、化学合成法

较小的蛋白质或多肽的编码基因可以采用人工化学合成法合成,其先决条件是已知目的基因的核苷酸序列,或已知蛋白质的氨基酸序列,按相应的密码子推导出DNA的碱基序列。用化学方法合成目的基因不同部位的两条链的寡核苷酸短片段,再退火成为两端形成粘末端的DNA双链片段,然后将这些双链片段按正确的次序进行退火使连接成较长的DNA片段,再用连接酶连接成完整的基因。 人工化学合成的限制:1、不能合成太长的基因,50-60个碱基对;2、人工合成碱基对时,遗传密码的简并会为选择密码子带来很大的困难;3、费用较高。

11、固定化酶及固定化酶的特点:酶类可粗分为天然酶和修饰酶,固定化酶属于修饰酶,修饰酶类还包括经过化学修饰的酶和用分子生物学方法在分子水平上进行改良的酶等。固定化酶最大特点是既具有生物催化剂的功能,又具有固相催化剂的特性。固相酶还具有以下优点:①可多次使用,而且在多数情况下,酶的稳定性提高。如固定化的葡萄糖异构酶可以在

60~65℃条件下连续使用超过1000h;②反应后,酶与底物和产物易于分开,产物中无残留酶,易于纯化,产品质量高;③反应条件易于控制,可实现转化反应的连续化和自动控制;④酶的利用效率高,单位酶催化的底物量增加,用酶量减少;⑤比水溶性酶更适合于多酶反应。

12、酶反应器操作条件及应用的注意事项酶操作条件底物浓度 、酶浓度、温度、PH、反应液的混合与流动.

注意事项酶 保持酶反应器操作的稳定性

保持反应器中流体的流动方式和状态

防止酶的变性失活

防止微生物的污染

13、两相法培养系统必须满足如下条件:

①添加的固相(如树脂)或液相对细胞无毒害作用,不影响细胞生长和产物的合成; ②产物易被固相吸附或被有机相溶解;

③两相易分离;

④如为固相,不可吸附培养基中的添加成分,如植物生长调节剂、有机成分等。

14、体外培养细胞培养的基本条件:

(1)绝对无菌操作;

(2)足够的营养供应,排除有害物质包括极其微量的离子掺入;

(3)适量氧气供应;

(4)随时清除细胞代谢中产生的有害产物;

(5)有良好的适于生存外界环境,包括pH、渗透压和离子浓度等;

(6)及时分种,保持合适的细胞密度。

15、无血清培养基的优点如下:

①提高了细胞培养的可重复性,避免,避免了由于血清批之间差异的影响;

②减少了由血清带来的病毒、真菌和支原体等微生物污染的危险;

③供应充足、稳定;

④细胞产品容易纯化;

⑤避免了血清中某些因素对有些细胞的毒性;

⑥减少了血清中蛋白对某些生物测定的干扰,便于实验结果的分析。

核酸药物可分为1反义核酸、2核酶、3脱氧核酶、4

生物技术制药试题

抗基因寡核苷酸5裸DNA疫苗6基因药物。

10.抗体药物的特点1 2多样性3 定向性

11.动物细胞培养的条件2PH值3通氧量4防止污染

质粒以三种形式存在: 和 线状双螺旋。

2.动物细胞对生长基质的依赖性,可分为贴壁依赖性细胞 非贴壁依赖性细胞 兼性贴壁细胞

生物药物的结构分类不包括( )

A氨基酸及其衍生物类药物 B细胞生长因子 C 化学合成制品 D酶和辅酶类药物 生物药物的结构分类不包括( ) 。

A糖类药物 B多肽和蛋白质类药物 C脂类药物 D 化学合成制品

不属于抗体酶的催化反应类型的是( )。

A 转酰基反应 B 聚合反应 C Claisen重排反应 D 水解反应

不属于抗体酶的催化反应类型的是( )。

A 聚合反应 B 氧化还原反应 C 顺反异构化反应 D 光诱导反应

不属于基因来源抗体文库的是( )。

A天然抗体文库 B免疫后抗体文库 C半合成抗体文库 D修饰抗体库

基因工程的单元操作顺序是( )。

A.酶切,连接,转化,筛选,验证 B.酶切,转化,连接,筛选,验证

C.连接,转化,筛选,验证,酶切 D.验证,酶切,连接,筛选,转化

cDNA第一链合成所需的引物是( )。

A.PolyA B.PolyC C.PolyG D.PolyT

鸟枪法克隆目的基因的战略适用于( )。

A.原核细菌 B.酵母菌 C.丝状真菌 D.植物

B cDNA法获得目的基因的优点是( )。

A.成功率高 B.不含内含子 C.能纠正密码子的偏爱性 D.表达产物可以分泌 分子杂交的化学原理是形成( )。

A.共价键 B.离子键 C.氢键 D.配位键

若某质粒带有lacZ标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入( )。 A.半乳糖 B.葡萄糖 C.蔗糖 D.5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)。 为了减轻工程菌的代谢负荷,提高外源基因的表达水平,可以采取的措施有( )。

A.将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。

B.在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。

C.降低培养基中的PH值。

D.当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制

不能进行微生物转化的是( )。

A 细菌 B 病毒 C霉菌 D放线菌

菌体生长所需能量( )菌体有氧代谢所能提供的能量时,菌体往往会产生代谢副产物乙酸。

A.大于 B.等于 C.小于 D 未知

促红细胞生长素(EPO)基因能在大肠杆菌中表达,但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素,这是因为( )

A.人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用

B.人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定

C.大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活

D.大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化

三、判断对错

PCR是聚合酶链式反应法的缩写( )

电刺激不能使细胞融合( )

质粒不具有自主复制能力。( )

单克隆抗体就是单链抗体( )

外源基因的高效表达会影响宿主细胞正常的生长代谢。( )

荧光素可以作为免疫诊断试剂的标记物( )

抗体中结合抗原的部位分布在恒定区( )

透析时,若样品液中盐浓度较高,透析袋所留空隙要大一些,防止透析袋胀破。( ) 酶的固定化过程中需要使用载体.( )

因为毒素毒性较大,所以免疫毒素不能用来治疗疾病( )

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