微生物实验心得体会

这学期的微生物实验已经结束，这是我第一次接触到微生物的世界中，以前也只是在书本中学习，但是真正走进它们的世界中是通过这个课程开始的。在开始微生物实验之前我是以为这个实验不会很难，但是通过本学期的学习发现这个课程真的很难。你不仅需要理论知识作为铺垫，你还需要有严谨的实验精神。

第一节课老师给我们介绍了我们本学期微生物实验的几个实验和报告的要求，也让我们了解了微生物实验和以往其他实验的不同。实验步骤虽然很简单，但是往往一个微小的细节处理不当也会导致你整个实验结果的失败。这个我真的深有体会，我们小组的实验结果都很不理想。实验步骤说难也不难，其实无非是先对配置培养液，然后对清洗干净的试管、培养皿以及配置好的培养液进行灭菌，等灭菌完了就放入无菌室进行细菌的接种，最后将接种好细菌和培养液的培养皿放进恒温培养箱进行培养。看似很简单的操作过程我却状况百出。我总结了几点导致这么多次实验失败的地方。第一是操作不够规范，在培养皿中倒入培养液后没有摇匀导致培养基边缘开裂，未等琼脂培养液凝固就倒置导致培养基分布不均匀。第二是理论知识欠缺，没有等培养液冷却至40到50摄氏度就倒入培养基然后马上就接种了细菌，导致细菌已经被烫死。

好在值得欣慰的是最后一个自主实验还是比较成功的。试验以环境对微生物生长的影响为题设计实验，我们小组通过PH值，温度，紫外线照射三个方面进行研究，结果很满意，很明显。大肠杆菌在PH值为7时生长最适，在温度为37℃时生长最佳，紫外线会抑制其生长。

不得不承认，通过这次实验的学习，我们学到了很多，得到了很多，有些是书本上学不到的，只有自己参与了，操作了，才会知道。也要感谢老师对我们的照顾。

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微生物实验总结

本学期的微生物实验包括七个基础实验和一个综合性实验。在基础实验中，我学习掌握了培养基的配制、微生物的分离与纯化技术、细菌的革兰氏染色、不同菌种的形态观察、微生物大小数量的检测、细菌的生理生化反应试验和氧气影响微生物生长的试验等。综合性实验选择了糯米甜酒的酿制，它很好地考察了我在基础实验中学到的知识的掌握程度。下面结合几个我印象较深的实验说说我的心得体会。

我遇到的第一个微生物实验是细菌的革兰氏染色。在做实验之前，负责实验课的老师向我们介绍了实验的基本规范，比如要提前预习、进实验室要穿实验服、爱护仪器等，重点强调做实验勤思考、勤动手。革兰氏染色法大致思路是先将细菌标本用结晶紫染色，再加媒染剂碘液，使它和结晶紫在菌体细胞中形成较大的紫碘复合物，而后用酒精脱色。最后用番红复染。假使细菌细胞不被脱色而保留初染紫色，称为革兰氏阳性菌；若被脱色，而染上复染的红色，则称为革兰氏阴性菌。本实验所用的材料是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。具体的操作步骤（1）先取一片干净的载玻片，用无菌操作方法挑一环菌，在载玻片上做一薄而均匀的菌膜；（2）于空气中自然干燥；（3）加热法固定细菌，防止菌体烧焦变形，准备染色；（4）用结晶紫染色1分钟，加碘液1分钟，用乙醇脱色约20秒，最后番红复染1分钟：（5）置于显微镜下观察，革兰氏阳性菌染成蓝紫色，革兰氏阴性菌染成淡红色。实验过程中，涂片要均匀,不能太厚；脱色时间很重要，过长则脱色过度，会使阳性菌被染成假阴性菌，过短则脱色不够，会使阴性菌被染成假阳性菌。我在观察时发现多数被染为淡红色，很少是蓝紫色的。猜想乙醇脱色环节处理不到位，阳性菌被染成假阴性菌。经过重复实验，终于得到较为理想的实验结果。另一个实验是微生物的分离与纯化及技术。这是一个把成群的菌体分离并得到单菌体的技术。整个实验分两部分，其一是适合菌体生长的培养基平板制作，其二是微生物的接种于培养。制作培养基平板之前，要配制一定量的培养基，注意称量准确，因为是制作固体平板，所以要加入1.5%—2%的琼脂，然后对培养基和空平板进行灭菌。待培养基稍冷却开始倒平板，等待培养基冷却即制成固体平板。土壤菌悬液需要进行101~106倍，然后在酒精灯火焰附近取105、106倍稀释液各0.1ml分别接入不同培养基平板，涂布均匀。涂布完后，把平板倒置在30度下培养，一定时间后，观察生长菌落。分离纯化操作全过程要有无菌意识划线时，接种环要圆滑，避免划破培养基。

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食品卫生综合检验试验总结

食品质量091 金秀建 20xx016521

为期五天（20xx年x月x日-15日）的食品卫生综合检测实验已经告一段落了，在这一周的微生物实验主要包括牛奶中大肠菌群的计数、鸡蛋中沙门氏菌的检验和牛奶中金黄色葡萄球菌的检验三个实验，经过三个综合实验的课程，能让我更能理解试验时要掌握的细节，也要保持头脑的时刻清醒。同时让我对这三种微生物有了更进一步的认识，同时让我也对实验也更加熟悉了。

首先我们做的是大肠菌群的计数，它是采用MPN（最大可能数法）的计数来测定的。大肠菌群的特性为：在37℃，24小时内能发酵乳糖，产酸、产气，好氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。其检测原理为细菌在样品内的分布是随机的，所以检测细菌时，可按概率理论计算菌数。大肠菌群MPN计数的检验程序为样品的稀释、初发酵试验、复发酵试验和最后的大肠菌群最可能数(MPN)的报告。那么在第一天的上午，老师基本给我们讲了实验的原理和步骤，以及一些需要注意的地方，我们便开始计算自己需要配制的实验试剂的量，并且称取试剂的量和清洗所要用的实验器皿，首先配置的是生理盐水和LST肉汤，并且把生理盐水和LST肉汤分装到试管内，盖好盖子包扎好进行灭菌，灭完菌也就到了吃饭时间，等下午来接种培养了。

牛奶样品与生理盐水以1:9的比例进行混合，摇匀后做10倍系列的稀释，做了3个稀释度。随后将三个稀释度的样品匀液以每个稀释度3支试管接种到内装小导管的含LST肉汤的试管中，最后放入恒温培养箱中培养24h。在经过24h的培养后，所有的试管内均产生气体，而后我们要将培养后的有菌落的LST肉汤接种到BGLB肉汤试管中进行培养24-48h，观察后发现所有的BGLB管都产气，颜色也有原来的绿色变成暗黄色，证明也产生了酸，所以记为所有产气管为大肠菌群阳性管。最后查MPN表可得出每毫升样品中大肠菌群的MPN为大于等于1100ml/MPN。

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微生物在地球上存在了30多亿年，人类在数百万年前出现之后就一直和微生物发生着千丝万缕的联系。发面、果酒和啤酒酿造、牛奶和奶制品的发酵等都是那些看不见的小生命做出的贡献。微生物存在于我们生活中的每一个角落，通过微生物实验我们可以更加的了解微生物的“习性”就如同养的宠物一样，什么样的食物会发育更好，什么样的天气会心情好，什么样的玩具会有益等等。培养、分离、鉴别微生物或积累代谢产物。自然界中培养基的种类很多，但是不同的培养基中，一般含有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，不同类别的微生物对PH值的要求一般不同。同过这些实验便能一一考证。

实验是培养学生的动手能力、观察能力、思维能力、表达能力、合作能力、创新能力等的最佳途径。还要求实验技术人员必须具备相应的素质，实验操作人员必须 具备较扎实的专业基础、熟练的实验技能及高度的责任心，在工作中要善于总结，同时还要和理论课老师积极沟通，这样才能够真正的学好微生物实验这门课程。在每一次实验中不仅仅要专心认真的做实验，还要认真的写实验报告，并从实验中总结不足。再比如在调试显微镜的时候由低倍向高倍慢慢调试，在使用高倍时更应该小心调试细准焦螺旋，以免压坏载玻片，在使用油镜后要将油镜拭擦干净，保证显微镜的清洁，这些细节是需要注意的。

以下就我们做的实验错误做列举：

进行菌种接种的时候，选择合适的方式并，注意不要把平板弄破，等到平板凝固后才可以进行接种。接种时也要注意在无菌条件下接种。经过培养后，再观察最后得出结论。在酸奶中菌落测定时，封口不及时有外界的细菌污染。药敏实验中因为试验中放置牛津杯时也将培养基戳破，导致实验观察受到影响，并且在接种时因为乱放培养基将未接种和已接种的培养基混淆导致试验中3个培养基并没有实验结果，实验失败。

我们的自主设计实验是探究渗透压对微生物生长的影响，原理是将细菌置于抵渗液中，菌体因吸收水分膨胀甚至破裂；如果将菌体置于高渗液中，则菌体内的水分就会渗出，结果发生质壁分离现象。不同的细菌对渗透压的抵抗力不同。但无论哪种细菌对渗透压的抵抗力是有一定限度的，超过一定限度则使菌体生长受到抑制只有在等渗溶液中，微生物才能正常生长、繁殖。实现这一理论我们需要制作200ml的牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏1g，蛋白胨2g，蒸馏水200nl），将其调PH至7.2,后平均分成四份各50ml，分别加入0g、1g、2.5g、5g的NaCl固体，配置成NaCl浓度分别为0%、2%、5%、10%的4种不同浓度的牛肉膏蛋白胨培养基.从培养基中吸取10ml加入试管中，不同浓度的培养基各取三支试管。在此操作时因实验思考不严谨是采取分别称量配置了3份不同浓度的溶液，而正确的做法应该是配一份未加入NaCl的培养基，再份为3份，加入不同克数的NaCl，这样一来可以避免由于营养素的计量不同导致的误差。虽后来的实验结果并未受到影响，但思考不严谨是值得反思的。

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心得体会

本次为期一周的实验课，让我更加深入的了解了酸乳中的各种微生物和丰富的微生物的世界。正如我们所知，微生物也有着不同的特征和生活方式，对人类的生活产生着或好或坏的影响。只有当我们能真正的了解这些微生物之后，我们才可以更好地与它们和谐共处。

这次酸乳中微生物检验实验给予了我许许多多的锻炼，从最开始实验课题的选取，实验材料的寻找，小组分工协作完成实验，到最后实验报告的完善，一切都是我们小组共同努力的结果，所以说这次大型实验给我们带来的益处是无法估量的。

当然在这次实验也暴露出了我们很多的问题。实验前我们准备的资料不充分，导致了我们实验开始时就手忙脚乱，实验用的原料比例我们都没能很好的把握。不过随后经过我们的不懈努力，最终还是比较圆满的完成了任务。实验中我们先对培养基进行了制备，后来我们计量了菌落的总数并加以分析辨别。并对主要的菌种大肠杆菌、霉菌、酵母菌、致病菌，乳酸菌等进行了测定和研究。本次实验我们忙中有乐，十分的开心。

这次实验还增强了我们小组之间配合的默契程度，我们小组分工合作，有条不紊，通过大家共同的努力，我们的实验完成的很快。而且也使我们每个人的动手能力的都得到了较好的锻炼。实验中其他组做的实验也给予了我们很大的帮助，我们在思路比较阻塞的时候，大家相互帮助，给了我们很多恳切实用的建议。并且在不懂的地方老师也耐心细致的给予了我们指导，使我们受益匪浅。这段实验时光让我觉得大家就是一个完美的大家庭，很好的团结在了一起。可以说这次实验不光对于我自己，对于我们整个班级都是一个很好的契机。让我感觉我们的大家庭变得更加融合，更有凝聚力了。

总的来说我们这次实验是比较成功的，但是我们在实验中也存在着很多错误并且也走了不少弯路。这给我们的警示是，在科研过程中要秉着严谨认真的态度，在实验前做好周密的计划，预想到各种状况，避免错误的出现。这样才能更好完美的完成各自的任务。

对于这次实验我有一些建议，我觉得实验中应该进行多种产品的对比和比较，在进行活性检验时应当设置空白对照。这样实验会更加严谨，我们分析的数

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微生物实验的理解和感想

    在大三生活的下半学期，我们开设了一门十分有用的课程——微生物实验，作为一名生物工程专业的学生，微生物实验是所有实验的基础，做好微生物实验，才能顺利的完成今后的学习、科研任务，抱着必胜的心态，我们开始了微生物实验的学习。

     微生物实验课程设计十分合理，从基础的培养基配制，到特定菌种的分离纯化，再到显微镜检测、菌种诱变、生理生化实验。系统的将菌种选育工作拆分成几个单元。详细的讲解了从自然条件下筛分、诱变、鉴定自己想要的菌种的试验方法。

     大自然是免费的宝库，从自然界中筛分出来的菌种，是大自然给我们的馈赠。从自然中筛选菌种，是免费的。所以，从自然界中筛选菌种是一个非常重要的得到特定菌种的方法。

培养特定的微生物需要排出其他微生物对他的影响，所以，我们先要为所有实验用具灭菌，以保证我们培养的微生物的纯度，灭菌分为干热和高温蒸汽灭菌两种方法，实验室常用高温蒸汽对实验用具灭菌，但在灭菌之前要用报纸将其包好，防止再次染菌。和人一样，也要“吃饭”、也要“喝水”，但是他们吃的是培养基，制作好培养基是培养好微生物的关键步骤，我们一般用牛肉膏蛋白胨培养基，可以满足大多数微生物的需求，固体培养基要在三角瓶中配制并灭菌，在用的时候要在无菌条件下分装在培养皿中，在分装时不能倒的太多，也不能太少，太少，则在涂布的时候容易刮破培养基，太厚不仅浪费实验材料，而且由于培养基中含有大量的水，在培养时可能造成水分蒸发而造成培养失败。用液体培养基时，在配好培养基后，要分装在试管中，盖紧试管冒，再进行灭菌。

在新鲜无菌的培养基中接种，常用挑菌和涂布的方法，挑菌时，先用酒精灯外焰将接种环烧至红色，再冷却到室温，在菌种上沾一下，再在液体培养基中搅拌，涂布也要在固体培养基上先接上0.1ML菌液再将涂布棒烧灼几分钟，再培养皿盖子上冷却到不烫手，将菌液涂匀，然后在合适的温度下倒置培养。

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注：这个范本是根据师兄留下的遗产修改而成，基本了概括整个实验的流程，为了大家不要雷同，所以只写了标题，但是还是有一些小步骤没有记录进去，如油镜的使用，但是这些我们之前都学过了，所以有所取舍吧。大家认真看看吧。里面可能编号有点不合理或者什么的，请大家根据自己情况修改，不用写电子报告的实验的同学，也请按照这份报告写在纸质版的报告册上，如果发现问题，第一时间和遂和联系。谢谢。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测

年级专业：

学号：

姓名：

1.实验目的：

（主要写脓汁和粪便标本中病原菌的检测，另外附加一些辅助实验的目的，如了解并熟悉微生物实验操作方法，实验方法等等）

2.实验器材：（还没有写完）

 接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架…………

3.实验方法与步骤：

3.1培养基的制备

培养基制备的一般程序：

3.2空气、手指皮肤的细菌学检查

3.3细菌的分离与培养：

采用平板划线分离法，取脓汁标本在普通平板表面划线，取粪便标本在伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。

3.4细菌的纯培养：

取脓汁标本在普通平板上的黄色、白色单菌落，粪便标本在伊红美蓝平板上的紫黑色、淡粉红色单菌落接种在四个斜面培养基，标记，在37℃培养18h。

3.5细菌的形态学检查

3.5.1革兰染色法观察细菌形态

涂片  →  干燥   →  固定→染色。涂片：取一玻片在玻片的左右两侧上加生理盐水3～4ul，2滴，分别取黄色和紫黑菌菌苔少许（1mm小菌落的半量）与左右两侧盐水混匀，涂成1cm2。干燥：在空气中放置至干燥。固定：在酒精灯上来回横穿2到3次对其进行固定。染色：结晶紫 → 初染1分钟→水洗→卢戈碘液→媒染1分钟→水洗→95％乙醇→脱色约20秒钟→水洗稀释→复红→复染1分钟→水洗→吸干,镜检。

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