篇一 :研究生液相色谱实验报告

高效液相实验报告

高乃群    S080601018

实验目的

1.      了解高效液相色谱仪的类型和各自的优缺点;

2.      了解液相色谱仪及各检测器的工作原理

3.      掌握高效液相色谱仪的操作;

4.      .学会高效液相实验数据的处理;

实验原理:

1. 液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。常用于分离同分异构体。

2. 液液色谱法 使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动正相色谱法 采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
    反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。

3. 离子交换色谱法 固定相是离子交换树脂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基(称阳离子交换树脂)或季氨基(阴离子交换树脂)。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。

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篇二 :液相色谱实验报告

华南师范大学实验报告

液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯

一、实验目的

1、掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法;                           2、了解高效液相色谱的构造、原理及操作技术。

二、实验原理

高效液相色谱由储液器,泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动,经过反复多次的吸附—解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。

三、主要仪器和试剂

主要仪器:岛津液相色谱仪(LC-10AT)[配有紫外检测器,Phenomenex ODS 柱]; 10μL微量注射器

试剂:苯标准溶液:10.0μL/mL ;                                                甲苯标准溶液:10.0μL/mL;                                                    苯、甲苯混合标准溶液:10.0μL/mL ;                                      甲醇:80% ;                                                         苯和甲苯混合待测溶液;

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篇三 :分析实验报告 高效液相色谱

华南师范大学实验报告

学生姓名:杨秀琼             学号:   20082401129          

专业:                  年级班级:08化二                  

课程名称:仪器分析实验      实验项目:液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯

实验类型:              实验时间:2010/416            

实验指导老师曹立娟老师     实验评分:                     

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篇四 :实验报告-高效液相色谱法测定VE含量

实验四高效液相色谱法测定VE含量

1 实验目的

1.1  了解高效液相色谱仪的基本操作;

1.2  了解高效液相色谱仪测定VE的原理。

2 实验原理

高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附—解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

VE(维生素E)又名生育酚或产妊酚,在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。有抗氧化作用,能增强皮肤毛细血管抵抗力,并维持正常通透性;有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。VE通过高效液相色谱柱进行分离,PDA检测器检测,外标法定量。

3实验器材

3.1 实验样品

VE样品溶液

3.2 实验试剂

浓度为50µg/ml的VE标样

3.3 实验仪器

高效液相色谱仪附PDA检测器

4 色谱条件

色谱柱:C18柱;   流动相速度:0.3ml/min;

进样量:5µl;     柱温:30℃。

5 实验结果与讨论

5.1  实验结果

本次实验采用的是单点法测定。实验结果见表1。

表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量

样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积

=5µl×50μg/mL×17369/(5µl×42217)=20.57μg/mL

5.2  实验讨论

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篇五 :高效液相色谱实验报告

高效液相色谱实验报告

一 、实验目的

1了解液相色谱的发展历史及最新进展

2 学习液相色谱的基本构造及原理

3 掌握液相色谱的操作方法和分析方法,能够通过HPLC分离测定来对目标化合物的分析鉴定。

二 、实验原理

液相色谱法采用液体作为流动相,利用物质在两相中的吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。当两相做相对移动时,被测物质在两相之间进行反复多次的质量交换,使溶质间微小的性质差异产生放大的效果,达到分离分析和测定的目的。液相色谱与气相色谱相比,最大的优点是可以分离不可挥发而具有一定溶解性的物质或受热后不稳定的物质,这类物质在已知化合物中占有相当大的比例,这也确定了液相色谱在应用领域中的地位。

高效液相色谱可分析低分子量、低沸点的有机化合物,更多适用于分析中、高分子量、高沸点及热稳定性差的有机化合物。80%的有机化合物都可以用高效液相色谱分析,目前以已经广泛应用于生物工程、制药工程、食品工业、环境检测、石油化工等行业。

三 、高效液相色谱的分类

吸附色谱法、分配色谱法、空间排阻色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法、化学键合相色谱法

四 、高效液相色谱仪的基本构造

高效液相色谱至少包括输液系统、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统等几部分。

1 输液系统:

包括贮液及脱气装置、高压输液泵和梯度洗脱装置。贮液装置用于存贮足够量、符合HPLC要求的流动相。高效液相色谱柱填料颗粒比较小,通过柱子的流动相受到的流动阻力很大,因此需要高压泵输送流动相。

2 进样系统:

将待测的样品引入到色谱柱的装置。液相色谱进样装置需要满足重复性好、死体积小、保证柱中心进样、进样时引起的流量波动小、便于实现自动化等多项要求。进样系统包括取样、进样两项功能。

3 分离柱:

色谱柱是色谱仪的心脏、柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化的HPLC微粒填料,如硅胶和以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)等的粒度通常在3μm、5μm、7μm、以及10μm。采用的固定相粒度甚至可以达到1μm,而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10μm。HPLC填充柱效的理论值可以达到50000/m~160000/m理论板,一般采用100-300mm的柱长可满足大多数样品的分析的需要。由于柱效内、外多种因素的影响,因此为使色谱柱达到其应有的效率。应尽量的减小系统的死体积。

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篇六 :高效液相色谱分析实验

仪器分析实验报告

 

实  验  名  称:      液相色谱分析实验        

学         院:        化学工程学院           

专          业:       化学工程与工艺         

班          级:       化工113             

姓          名:  学  号

指  导  教  师:          张侃                

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篇七 :液相色谱实验报告

 

仪 器 分 析 实 验 报 告

实  习  名  称:      液相色谱分析实验      

学          院:       化学工程学院         

专          业:       化学工程与工艺        

班          级:       化工班            

姓          名:   学  号 

指  导  教  师:                      

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篇八 :高效液相色谱实验报告

联苯、甲苯、萘和菲以及它们混样的高效液相色谱分析

实验目的

1.熟练掌握高效液相色谱相关仪器的操作流程。

2.通过高效液相色谱的方法对已知物质进行分析

3.通过谱图分析,掌握运用谱图数据处理目标物质的方法。

一、实验原理

色谱分析是运用物质在固定相和流动相两相间的分配系数不同而达到分离,它是一种分离技术,主要目的是对混合物中目标产物进行分离并定量分析的一种技术。

二、实验内容

运用高效液相色谱仪测定联苯、甲苯、萘和菲以及四者混合物的色谱,熟练仪器的相关操作流程,能从检测的谱图中定性的指认四者峰的归属,并能定量的描述四者混合物中各自的相对含量。

三、实验步骤

1、打开仪器电源开关,让仪器预热一段时间,此时可准备待测样品;

2、待仪器运转正常,打开测试软件,先用甲醇清洗柱子(在Load状态下进样,分析时在Inject状态下);

3、进样状态下插入微量注射器,切到装填状态,注入样品,切回到进样状态。

4、点击分析按钮,输入分析的样品名;

5、数据分析,通过软件查看积分面积。

五、实验结果

1

液相色谱图 (1)混样

mV(x100)

6.0

3.034/1116886

4.0

3.0

2.0

1.0

0.01.722/15606

3.383/709768

4.037/2542977

5.0

5.046/7069594

(2)联苯

6.05.55.04.54.03.53.02.52.01.5

1.731

0.50.00.0

1.0

2.578

5.213

1.0

4.147

mV(x100)6.5

2.03.04.05.06.07.08.09.0min

2

(3)萘 5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

2.5

2.0

1.53.408mV(x10)1.7210.5

0.0

3.0434.0841.05.152min

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