篇一 :综合实验报告 邻二氮菲分光光度法测定微量铁

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

一、实验目的

⒈学习确定实验条件的方法,掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理;

⒉掌握721型分光光度计的使用方法,并了解此仪器的主要构造。

二、实验原理

⒈确定适宜的条件的原因:在可见光分光光度法的测定中,通常是将被测物与显色剂反应,使之生成有色物质,然后测其吸光度,进而求得被测物质的含量。因此,显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。为了使测定有较高的灵敏度和准确性,必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间,显色剂用量,显色液酸度,干扰物质的影响因素及消除等,但主要是测量波长和参比溶液的选择。对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。

⒉如何确定适宜的条件:条件试验的一般步骤为改变其中一个因素,暂时固定其他因素,显色后测量相应溶液吸光度,通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。

⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理:根据朗伯-比耳定律:A=εbc。当入射光波长λ及光程b一定时,在一定浓度范围内,有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标,浓度c为横坐标的标准曲线,测出试液的吸光度,就可以由标准曲线查得对应的浓度值,即工业盐酸中铁的含量。

⒋邻二氮菲法的优点:用分光光度法测定试样中的微量铁,目前一般采用邻二氮菲法,该法具有高灵敏度、高选择性,且稳定性好,干扰易消除等优点。

⒌邻二氮菲法简介: 邻二氮菲为显色剂,选择测定微量铁的适宜条件和测量条件,并用于工业盐酸中铁的测定。

⒍邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据:邻二氮菲亦称邻菲咯啉(简写phen),是光度法测定铁的优良试剂。在pH=2~9的范围内,邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物((Fe(phen)3)2+)。

此配合物的lgK= 21.3,摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1,而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物,呈淡蓝色,lgK=14.1。所以在加入显色剂之前,应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+,其反应式如下:

…… …… 余下全文

篇二 :邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

     

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

                                          

课程名称:仪器分析

                                           指导教师:李志红

                                           实验员  :张丽辉 李国跃 崔凤琼

…… …… 余下全文

篇三 :邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

实验一、邻二氮菲分光光度法测定微量铁

20##级医学检验        3组          吴茳铃       2009221885

实验目的和要求

1、  掌握紫外可见分光光度计的基本操作;

2、  掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法;

3、  掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择;

4、  掌握标准曲线绘制及应用。

实验原理

邻二氮菲(1,10—邻二氮杂菲)是一种有机配位剂,可与Fe2+形成红色配位离子

在pH=3~9范围内,该反应能够迅速完成,生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰,摩尔吸收系数为1.1×104,反应十分灵敏,Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律,适合于微量铁的测定。

实验中,采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度;采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。

实验仪器与试剂

1. 752S型分光光度计      2. 标准铁储备溶液(1.00×10-3mol/L)    3. 邻二氮菲溶液(0.15%,新鲜配制)      4. 盐酸羟胺溶液(10%,新鲜配制)       5. NaAC缓冲溶液

6. 50ml容量瓶7个        8.1cm玻璃比色皿2个                   9. 铁样品溶液

…… …… 余下全文

篇四 :邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁

一.实验目的和要求

1、掌握紫外可见分光光度计的基本操作;

2、掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法;

3、掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择;

4、掌握标准曲线绘制及应用。

二.实验原理

邻二氮菲(1,10—邻二氮杂菲)是一种有机配位剂,可与Fe2+形成红色配位离子

在pH=3~9范围内,该反应能够迅速完成,生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰,摩尔吸收系数为1.1×104,反应十分灵敏,Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律,适合于微量铁的测定。

实验中,采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度;采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。

三.实验仪器与试剂

1. 752型分光光度计

2. 标准铁储备溶液(1.00×10-3mol/L)

3. 邻二氮菲溶液(0.15%,新鲜配制)

4. 盐酸羟胺溶液(10%,新鲜配制)

5. 醋酸盐缓冲溶液

6. 50ml容量瓶7个

7. 5ml移液管4只

8.1cm玻璃比色皿2个

9. 铁样品溶液  

四.实验步骤:

1、  标准系列溶液及样品溶液配制

按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液

2、 吸收曲线绘制

用1cm比色皿,以1号溶液作为参比溶液,测定4号溶液在各个波长处的吸光度,在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标,波长为横坐标,绘制吸收曲线,并从吸光曲线上找出最大吸收波长。

绘图如下:

3、  标准曲线制作

在选定最大吸收波长处,用1cm比色皿,以1号溶液作为参比溶液,分别测定2至7号溶液的吸光度,在坐标纸上以吸光度平均值为纵坐标,系列标准溶液的浓度为横坐标制图,绘制标准曲线。

绘图如下:

…… …… 余下全文

篇五 :邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

实验一、邻二氮菲分光光度法测定微量铁

实验目的和要求

1、  掌握紫外可见分光光度计的基本操作;

2、  掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法;

3、  掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择;

4、  掌握标准曲线绘制及应用。

实验原理

邻二氮菲(1,10—邻二氮杂菲)是一种有机配位剂,可与Fe2+形成红色配位离子

在pH=3~9范围内,该反应能够迅速完成,生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰,摩尔吸收系数为1.1×104,反应十分灵敏,Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律,适合于微量铁的测定。

实验中,采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度;采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。

实验仪器与试剂

1. 752S型分光光度计      2. 标准铁储备溶液(1.00×10-3mol/L)    3. 邻二氮菲溶液(0.15%,新鲜配制)      4. 盐酸羟胺溶液(10%,新鲜配制)       5. NaAC缓冲溶液

6. 50ml容量瓶7个        8.1cm玻璃比色皿2个                   9. 铁样品溶液

实验步骤

1、    标准系列溶液及样品溶液配制,按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液。

…… …… 余下全文

篇六 :邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

一、实验目的

1.  学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法;

2.  掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。

二、实验原理

1.在可见光分光光度法测定无机物时,通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。

2.确定适宜实验条件:改变其中一个影响因素,暂时固定其它影响因素,测吸光度,通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。其他因素的确定也照此方法。

3.本实验以邻二氮菲(phen)为显色剂,是光度法测定微量铁的优良试剂,pH在2~9时(pH=5~6),

Fe2+ + 3phen  [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)

lgK=21.3,λmax=510nm, ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1

用盐酸羟胺将Fe(Ⅲ)还原为Fe(Ⅱ),以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。本方法选择性高,杂离子难以干扰。

三、仪器与试剂

TU—1901型双光束紫外可见分光光度计,1cm比色皿,10mL吸量管,50mL比色管。

1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液,100μg·mL-1铁标准溶液,0.15%phen水溶液,10%盐酸羟胺溶液,1 mol·L-1醋酸钠溶液,工业盐酸(试样)。

四、实验操作

1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择

用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中,再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液,摇匀后,加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,稀释至刻度线,摇匀。

以蒸馏水为参比液,将上述试液装入1cm比色皿(2/3左右),在440nm~560nm之间,每隔5nm测一次吸光度,以吸光度A为纵坐标,波长λ为横坐标绘制吸收曲线,选择最适宜波长。

…… …… 余下全文

篇七 :北京理工大学-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

邻二氮菲分光光度法测定铁

刘红阳            19121201           1120123063

一、实验目的

1、学习测定微量铁的通用方法;

2、掌握分光光度法分析的基本操作及数据处理方法;

3、初步了解分光光度法分析实验条件研究的一般做法。

二、实验原理

一般选择络合物的最大吸收波长为工作波长。控制溶液酸度是显色反应的重要因素。因为多数显色剂是有机弱酸或弱碱,溶液的酸度会直接影响显色剂的理解程度,从而影响显色反应的完全程度及络合物的组成。另一方面,酸度大小也影响着金属离子的存在状态,因此也影响了显色反应的程度。应当确定显色剂加入量的合适范围。不同显色反应的络合物达到稳定所需要的时间不同,且达到稳定后能维持多久也大不相同。大多数显色反应在室温下就能很快完成,但有些反应必须加热才能较快进行。此外,加入试剂的顺序、离子的氧化态、干扰物质的影响等,均需一一加以研究,以便拟定合适的分析方案,使测定既准确,又迅速。本实验通过对铁(Ⅱ)-邻二氮菲显色反应的条件实验,初步了解如何拟定一个分光光度法分析实验的测定条件。

邻二氮菲是测定铁的高灵敏性、高选择性试剂之一,邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在pH2~9的溶液中,Fe2+和邻二氮菲生成1:3橘红色络合物,lgβ3=21.3(20℃),ε508=1.1×104L·mol-1·cm-1,其吸收曲线如图一所示;Fe3+亦可以与邻二氮菲生成蓝色络合物,因此,在显色前需用盐酸羟胺溶液将全部的Fe3+还原为Fe2+。反应式如下(和图二):

2Fe3++2NH2OH===2Fe2++N2↑+2H2O+2H+

…… …… 余下全文

篇八 :邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验


摘要:本文采用邻二氮菲分光光度法,该方法具有灵敏度高、操作简单、重现性好等特定,效果令人满意

关键词:邻二氮菲 分光光度法 微量铁测量 吸光度


目录

1.实验部分... 4

1.1实验原理... 4

1.2仪器和试剂... 5

1.3实验内容... 5

1.3.1配制10ug/ml铁标准溶液... 5

1.3.2配制标准溶液和待测液... 5

1.3.3吸收曲线的绘制... 5

1.3.4标准曲线的绘制... 6

1.3.5未知铁溶液的测定... 6

1.4实验数据处理... 6

1.4.1吸收曲线的绘制... 6

1.4.2标准曲线的绘制... 6

2.结论与思考... 7

3.参考资料... 7


铁与人类的生活密切相关,也是维持人体新陈代谢必不可少的微量元素之一,是构成血红蛋白、肌红蛋白以及多种酶的重要成分,若缺少铁,可影响血红蛋白、肌红蛋白的合成,使某些酶的活性降低,引起人体生理上的变化,导致免疫力下降,智力降低和机体抗感染能力降低等各种疾病的产生。铁广泛的存在于各类动物性和植物性食品当中,如动物的肝脏、全血、肉类、蛋类、枣、苹果、山楂、木耳、海藻等食品中都含有大量铁,此外部分果汁、牛奶、酸奶中也含有微量铁。因此对于微量铁的检测尤为重要,目前测定微量铁的方法主要有分光光度法、荧光法、原子吸收法,本文采用邻二氮菲分光光度法,邻二氮菲是一种显色剂,在pH=2.0~9.0的溶液中能与Fe2+形成橙红色络合物,该方法具有灵敏度高、操作简单、重现性好等特定,效果令人满意。

1.实验部分

1.1实验原理

邻二氮菲(Phen)是测定二价铁离子的一种高高灵敏度、高选择性显色试剂,在pH=2.0~9.0的溶液中能与Fe2+形成橙红色络合物Fe(Phen)32+,反应方程式如下:

此络合物的lgKθ=21.3(20 0C),摩尔吸光系数εmax=1.1×104L·mol-1·cm-1。稳定性常数2.0×1021,铁含量在0.1~6μg·ml-1范围内遵循比尔定律。在还原剂存在下,颜色可以保持几个月不变。

…… …… 余下全文