离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察

一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统；

              ②学习离体肠肌的实验装置和使用方法；

              ③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响

二、实验对象：家兔离体小肠肠管。

三、实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性，其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节，所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下，利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。

四、实验记录与分析

㈠  

   

图（一）  

 图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况

从图（一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱，因为平滑肌收缩需要酶催化，而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低，这就可以影响钠钾钙等离子的转运，继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。

        ㈡

图（二）

图（二）表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况

由图（二）可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱，这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合，可导致使膜超极化，从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加，所以其动作电位的产生频率下降，所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。

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此报告纯属个人娱乐行为，读者请勿留言

一、实验目的——

1. 学习哺乳动物离体肠标本制备及灌流方法。

2. 观察消化道平滑肌 ;L的一般生理特性及某些因素对舒缩活动的影响。

二、实验原理

消 化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩， 对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。小肠离体后，置于适宜的溶液中，观察其收缩活动及环境变化的影响，观察分析上述生理特性。

三、实验材料——

1、实验动物：家兔

2、 器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为25g以下)、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺 丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。

四、实验方法和步骤

1、标本制备流程：

①击昏家兔：

用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。

②剖开腹腔快速取出肠管：

立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，快速取长20~30cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗，把肠内容物基本洗净。

③制作离体肠标本：

将肠管分成数段，每段长2-3cm，两端各系一条线，保存于供氧的38℃左右的台氏液中

2、仪器安装与调试实验安装（如图）：

恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38℃。将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。

仪 器调试：BL-410系统的使用，选择“实验项目”

中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。 相关参数设置的参考值：时间常数t→DC，高频滤波 F→30Hz，显速→4.00s/div，增益→100g。用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮，调节参数至波形幅度、密度适当，待收缩曲线稳定后，单 击记录按钮。

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台 州 学 院

医学院实验报告

班级：     学号：     姓名： 

实验课程：机能学实验

实验项目：消化道平滑肌的生理特性和药物的影响

实验分室：

实验日期 20##年  6 月 3 日

一、  实验目的 

1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。

  2、了解肠段平滑肌的生理特性。

   3、观察某些药物对离体平滑肌的作用

二、实验原理

哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中，可在一定时间内保持其功能。本实验以台式液作灌流液，在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。

三、实验仪器与材料

兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素（1：10000）、乙酰胆碱（1：10000）、阿托品针剂（1支）。

四、实验内容、方法与步骤

1、安装麦氏浴槽   恒温平滑肌浴槽可用来记录消化道平滑肌的收缩活动，分为外槽和内槽，内槽用来浸浴实验标本，外槽内有恒温自来水流动以加热内槽中的台氏液，使其温度保持在37℃左右。小肠标本一端固定在内槽底部的铁钩上，另一端连至肌肉张力换能器的悬臂上。换能器与生物信号采集处理系统通道相连并输入计算机。内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为宜。内槽底部还有通空气和排液的共同开口，通过此开口可排液和供给标本所需氧气。

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第四期精品实验：消化道平滑肌的生理特性 （生理学实验六）

近年来，在大学实验室与设备管理处、教务处、医学院的共同支持下，机能中心配备和改进了《消化道平滑肌的生理特性》所需的生物信号采集与处理系统、灌流装置等，大大提高了实验的成功率。我们在原来验证性实验内容的基础上，近几年重点鼓励同学增加设计和探究性实验内容。主要采用老师讲授、同学查阅文献、老师和同学讨论、同学具体操作、总结、PPT演讲等方法和手段完成“教和学”：

1、在前期的生理学实验教学过程中，特别是实验报告的撰写要求、试验结果总结等，要贯穿实验设计的理念，让同学们对实验设计有一个初步的概念。

2、消化系统理论课结束以后，鼓励同学在掌握已有知识的基础上，利用学校网络和图书馆，从万方数据库、PUBMED等查阅消化道平滑肌运动调节方面的文献，自己提出一些课本上尚未解决的问题，设计实验。

3、该实验开始的前一周上交所设计的实验，通过老师和同学讨论后，确定要做的创新实验内容并准备相应药品和材料。

4、在经典的常规实验内容结束后，同学根据自己的设计验证实验并进行总结。 项目工作和完成情况

一、已做工作（20xx年9月-12月）：

（一）老师工作

1. 实验二和实验三（期前收缩和代偿间歇部分）合并

2. 实验三（2）（3）部分实验结束后，以实例讲授有关实验设计的内容，布置实验设计作业（消化道平滑肌运动方面设计实验）及要求

3. 与同学讨论他们所设计的创新实验，为实施做准备

4. 选择可行性好的创新实验，为同学实施所设计的实验分配任务

5. 布置同学撰写实验报告，要求同学们总结已经实施的内容

（二）同学工作

1.从平滑肌生理方面设计相关实验，上交创新实验设计作业

2.具体实施经典实验和创新实验项目内容

3.总结实施的实验（包括测量具体实验数据、小组间收集数据、统计分析数据、针对数据分析讨论等），以实验报告的形式上交，同时安排同学以PPT形式汇报实验情况。

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消化道平滑肌生理特性及药物影响

一、实验目的：

1、学习哺乳动物离体器官的灌流实验法。

2、观察消化道平滑肌自律性运动及药物温度的影响。

二、实验对象：

三、实验方法：

1、实验装置的准备：

（1）麦氏浴槽灌流：该浴槽坐浴于盛水的烧杯中，酒精灯加热，温度计测量，控

温于37度左右（因水浴升降温速度较慢），故可用此法来维持温度。

(2) 恒温浴槽的换液方法：其排水管道上夹有弹簧夹，打开用50毫升注射器抽取，

可使灌浴槽中的液体流出，主管则可加入新鲜台氏液

（3）描记装置：通过张力换能器将信号输入实验系统的通道4，打开计算机，D95

主界面?生理?消化道平滑肌生理特性。

2、制备离体小肠标本：用铁棒猛击兔头枕部，使其昏迷，立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，由此取20～30cm长的肠管。先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，再将拟取肠管两端分别用线结扎，于结扎两端内侧剪断，取出肠段，置于台氏液中轻轻漂洗，当肠内容物基本洗净之后，将肠管分成6段，每段长2～3cm，两端各系一条线，保存于室温台氏液中。

3标本安装：当实验装置准备完毕，将肠段一端牢固地系在通气管钩上，放入准备好的麦氏浴槽中（室温台氏液），另一端系在张力换能器的悬梁臂上，调节氧气袋出气管上的滚轴，控制通气量（使空气气泡从通气管前端呈单个而不是成串逸出，以免振动悬线影响记录），酒精灯开始加热台氏液到37度，实验开始

3、观察项目

观察离体小肠平滑肌收缩的节律、波形和幅度。 （注意：收缩曲线的基线代 表小肠平滑肌的紧张性，因此实验过程中不要随意移动该基线。）

四、实验结果：

实验项目 收缩幅度 收缩节律 室温台氏液→37度

1/10万Ach2滴 ↑↓

1/万 Adr2滴 ↑↓

1/万 Atr2滴 ↑↓

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（1）兴奋性较低，收缩缓慢，变异较大；

（2）具有一定的自律性，但自律性不如心肌规则；

（3）有一定程度的紧张性收缩；医学|教育网收集整理

（4）具有较大的伸展性；

（5）对电刺激敏感，对牵张、化学、温度刺激敏感。

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1.静息膜电位消化道平滑肌的静息膜电位很不稳定，波动较大，其实测值为-60——50Mv，静息电位主要由K+的平衡电位形成，但Na+、CI-、Ca2+以及生电性钠泵活动也参与了静息膜电位的产生。

2.慢波电位消化道的平滑肌细胞可产生节律性的自发性去极化；以静息膜电位为基础的这种周期性波动，由于其发生频率较慢而被称为慢波电位，又称基本电节律（basalelectricrhythm，BER）。消化道不部位的慢波频率不同，在人类，胃的慢波频率为3次/min，十二指肠为12次/min，回肠末端为8-9次/min.慢波的波幅约为10-15mV，持续时间由数秒至十几秒。

用细胞内微电极记录时，慢波多表现为单向波，包括初期的快速去极化和缓慢的复极化平台。关于慢波产生的离子基础尚未完全清楚。目前认为，它的产生可能与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关，当钠泵的活动暂时受抑制时，膜便发生去极化；当钠泵活动恢复时，膜的极化加强，膜电位便又回到原来的水平。实验证明，用抑制钠泵的药物哇巴因后，胃肠平滑肌的慢波电位消失。

在通常情况下，慢波起源于消化道的纵行肌，以电紧张形式扩布到环行肌。由于切断支配胃肠的神经，或用药物阻断神经冲动后，慢波电位仍然存在，表明它的产生可能是肌源性的。慢波本身不引起肌肉收缩，便它可以反映平滑肌兴奋性的周期变化。慢波可使静息膜电位接近于产生动作电位的阈电位，一旦达到阈电位，膜上的电压依从性离子通道便开放而产生动作电位。

3.动作电位平滑肌的动作电位与神经和骨骼肌的动作电位的区别在于：①锋电位上升慢，持续时间长；②平滑肌的动作电位不受钠通道阻断剂的影响，但可被Ca2+通道阻断剂所阻断，这表明它的产生主要依赖Ca2+的内流；③不滑肌动作电位的复极化与骨骼肌相同，都是通过K+的外流，所不同的是，不滑肌K+的外向电流与Ca2+的内向电流在时间过程上几乎相同，因此，锋电位的幅度低，而且大小不等。

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