蛋白质与酶工程
包埋法制备固定化微生物
预实验报告
[实验目的]
1 、考察PYD是否与麦芽汁培养基一样可发酵酵母。
2 、考察干酵母活化与酵母培养过夜活化固定后活力的异同。
[实验材料]
菌种 活性干酵母菌 1%Cacl2 PYD培养基 海藻酸钠 注射器 酵母膏 葡萄糖 麦芽汁 牛肉膏 均116°C 20min灭菌
[实验基本原理]
海藻酸钠溶解状态与菌混合包埋,注射器滴入1%Cacl2中生成海藻酸钙珠,钙还有交联作用.
[实验步骤]
1 活化酵母 称取4克活性干酵母加入2%蔗糖 25°C 5h 5%接入PYD中培养基过夜 离心收集细胞
2 将活化后的酵母与40°C 3%海藻酸钠20ml混合,用注射器吸取滴入1%Cacl2 ,成球,滴定用无菌水洗一次,在加入1%Cacl2中化2 h
3 将制备好的固定化细胞分别加入麦芽汁 PYD培养基中 28°C过夜,同时做固定化培养的对照实验
观察结果
1 固定化珠 :硬度适中 ,珠形, 球形较规整一致。
2 干酵母活化与培养后的酵母均能使麦芽汁发酵。
3 PYD培养基培养与麦芽汁培养一样可出现酵母生长产气变混的改变。
[结论]
为在7小时内完成实验,可以将活性干酵母加入2%蔗糖活化,不需培养。 为解决麦芽汁的制备困难,可以以PYD培养基代替麦芽汁,进行发酵试验。
薛胜平
2006,10,22
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