《环境毒理学概论》实验教案

孟庆俊，张明青

中国矿业大学环境与测绘学院

2008．3

实验一 鱼类回避试验

一 目的与要求

1．学习鱼类回避反应的生物学机理；了解回避装置的结构，设计原理及使用方法；掌握回避试验的操作步骤及试验结果的计算和分析。

2．实验前要求学生预习实验指导书的内容，对整个实验过程要熟悉，要有整体概念，充分理解实验原理。

二 实验的组织安排

1．由于学生人数较多，本实验共分两次进行，即每次一个班，每班分4组。 2．进入实验室后，先由教师对实验的原理等内容进行讲解，告之实验已准备的相关内容、学生要做的主要工作，以及实验中应请注意的有关事项。然后才能按部就班地进行实验。

三 实验原理

鱼类回避反应属于行为毒理学的研究范畴，它阐明水生动物对污染物是否回避，及其引起回避的浓度，以期对水体污染进行早期预报，并为制定和评价渔业水质标准提供重要依据。

本试验以鱼为试验动物进行回避试验。鱼类的嗅觉、味觉、视觉、和侧线等感受器对环境刺激具有保护性的本能反应，即回避反应。利用鱼类对受污染水产生回避反应的特点，认为世界污染水区和非污染水区的迷宫回避装置，给鱼以污染物刺激，鱼能主动躲避污染水区，迅速游向清洁水区，据此观察污染物对鱼的回避行为影响。

四 实验准备

（一）器材与试剂

按照实验指导书准备相关实验器材，主要是Y型回避装置，并配制相关化学试剂。

（二）实验生物

从市场提前一周购买实验用鱼，可以是当地可以见的任何一种鱼，但不应过大，体长在4cm左右即可，在实验室内驯养，以备实验所用。

五 步骤和方法

（一）预备试验

这部分内容由实验教师在学生的正式实验前来完成，主要的目的是确定实验浓度范围。具体的步骤如下：

1

1. 按鱼类急性毒性试验方法，求出待测物的96hLC50值。本实验以资料中查得的96hLC50值为参考。鱼类对铜是非常敏感的，因此实验所选的受试化合物为硫酸铜。

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毒理学实验报告思考题习题答案汇总

作者：南无宝宝

实验一

1、简述常用实验动物的种类

1.科研人员用的：小白鼠、狗、兔子
2.学校教学用的：青蛙（人工繁殖的）、鱼、蚯蚓

2、选择实验动物的原则

1.根据实验的要求而选择不同的实验动物　　2.选用动物的数量必须符合统计学上预计数字的需要。3.根据实验的性质也可选不同品系的动物：其目的在于使动物试验结果有规律性、重复性和可比性。4.由于同一种实验动物存在着个体差异，还应注意个体的选择：

　　（1）年龄：一般均选用成年动物来进行实验。动物年龄常按其体重来估计，选用的动物体重大体上小白鼠20～30g、豚鼠500g左右、家兔2kg左右医学教|育网搜集整理。

　　（2）性别：在实验研究中，动物如无特殊需要，一般宜选用雌雄各半。

　　（3）生理状态：实验动物应证明确实健康外，雌性动物若处于怀孕、授乳期不宜采用。

3、把12只动物随机平分成三组。详细叙述分组过程

2．将实验单位随机分成三组　设有动物15只，随机等分成A、B、C三组。将动物编号后，按上述方法，从随机数字表抄录15个数字，将各数一律以3除之，并以余数1、2、3代表A、B、C，结果归入A组的动物6只，归入B组的动物4只，归入C组的动物5只，即：

要使三组的动物数相等，须把原归A组的6只动物中的1只改配到B组去。可以随机数字表继续按斜角线抄录一个数字，得60，以6除之，除尽（相当于余数为6），就可以把第六个A（即12号）动物改为B组。调整后各组的动物编号如下：

4、绘图，任选三个两位数字编号并画出它在小白鼠身上的染色法标记。

10  左上右无 11 左上右上  12左上 右中

实验二

1、简述抓取小鼠和家兔的方法及注意事项

小鼠的抓取固定 抓取时，用左手拇 指和食指捏住小鼠尾巴中部放在格板或铁笼上。 2、趁着小鼠试图挣脱的瞬间，迅速用另外三个手指压住小鼠的尾巴根部握 入手掌。 3、放松拇指和食指，用另外三个手指控制小鼠，然后用食指和拇指捏住小 鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠，完成抓取固定。注意事项：抓小鼠尾巴应抓住尾巴中部或根部，不能仅捏住小鼠尾巴的尾端，因 为这时小鼠的重量全部集中到尾端，如果小鼠挣扎，有可能弄破尾端。在进行解 剖、手术、心脏采血、尾静脉注射时，可将小鼠用线绳捆绑在木版上，或固定在 尾静脉注射架及粗试管中。

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实验一、动物的一般操作技术

1.实验目的和要求*

毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验，通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量—反应关系、毒作用机制等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。

通过本次学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。

2.实验原理

做毒理学实验，首先要了解实验动物选择的要求，实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。

3．实验仪器设备：

小鼠若干，手套15副，苦味酸酒精饱和液，0.5％中性红或品红溶液，棉签，解剖剪刀10把，感应量为0.1g的天平一台。

4．实验内容步骤：

(一)健康动物的选择

无论选择哪种种属品系的动物进行实验，均要求选择健康的实验动物。健康动物检查时要求达到：外观体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。选择时重点检查以下几项：

l．眼睛 明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物。

2．耳 耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮。

3．鼻 无喷嚏，无浆性粘液分泌物。

4．皮肤 无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。

5．颈部 要求颈项端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患，不应选作实验动物。

6．消化道 无呕吐、腹泻，粪便成形，肛门附近被毛洁净。

7．神经系统 无震颤、麻痹。若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动，应放弃该动物。

8．四肢及尾 四肢、趾及尾无红肿及溃疡。

(二)实验动物的性别鉴定

小鼠 主要依据肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄鼠，小者为雌性。成年雄鼠卧位可见睾丸，雌性在腹部可见乳头。

(三)抓取方法

正确地抓取固定动物，是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下，确保实验顺利进行，

小鼠的抓取方法 先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。

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食品毒理学实验报告

 食品10-1班      孙亮      100424102 

实验中，首先练习了小白鼠的抓取、性别鉴定、标记分组、灌胃、静脉注射、眼球取血、处死、解剖等毒理学实验基本操作技术。

其后对样本小白鼠及其心、肝、脾、肺、肾等脏器进行了称重，并将所取血样离心得血清，用快速血糖血脂检测仪测定其葡萄糖和三磷酸甘油含量，得到实验原始数据。

下面对实验所得原始数据利用Excel函数进行处理，并说明其统计学意义。

1、原始数据

表1   本实验小白鼠各项指标的原始数据

2、数据处理

  利用Excel函数对原始数据进行处理，求出各脏器的脏器指数，并采用ttest函数对

样本中雌、雄小白鼠脏器指数及血糖、血脂等指标进行配对设计t检验（Tails=2,Type=1）,实验结果以均数±标准差表示，取P<0.05作为差异显著性的界值。处理结果如下表：

  其中用“^▲”表示该项目指标P< 0.05，样本的雌、雄小白鼠在该指标上存在显著性差异。

         表2  本实验雌、雄小白鼠的脏器指数及血样指标

 

 3、 检验依据

    上述数据处理过程中，采用ttest函数对两组数据进行差异显著性分析，处理结果中各指标的P值均大于0.05，即仅仅由于抽样误差而造成样本之间这么大小差别的可能性大于5％，差异没有统计学意义，说明各样本指标间的差别本质上无明显差异，因此还不能认为小白鼠各脏器指数及血糖、血脂各指标有雌雄差异。

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汞在环境中的迁移转化及其毒性

余永浩（贵州大学资环学院环科111班，学号：1108100069）

摘要： 汞（Hg）俗称水银。常温下唯一液体金属，常温下即可蒸发。金属汞不溶于水及有机溶剂，易溶于硝酸、王水，不易氧化，但易与硫作用生成硫化汞。由于汞的广泛使用及较强毒性，其已成为一种重要的环境污染物。因此必须加强汞使用过程中与使用后的控制，使所有汞污染源达标排放，从而减轻甚至消除汞的污染危害。^[1]汞是人体非必需元素,它可以多种物理和化学形态广泛存在于自然界中。通过不同途径进入人体的汞及其化合物能够引起以神经系统和肾脏为主的多系统损害。目前,随着汞在生产和生活中的广泛应用,人们对其引起的健康危害日益关注。^[2]

关键字：汞，迁移转化，毒性

1.  引言

汞的熔点-38.8℃ 沸点356.7℃ 密度13.6g/cm^3 。汞在常温下就能挥发，且挥发量随温度增加而增加。汞几乎不溶于水，但能溶于硝酸、硫酸和王水，一般不与碱性溶液发生反应。汞在常温下能与硫和氯结合生成硫化汞和氯化汞。汞是一种广泛存在于自然界的人体非必需元素。随着近代工业的发展,它在生产和生活中的应用日益广泛,从而汞对环境和人群健康的危害也越来越大。汞在自然界有三种存在形式:即元素汞(Hg)、无机汞(Hg+、Hg2+)和有机汞。有机汞化合物均为脂溶性，也有不同程度的水溶性和挥发性。有机汞的毒性大于金属汞和无机汞。^[3]由于人类活动造成水体汞污染,其污染源主要来自氯碱、塑料、电池、电子等工业排放的废水。据估计,1970～1979年全世界排入土壤的汞约为10×104t^[4], 而排向大气和土壤的汞都随着水循环回归入水体。

2.  汞的来源

2.1自然释放　

汞在自然界中分布极广,几乎所有的矿物中都含有汞,自然释放到大气中的主要是元素汞,还有二甲基汞、挥发性无机汞化合物等,同时地球经一系列的自然过程如火山活动、地热活动等也将汞释放进入大气。有学者认为,我国成都平原的汞污染在很大程度上是因为平原基底断裂的地球放气作用造成的^[5]。另外,水体、土壤、植物表面的自然释放及森林火灾也是大气汞污染的重要来源

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毒理学学科发展报告2010-2011（简本）

一、引言

毒理学是研究外源化学、物理及生物因素对生物体和环境生态系统的损害效应及其作用机制，以及预防、救治或改善措施的综合性学科。它具有多元与集成、学术研究与管理服务、基础与应用并重的学科特点。进入21世纪以来，毒理学已成为维护环境友好与生态平衡、保障人们生命安全与健康生活、促进经济可持续发展、推动社会文明进步的重要科技力量。

二、本学科的发展概况

毒理学与中医药学一样，在中国有着久远的发展历史。早在炎帝时代，就有“神农尝百草，一日而遇七十毒”的记载。我国现代毒理学是从20世纪50年代起步，90年代中期至今是我国毒理学的快速发展期。随着我国公共卫生体系的构建和完善、环境保护与生态平衡的维护，对毒理学科学技术的需求不断增加，也使毒理学学科发展面临更大的机遇。近年毒理学学科的发展，涌现出毒理基因组学、毒物代谢组学、毒代动力学、纳米毒理学等一批新的技术理论和分支学科，目前我国毒理学学科体系已基本形成。

毒理学作为一门独立的学科，其内涵有三大领域，即描述毒理学、机制毒理学和管理毒理学。目前我国毒理学学科的分支体系日趋完善，并已发展和形成了许多分支学科，这些分支学科大体可从两个方面来进行划分：其一是从学科分支分类，包括生化与分子毒理、免疫毒理、生殖毒理、遗传毒理、环境与生态毒理、分析毒理、临床毒理、管理毒理等；其二是从研究或应用对象分类，如工业毒理、放射毒理、军事毒理、法医毒理、药物毒理、食品毒理、兽医药毒理、药物依赖毒理、纳米与新型材料毒理、生物毒素毒理、中毒与救治等。

近几年来，我国毒理学科技实力快速增长，毒理学科研、教学和管理队伍规

模不断扩大，高层次科技人才不断涌现。随着国家对毒理学领域科研投入的增加，我国毒理学科技创新能力得到大幅提升，一方面毒理学的基础研究水平和国际影响力稳步上升，另一方面包括环境污染物、各类生活日用产品中残留物的分析检测和安全性评价等毒理学应用性技术平台建设也得到快速发展。毒理学科技成果在外源环境污染物、工业与农业化学品、药品、食品、化妆品、健康相关产品、新型材料如纳米材料等的安全性评价和危险度管理诸多方面发挥了不可替代的作用。特别是近年来，毒理学知识和科学技术在核、化、生突发事件的应急处置和医学救治，在北京奥运会和上海世博会等重大社会公共活动的安全保障，在履行国际公约、禁毒，在处理日本遗留化学武器、集体中毒、环境污染等重大事件中，发挥了关键性作用。在未来涉及国家安全、经济发展战略、人类健康事业和社会和谐稳定等很多重大问题上，毒理学科技力量将会发挥更大的作用。

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毒理学实验方法与技术

作　　者： 王心如　主编

出 版 社： 人民卫生出版社

• 出版时间： 20##-2-1
• 字　　数： 302000
• 版　　次： 1
• 页　　数： 203
• 印刷时间： 20##-2-1
• 开　　本：
• 印　　次：
• 纸　　张： 胶版纸
• I S B N ： 9787117056618
• 包　　装： 平装

所属分类： 图书 >> 医学 >> 医药卫生教材

第一章　毒理学实验基础
第一节　毒理学实验的原则和局限性

在描述毒理学的试验中，有三个基本的原则：

1.化学物在实验动物产生的作用，可以外推于人。基本假设为：①人是最敏感的动物物种；②人和实验动物的生物学过程包括化学物的代谢，与体重(或体表面积)相关。这两个假设也是全部实验生物学和医学的前提。以单位体表面积计算在人产生毒作用的剂量和实验动物通常相近似。而以体重计算则人通常比实验动物敏感，差别可能达10倍。因此可以利用安全系数来计算人的相对安全剂量。已知人致癌物都对某种实验动物具有致癌性。实验动物致癌物是否都对人有致癌性，还不清楚，但此已作为动物致癌试验的基础。一般认为，如果某一化学物对几个物种实验动物的毒性是相伺的，则人的反应也可能是相似的。

2.实验动物必须暴露于高剂量，这是发现对人潜在危害的必需和可靠的方法。此原则是根据质反应的概念，随剂量或暴露增加，群体中效应发生率增加。毒理学试验中，一般要设3个或3个以上剂量组，以观察剂量-反应(效应)关系，确定受试化学物引起的毒效应及其毒性参数。毒性试验的设计并不是为了证明化学品的安全性，而是为了了解化学品可能产生的毒作用。仅仅检测受试化学物在人的暴露剂量是否引起毒效应是不够的，尽管此剂量已超过人可能的暴露剂量。当引起毒效应的最低剂量(LOAEL)与人的暴露剂量接近时，说明该化学物不安全。当该剂量与人的暴露剂量有很大的距离(几十倍，几百倍或以上)，才认为具有一定安全性，此距离越大，安全性越可靠。如果在研究中所用的一系列的剂量不能引起毒性效应，则认为所用剂量还不足够高，应增加剂量，以确定受试化学晶的毒性。但如果在试验的最高剂量组的剂量与人可能的暴露剂量有足够的安全界限，则对于安全性评价来说未观察到毒效应的研究是可以接受的。在毒理学试验中实验模型所需的动物总是远少于处于危险中的人群。为了在少量动物得到有统计学意义的可靠的结果，需要应用相对较高的剂量，以使效应发生的频率足以被检测到。例如，低达0.01％的癌症发生率，这意味着在100万人群中有100人发生癌症，此发生率太高，不能为公众接受。在实验动物直接检测如此低发生率将至少需要30000只动物。因此，在毒理学试验中，对相对较少的实验动物必须以较高剂量进行试验，然后根据毒理学原则外推估计低剂量的危险性。

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