篇一：免疫学实验报告

免疫学实验报告

免疫实验—抗血清制备及抗体效价检测

摘要：用具有抗原性的物质牛血清白蛋白（BSA)注入到健康动物例如鼠、兔的机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。抗血清，是指含有免疫蛋白的血清。抗体效价指抗体的物理状态及其在体内滞留时间，以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果。此次实验主要是进行小鼠的牛血清白蛋白（BSA)抗血清的制备过程，并通过酶免疫吸附试验（ELISA）对其进行抗体效价检测。

关键字：牛血清白蛋白（BSA) 抗血清抗体效价免疫

实验过程：

本次实验一共分为三个分实验：

实验一：免疫

实验二：抽血、放血，分离抗血清

实验三：ELISA测定抗体效价

实验一：免疫

一、抗血清制备的原理

用具有抗原性的物质注入到健康动物的机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。

二、目的

制备高效价的抗血清

三、实验仪器、材料和试剂

实验仪器：1mL 注射器，酒精棉球，剪刀

材料：家兔，小鼠

试剂：3％～5％苦味酸溶液或80％～90％苦味酸，牛血清白蛋白（BSA)

三、方法和步骤

1、动物编号

左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。红色表示十位数,用黄色表示个位数。免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。

2、动物抓取及注射按

如下图所示抓取目标动物

家兔为300～600 μg/次（400），每次不超过2mL；小鼠为10～100 μg /次（10-20，20~40 μg / ml），每次不超过0.5mL。

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篇二：免疫实验报告-王鹏

北京农学院研究生课程论文

免疫实验报告王鹏

高级免疫学课程实验

学生姓名王鹏学号 201030311009 系别动物科学技术学院专业基础兽医学任课教师李焕荣副教授

20xx年06月01日

免疫实验报告王鹏

多克隆抗体的制备、蛋白质粗提及鉴定

实验一多克隆抗体的制备

一实验目的

1．加深对抗体基本知识的了解。

⒉ 了解多克隆抗体的制备方法。

二实验原理

1.抗原注入家兔体内后，由于是外源大分子物质，将充当抗原刺激免疫系统，由B细胞产生多克隆抗体。在实验中，抗原的纯度越高，越有利于实验。如果抗原同免疫佐剂一同注入，佐剂将加强抗原的刺激效果，使家兔表达更多的抗体，其血清中的抗体浓度也会明显升高。佐剂分为弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂，本次实验采用弗氏不完全佐剂，由羊毛脂与液体石蜡以1：1混合，再与抗原溶液以1：1混合，研磨后形成“油包水”剂，抗原浓度为1mg/ml，每次注入1ml。佐剂组与非佐剂组血清抗体效价的差别可以用ELISA检出。

2.双向免疫扩散实验原理

可溶性抗原与相应抗体在含适量电解质的琼脂凝胶层中从两个孔中向四周扩散，若两者分子比例适当，则在扩散的一定时间后在两孔之间相遇并生成白色沉淀线。观察该白线出现的最大稀释倍数即是抗体的效价。

3.ELISA原理（免疫酶链反应吸附实验）

该技术属于免疫酶技术。酶免疫技术是利用抗原抗体反应的高度特异性和酶对底物高效催化性，将抗原或抗体吸附于固相载体表面，通过底物的显色反应鉴定抗原抗体结合的反应。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

4、抗原和抗体在体内外均可以发生特异性结合，在体外特异性结合后可出现用肉眼或仪器鉴定的现象，并根据结果对样品中的抗原或抗体能进行定性、定量、定位的检测。在进行抗原抗体反应时，多采用人或动物的血清作为抗体来源。蛋白质抗原一般要求相对分子质量约在10000以上。一般而言，相对分子质量越大，结构越复杂，免疫原性越强。BSA的分子量约为67kDa，本实验以它为载体，与半抗原Hb和Dx偶联，可作为抗原刺激机体产生免疫应答。为获得高质量的免疫血清通常使用免疫佐剂，它可增强抗原的免疫原型，延长其在体内的存留时间，使初次反应和二次反应融合在一起，使机体的抗体水平持续上升达到理想效果。

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篇三：免疫学实验报告1

免疫学实验报告

姓名:买迪来木.坎代尔学号:201020131222 班级:2010131 实验一：多克隆抗体的制备和抗体效价的检测

一：实验原理

有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好的抗体。质量好的抗体的标准：特异性强和效价高

多克隆抗体的概念：在含有多种抗原决定簇的抗原刺激下，体内多个 B 细胞克隆被激活并产生针对多种不同表位的单克隆抗体，其混和物为多克隆抗体。机体内所产生多克隆免疫血清实质上是由多种抗体组成的混合物，又称多克隆抗体。

多克隆抗体产生的基本原理：

初次反应的抗体持续时间较短，亲和力也较低，多无实际应用价值。机体初次接触抗原后，激发体液免疫应答反应。在 Mø 和 Th 的作用下，B 细胞被激活,增生分化为浆细胞和记忆 B 细胞（Bm）。浆细胞产生特异性抗体。由于初次反应时，只有少量对该抗原特异的免疫活性细胞被诱导而增生分化为浆细胞。随着抗原的消耗，抑制 T 细胞（Tc）的激活和循环抗体的反馈抑制作用，浆细胞减少，抗体滴度很快下降。

二次反应产生的抗体主要是高亲和力的 IgG。机体再次受同一抗原刺激后，对该抗原特异性的 Bm 迅速增殖分化为浆细胞，产生特异性抗体。Th 的记忆细胞也加快反应的进行，在抗

原作用 1~2 天后，抗体滴度迅速上升。抗体合成率为初次反应的几倍到几十倍。

1.用于免疫的动物

用于免疫的动物可以是哺乳类和禽类，可以是羊、马、兔、鸡等，实验

室常用兔、山羊和豚鼠。

动物种类的选择标准：1.根据抗原的生物学特性和所需获得的抗血清数。

2.用于免疫的动物需适龄、健壮、无感染性疾病，最好为雄性。

3.十分注意动物的饲养，消除动物个体差异及在免

疫过程中死亡的影响。

4.如果用兔子，最好用纯种新西兰兔，一组三只，

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