CDC实验
一.实验原理
细胞表面抗原与相应的抗体（IgG1~3或IgM）特异性结合形成的免疫复合物，可通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此，水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞，染成蓝色，为阳性反应；不带抗原的细胞，未损伤，不染色，为阴性反应。
二. 实验步骤
1.胸腺细胞悬液制备
颈椎脱臼法处死小鼠
↓
暴露胸腔，分离出胸腺
↓
镊子夹住胸腺反复轻轻研磨
↓
单个细胞
PBS洗２次，1000rpm，10min
↓
加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液
调节细胞浓度至3-4×107/ml
三.结果判断
①细胞膜穿孔的细胞呈蓝色，细胞膜完整的活细胞不着色。
②细胞毒性作用的判断标准如下：
阴性反应 ( － ) 死细胞占0-10%
可疑阳性反应 ( ± ) 死细胞占11-20%
弱阳性反应 ( + ) 死细胞占21-50%
阳性反应 ( ++ ) 死细胞占51-80%
强阳性反应 (+++ ) 死细胞占81-100%
四.结果记录
1.表格记录
2.照片展示
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《医学免疫学与微生物学》实验报告 实验一
［实验名称］：沉淀反应
［实验目的］：通过单向琼脂扩散测定待测血清Ig含量
［实验材料］：１％离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、载玻片、毛细吸管
打孔器
［试验步骤］：（１）将溶解后的离子琼脂冷却到４５０Ｃ，加入适当浓度的抗原混合
均匀，吸取３－４毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片而又
不流失。
（２）琼脂凝固后制成凝胶板，然后隔适当距离打孔。
（３）在孔内滴加待测可溶性抗体。
（４）将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置于
３７０Ｃ恒温箱中２４小时，观察沉淀环。
［实验结果］：（沉淀环直径）
测量沉淀环直径： 。
［实验分析］ 单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球蛋
白或补体成分的含量。
在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂中
抗原相遇，在比例适宜处生成白色沉淀环。
沉淀环直径与抗体浓度成正比。根据测试样品沉淀环直径的大小，
可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。
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《医学免疫学与微生物学》实验报告 实验二
［实验名称］：间接凝集抑制试验（妊娠试验）
［实验目的］：测定待检尿液中是否含ＨＣＧ（绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠
［实验材料］：孕妇尿液、非孕妇尿液、ＨＣＧ致敏乳胶抗原、抗ＨＣＧ血清、载玻
片等
［试验步骤］：
（１）取一片载玻片，标记出左右。
（２）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。
（３）在两侧尿液中分别加一滴抗ＨＣＧ血清，摇动混匀２－３分钟。
（４）在两侧液滴中分别再加一滴ＨＣＧ致敏乳胶抗原，摇动混匀２－３分钟。 （５）观察判定结果。
［实验结果］： （凝集和非凝集的描述）
左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。间接凝集抑制阳性。右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。间接凝集抑制阴性。
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《医学免疫学》课程实验教案
实 验 一
实验名称：E-玫瑰花环形成实验 计划学时：4 学时
实验目的与要求：1.掌握人T淋巴细胞形成E-花环的实验原理和操作方法。
2.熟悉T淋巴细胞的功能检测方法。
实验仪器、试剂：淋巴细胞分层液（Ficou）、1%绵羊红细胞、肝素抗凝人血、无钙镁Hanks液、水平离心机、0.8%戊二醛、37℃水浴箱、显微镜、其他。
实验对象：实验同学
实验原理：体外测定人外周血中T淋巴细胞数量的方法有多种,以玫瑰花环试验最为简易常用，T淋巴细胞数量的变化与机体的细胞免疫功能状态有一定关系。人周围血液中T淋巴细胞表面有绵羊红细胞受体，与绵羊红细胞相遇时，在其周围形成花环样细胞团，凡能结合三个以上绵羊红细胞者称为E攻瑰花环形成细胞。正常人的花环形成率为50~70%，大致可以代表周围血中T细胞的百分数。临床上多用于某些疾病的诊断及疗效的观察。
操作方法：
1、取肝素抗凝血1~2ml，用分层液分出淋巴细胞并洗涤，用Hanks液调整细胞浓度为2—2.5×106ml。
2、取小试管加入l ml淋巴细胞悬液及1%羊红细胞0.l ml，混匀置37℃水浴箱5分钟。
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第一章 免疫学概要
1.
2.
机制。
3.
4.
生长。
5.
6.
7. TCR：TCR即T细胞抗原受体，是T细胞表面特异性识别和结合抗原的结构。 SIg：即B细胞表面的膜免疫球蛋白，为B细胞的抗原受体，是B细胞特异识别和结合抗原的结构。 免疫细胞：是指参与免疫应答或免疫应答有关的各类细胞，主要有免疫活性细胞、嗜酸性粒细和嗜碱性粒细胞及组织中的肥免疫自稳：免疫自稳是指机体识别和清除自身衰老残损的组织、细胞的能力，是机体维持正常内环境稳定的重要生理机制。 免疫监视：免疫监视是指机体识别和清除病毒感染的细胞和异常突变细胞的一种生理功能，借以监视和抑制恶性肿瘤在体内免疫：免疫是指机体免疫系统识别“自身”与“非己”抗原，并通过面已经打排除抗原异物，以维持机体生理平衡的功能。 免疫防御：免疫防御是指机体排斥外源性抗原异物的一种免疫保护功能，这是机体不受外来物质干扰，保持物种纯洁的生理大细胞等。
8. CD：CD即白细胞分化抗原，是白细胞（还包括血小板、血管内皮细胞等）在正常分化成熟和记过过程中的不同阶段出现或消失的细胞表面抗原标志。
9. APC：APC即抗原呈递细胞，也称为免疫辅佐细胞，能将抗原信息呈递给T细胞，从而使T细胞活化。主要有单核巨噬细胞和树突细胞两大类。
10.
11. 外周免疫器官：包括淋巴结、脾和黏膜相关淋巴组织等，是免疫细胞聚集和免疫应答发生的场所。 中枢免疫器官：中枢免疫器官又称一级免疫器官，包括骨髓、胸腺。中枢免疫器官是免疫活性细胞的产生、增值和分化成熟的场所，对外周淋巴器官发育和全身免疫功能起调节作用。
12. ADCC：ADCC即抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用。当IgG类抗体与靶细胞表面相应抗原表位特异性结合后，可通过其IgGd Fc段与NK细胞表面Fc受体结合，定向非特异性杀伤靶细胞。
填空题：
1.
2.
3.
4. 5. 6. 7.
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河北大学课程教学大纲
20##年5月20日制（修）订
《医学免疫学》实验教学大纲
(实验课程)
◆课程编号：242025
◆课程英文名称Medical immunology experiment
◆学分/学时：1学分/34学时
◆课程类型： ¨ 通识通修课程 ¨ 通识通选课程
√ ¨ 学科基础必修课程 ¨ 学科(跨学科)选修课程
¨ 专业发展核心课程 ¨ 专业发展拓展课程 ¨ 集中实践课程
◆适用专业（专业类）：五年制临床医学专业（二年级）
◆先修课程：人体解剖学，医学生理学，生物化学，组织胚胎学
一、课程简介与教学目标
（一） 课程简介
医学免疫学是临床医学专业的专业基础课和桥梁学科，是国家规定的主要课程，是我院教学计划中的必修课，是考试课。医学免疫学实验是临床医学专业重要的实验教学内容之一。《医学免疫学》与《人体解剖学》、《医学生物学》、《组织胚胎学》、《生理学》及《病理学》和各临床学科关系密切。学生应在掌握前述基础学科的基础上，系统学习本学科的内容，以此学科为桥梁，学习后续的基础与临床学科。
（二） 教学目标与要求
通过实验课的教学进一步印证理论教学的内容，通过实验设计、操作及结果分析使学生掌握免疫学实验的基本原理、基本操作技能，同时在教学过程中培养学生独立思考、分析问题、解决问题的能力,为后续实验课程的学习及今后的临床工作打下良好的基础。
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四川农业大学
动物微生物及免疫学（实践教学）
实验报告
组长：**********
组员：**********
二零一二年四月
一、实验目的
（一）掌握一般培养基的制备原理及要求，掌握培养基酸碱度的测定，熟悉一般培养基的制备过程和各种器皿灭菌方法。
（二）掌握细菌分离培养的基本要领和方法，掌握细菌抹片的制备方法和革兰氏染色法及油镜的使用方法，并认识革兰氏染色的反应特性。
（三）掌握学习用微生物学原理诊断疾病的一般方法及步骤。
二、实验用品
（一）器材
量筒、烧杯、电子天平、漏斗、三角烧瓶、空试剂瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、pH试纸、纱布、脱脂棉、天平、电炉、试剂瓶瓶塞、扎绳、放大镜、包装纸、洗耳球、酒精灯、载玻片、火柴、吸水纸、剪刀、记号笔、接种环、注射器、镊子、钳子、毫米尺、培养箱、水浴培养箱、高压蒸汽灭菌锅、油镜
（二）试剂及材料
肘胨、蛋白胨、猪胆盐、氯化钠、琼脂、乳糖、0.01%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氢氧化钠、盐酸、牛血清、革兰氏染色液、蒸馏水、小白鼠、病猪内脏
三、实验步骤
（一）培养基的制备
（所有用到的器皿都已121℃高压灭菌15~30min，倾注平板在无菌操作台内完成，并放在无菌操作台内）
1、麦康凯培养基
（1） 组成：蛋白胨17g、肘胨3g、猪胆盐5g、氯化钠5g、琼脂17g、乳糖10g、0.01%结晶紫水溶液10ml、0.5%中性红水溶液5ml、蒸馏水1000ml
（2） 方法：将蛋白胨、肘胨、猪胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，调节pH至7.2。将琼脂加入600ml蒸馏水中，并加入乳糖，加热熔化。将两液混合，分装于烧瓶内，用纱布、扎绳等捆好后，121℃高压灭菌15~30min。待冷却至50 ~ 55℃ 时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。
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日期：20##年 月 日 星期五 
