20##年生物化学实验B
实验报告
姓 名： XXXX
学 号： XXXXXX
实验时间： 20##年11月17日
实验分组： 第7组
组内成员： XXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXX
任课教师： XXXX
摘要
本实验通过从小牛肠中通过刮去，离心，析出等方式提取小牛肠碱性磷酸酶，再通过SDS-聚丙烯凝胶电泳测定蛋白质相对分子量，利用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量及测定酶的活性。
1.实验部分
1.1试剂与仪器
1.试剂：
（1）正丁醇、丙酮。
（2）1 mol/L 醋酸，1 mol/L NaOH，硫酸铵。
（3）平衡缓冲液：0.01 mol/L Tris-HCl，pH 8.0。
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生物化学实验报告
纤维素酶活力的测定
还原糖的测定--3,5-二硝基水杨酸法
刘欣怡 201100140057
20##级生物基地班
周一下午 同组者：刘艺
20##年4月8号 周一下午
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实验一 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质的含量（p24）
一、目的要求
掌握考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质含量原理和方法。
二、实验原理
考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质─染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。
考马斯亮兰G-250染料在酸性溶液中为棕红色，当它与蛋白质通过范德华键结合后，变为蓝色。在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰（lmax）的位置，由465nm变为595nm。且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。
考马斯亮蓝染色法的突出优点是：
（1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。
（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。
（3）干扰物质少。如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。
此法的缺点是：
（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。
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存车处
生物化学综合实验 实验报告
项目名称：核酸的分离纯化及性质研究
指导教师： 商亚芳
班 级：食品科学与工程类13-04班
姓 名：俞海清
学 号：2013218687
日 期：2015/07/02-07/03
小组成员：俞海清 曾斯棋
核酸的分离纯化及其性质研究
摘要：提取植物组织DNA和动物肝脏的DNA，先要破碎细胞，然后通过离心获得沉淀。分理出脱氧核糖蛋白（DNP）。利用阴离子除垢剂（SDS），将蛋白质和DNA 分离开来，用氯仿-异戊醇去蛋白质蛋白质变性，然后离心除去变性蛋白质，之后用乙醇将DNA沉淀出来，得到粗蛋白质。为了获得高纯度的DNA，采用适量的RNase来降解残留的RNA，再利用乙醇来提取DNA，重复多次来获得较纯的DNA。再利用DNA紫外吸收特性测定DNA的纯度时，发现提取出来的DNA纯度比较高。利用二苯胺法测定DNA的含量，发现DNA含量偏低。DNA产率很低。最后采用琼脂糖凝胶电泳来分离DNA，测定DNA片段的分子质量。结果实验成功的在紫外线下观察出了标准DNA条带以及待测样品条带。
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第二节 实验记录和实验报告的书写
正确记录实验过程及书写实验报告，是训练学生进行正规实验训练的重要内容。实验是在理论指导下的科学实践，目的在于经过实践，掌握科学观察的基本方法和技能，培养学生的科学思维、分析判断和解决实际问题的能力。也是培养探求真知、尊重科学事实和真理的学风，以及培养科学态度的重要环节。
为此，要求学生在实验前必须预习、理解从基本原理和实验基本操作步骤、注意事项，列出所需试剂和仪器，实验中组织安排好时间，严肃认真地执行操作，细致观察变化，如实作好记录、书写实验报告等。
一、实验记录
实验记录要整洁、字迹清楚。
实验中观察到的现象、结果和数据，耍及时地直接记在记录本。原始记录必须准确简练、详尽、清楚。
记录时，应做到如实正确记录实验结果，不可夹杂主观因素。在实验条件下观察到的现象，也应如实仔细地记录下来。在定量实验中观测到的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光电比色计的光密度值等，都应设计一定的表格准确记录。并应根据仪器的精确度准确记录有效数字。要求对实验的每个结果都应正确无遗漏地做好记录。
实验中使用仪器的类型、试剂的规格、化学反应式、分子量、浓度等，都应记录清楚。实践过程中，应一丝不苟，努力培养严谨的科学作风。
完整的实验记录应包括日期、实验题目、目的、操作、结果。
二、实验报告
实验结束后，应及时整理和总结实验结果及记录，写出实验报告。
实验报告应包括实验名称、实验日期、目的要求、原理、试剂配制、仪器设备、操作方法；实验结果、讨论等项内容。
书写实验报告时，目的和要求、原理以及操作方法部分应作简单扼要的叙述，但对实验条件和操作的关键环节必须写清楚。对于实验结果部分，应根据实验的要求，把所得的实验结果和数据进行整理、归纳、分析和对比，并尽量总结成各种图表，如标准曲线图以及实验组与对照组实验结果的比较表等。还应针对实验结果进行必要的说明和分析。讨论部分不是对结果的重述，而是对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及对于实验设计的认识、体会和建议。
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生物化学实验报告
班级
姓名
实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳
[目的]
[原理]
[仪器组成]
[操作与结果]
[结果粘贴]
实验二 酶的特异性
[目的]
[原理]
[操作与结果]
将以上1、2、3号试管置于37℃水浴箱保温10分钟。然后向各管中加班氏试剂20滴，沸水中煮沸10分钟，取出勿振摇试管，观察结果并记录。
[分析]三管结果及原因。
实验三 温度、pH、激活剂、抑制剂
对酶反应的影响
[目的]
[原理]
[操作与结果]
（一）温度对酶反应的影响
[分析各管的颜色变化原因]
（二）pH对酶反应的影响
[分析各管的颜色变化原因]
（三）激活剂、抑制剂对酶反应的影响
[分析各管的颜色变化原因]
实验四 721型分光光度计的使用
[目的]
[原理]
[构造]
[使用]
实验五 血清葡萄糖的测定
[目的]
[原理]
[操作]
将上述各管混匀，置于37℃水浴箱中保温15分钟，取出分别倒入0.5cm的比色杯中，选择波长λ=505nm，用空白管调节“0”及“100”，分别读取标准管及测定管的吸光度
A标、A测。
[计算]
[临床意义]
实验六 琥珀酸脱氢酶的作用及抑制
[目的]
[原理]
[操作]取三支试管按下表操作
[思考]
1、液体石蜡起什么作用？
2、各管颜色变化的原因？
实验七 肝脏中酮体的生成作用
[目的]
[原理]
[操作]
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